4+7 带量采购项目的实施,直接影响到药企的方方面面,也使得企业更加关注创新药物研发的投入,从而给分析工作者带来大量工作。安捷伦为提高分析科学家的效率殚精竭虑,推出多种自动化方案来解救他们,以下就是其中一个实验室的情景再现……

  “ Faint!又是一堆峰要分离优化!我还想今天观赏刚下载的《爱死机》呢!”

  作为实验室液相分析主力的小 A,总会被 boss 发来的各种限时挑战任务击中,不过他自诩为“位面之子”,每次都能绝处逢生,化险为夷。可是这次小 A 又将面临什么局面?

  16 种化合物的方法优化! 虽然不是全新开发,但原始方法的分离效果实在是惨不忍睹,好几个组分是共流出或者刚分出点叉,可老板的要求是全部基线分离!

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图 1. 原始方法分离效果

   “按常规套路来,一段段地优化梯度,估计一周也不一定能有时间看我的美剧了…” 小 A 一边哀叹一边思考有什么捷径,在实验室里走来走去寻找灵感。突然,实验室新安装的 Agilent Prime LC 方法筛选系统闪过眼前,号称方法开发终极神器的这一套,能不能带我上车带我飞啊?

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图 2. Agilent Prime LC 方法筛选系统

  小A 是个行动派,立刻开始他的方案设计,根据之前培训的心得,他确定了基于现有梯度条件来筛选有机相和色谱柱的方案。找出手头现有的各种色谱柱,小 A 又开始犯愁,有长有短有粗有细的这一捆柱子,怎么才能使用?

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图 3. 令人眼花缭乱的柱子,该选哪个好?

  幸好当初参加安捷伦的 MasterClass 课程时,加了应用工程师的微信,是时候发出求援信号啦。

  经过和应用工程师的深入讨论,小 A 又学到一招,原来筛选软件会根据色谱柱的长度和内径自动换算合适的梯度时间和流速,而且所有有关色谱柱的规格及使用情况的信息都可以通过色谱柱识别射频标签由仪器自动识别,实在太贴心了。

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图 4. 筛选软件自动换算截图

  接下来,小 A 进入软件,用向导软件开始编辑筛选过程,选择想测试的色谱柱,确定流动相组成,设置梯度比例,设定柱温,指定样品一系列流程后,一张完整的序列表就自动生成了。神奇的是,软件不但自动帮小 A 编好了色谱柱及流动相切换间的冲洗和平衡条件,还告诉小 A 整个序列需要 17 个小时来运行以及各个流动相所需消耗的总量,完全不用担心色谱柱污染损坏以及流动相跑干等头疼的问题。

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图 5. 软件流程界面截图

  一番忙碌后,整套系统就绪,流动相蓄势待发,色谱柱各就各位,就等主人念出那句芝麻开门了。

  Fire!小 A 郑重按下运行按钮,液相开始发出各种声音,状态灯也变幻色彩,各个模块欢快的运行起来。小 A 观察了一会,觉得一切正常,欢乐地下班回家,刷剧去也。

  第二天上午 10 点,小 A 如约而至来到仪器旁,序列已经准时完成,系统也结束了色谱柱冲洗保存的工作。激动人心的时刻就要来临,结果揭晓了。

  虽然做了一夜的实验,产生了几十张图谱,不过小 A 还是用简单的方式看到了结果总结,报告巧妙地进行了降维可视化处理,几十张色谱图变成方寸空间里大小不一的斑点,表征了每次运行的结果。

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图 6. 可视化处理结果

  选择了大致可能的几个条件,下一步小 A 就用报告再进行结果细筛,他分别用报告内置的几种排序方式对结果排序,最后根据分离度和、最小分离度、峰个数等几项指标,确定了最佳方法。在这个方法中,16 种化合物完全分离,幸福居然亲自来敲门,小 A 简直无法置信。

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图 7. 方法优化前后的分离结果对比( A:新方法,B:原始图谱)

  一周的工作,一夜完成。从此,小 A 和 Prime LC 方法筛选系统在实验室快乐地生活着。

  敲黑板划重点

  Prime LC 方法筛选系统,在短时间内对色谱条件筛选进行合理有序安排,确保更高的方法开发效率,缩短到达正确目标的距离,实乃居家旅行,方法开发必备精品。


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