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荧光素酶基因是怎样产生的

用作报告基因的荧光素酶基因emphasis:role=italiclucemphasis主要来自细菌和萤火虫。细菌荧光素酶以脂肪醛为底物,在还原型黄素单核苷酸参与下,使脂肪醛氧化为脂肪酸,同时释放出光子。萤火虫的荧光酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉类物质生成氧化荧光素,同时放出光子。依据上述原理建立的荧光素酶基因的检测方法简便、灵敏。其工作原理如下:将昆虫荧光素和ATP与表达荧光素酶的植物细胞混合,该酶催化昆虫荧光素的氧化反应,生成AMP、COsubscript2subscript和光,因此表达荧光素酶的重组植物细胞或组织可用胶片感光的方法进行检测和示踪。例如,将重组植物的叶子表面用砂纸磨损,然后浸入含有昆虫荧光素和ATP的缓冲溶液中保温若干时间,晾干,将X光胶片覆盖在叶子上,则表达昆虫荧光素酶的部位就会使胶片感光。......阅读全文

荧光素和荧光素酶是什么

荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统

荧光素酶的测定

实验方法原理 荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,Photinus Pyralis。荧光素+ATP+O2→氧和虫荧光素+PPi+H2O+光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相关的式中,H 是 Planck 常量;v 是发射光的频率。当 ATP 浓度非常低([ATP]

双荧光素酶验证

miR 和LncRNA/circRNA/mRNA 结合双荧光素酶验证方案 一、 检测原理全基因合成 miR 潜在结合位点上下游~500bp( LncRNA、circRNA 或 mRNA 的3’UTR)野生形式 WT 及结合位点的突变形式 Mut,克隆到 psiCHECK-2 多克隆位点处

荧光素酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,Photinus Pyralis。荧光素+ATP+O2→氧和虫荧光素+PPi+H2O+

荧光素酶检测(Luciferase assay)

Introduction Luciferase can be used as a reporter gene to measure the activity of promoters, and/or the transfection efficiency. Aims You will be prov

荧光素酶的测定实验

实验方法原理荧光素 4-单氧酶(ATP-水解)提取于萤火虫,Photinus Pyralis。荧光素+ATP+O2→氧和虫荧光素+PPi+H2O+光光密度 I 是和 Michaelis-Menten 等式相关的式中,H 是 Planck 常量;v 是发射光的频率。当 ATP 浓度非常低([ATP]<

什么是双荧光素酶

荧光素酶(Luciferase)是催化莹光素氧合而发光的蛋白酶即[让萤火虫尾部荧光素发出荧光的蛋白质]莹光素+ATP+O2-->氧合莹光素+AMP+PPi+荧光

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣