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键合硅胶高效液相色谱柱使用中应注意哪些基本问题

首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa,压力过高会加速损毁色谱柱。第三,柱温。色谱柱温度最好不要超过45℃。也是会加速损毁色谱柱。还有pH值。色谱柱的pH值范围是不同的。大多数色谱柱的pH值范围是4-7左右。有些偏向酸性,有些偏向碱性的,还有一些pH值广泛的。这些按照说明书操作即可。除此之外,色谱柱还有别的一些需要注意的事情。首先,键合硅胶色谱柱分成几种。比如C18、C8、苯基柱这些的使用方法都差不多。是反相色谱柱。它们的流动相中还有大量的水,还有无机盐。这个时候需要注意,无机盐是不能够长时间留在色谱柱里面的。色谱柱最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面。但是无机盐不能溶于纯甲醇......阅读全文

液相色谱仪的化学键合固定相

液相色谱仪的化学键合固定相是将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相,其突出特点是耐溶剂冲洗,可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离选择性。一、键合相性质:目前,键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基质,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应形成Si-O-

HPLC基础知识(五)

4.与检测器有关的故障及其排除1)流动池内有气泡   如果有气泡连续不断地通过流动池,将使噪音增大,如果气泡较大,则会在基线上出现许多线状“峰”,这是由于系统内有气泡,需要对流动相进行充分的除气,检查整个色谱系统是否漏气,再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内,也

HPLC基础知识教程(十二)

  二、化学键合固定相  将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。  1.键合相的性质  目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或

化学键合固定相基本理论

化学键合固定相的基本理论将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。1.键合相的性质目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面

极性键合相色谱仪分析技术

极性键合相色谱仪是以硅胶表面键合极性有机基团的键合相作为固定相的液相色谱仪。一、分离机制:分离机制有分配作用和吸附作用两种说法。1、分配作用:把硅胶表面键合的极性基团视为一层液膜,样品组分分子在流动相和极性液膜之间进行分配,按分配系数的差别而实现分离。2、吸附作用:把极性键合相视为一种弱吸附剂,样品

液相色谱仪中化学键合固定相的应用方法

化学键合固定相一般都采用硅胶(薄壳型或全多孔微粒型)为基体。在键合反应之前,要对硅胶进行酸洗、中和、干燥活化等处理,然后再使用硅胶表面上的硅羟基与各种有机型硅化合物起反应,制备化学键合固定相。液相色谱仪中化学键合固定相的特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。1.

高效液相色谱柱的分类与应用特点(一)

高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事

高效液相色谱法对色谱柱的要求!

反相色谱系统使用非极性填充剂,常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多

高效液相色谱法入门知识(一)

高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有

药典中的高效液相色谱法(一)

高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有

使用液相色谱柱的要求是什么?液相色谱柱的使用要求

液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,产品具有使用灵活、性能稳定、操作简等优点。用户使用液相色谱柱时是有一定的要求的,今天小编就来具体介绍一下液相色谱柱的使用要求,希望可以帮助到大家。填充剂的要求最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键

高效液相色谱柱有哪些要求?

填充剂的要求  最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统

使用液相色谱柱的要求是什么?液相色谱柱的使用要求

液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,产品具有使用灵活、性能稳定、操作简等优点。用户使用液相色谱柱时是有一定的要求的,今天小编就来具体介绍一下液相色谱柱的使用要求,希望可以帮助到大家。填充剂的要求zui常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶zui为常用,辛

液相色谱柱有哪些要求?

 zui常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶zui为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝

液相色谱柱的管理与保养

  液相色谱柱的管理与保养   色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损

液相色谱柱的管理与保养

色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的

化学键合相色谱仪应用范围分析

化学键合相色谱仪有反相键合相色谱仪、正相键合相色谱仪和其它键合相色谱仪,在液相色谱仪中占有很重要的地位,应用广泛。一、反相键合相色谱仪:反相键合相色谱仪的应用约占键合相色谱仪的70%,是目前应用最广泛的液相色谱仪。反相键合相有C18、C8、氰基和苯基等,C18、C8、氰基和苯基的应用分别约占反相键合

高效液相色谱柱的管理与保养

高效色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和

现代液相色谱进展

  色谱法最初仅仅是作为一种分离手段,是根据混合物中不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些组分在两相间进行反复多次的分配,从而得到分离。直到五十年代,人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来,成为一种独特的分析方法,是几十年来分析化学中最富活力的领域之一,

液相色谱中常用的色谱柱填充剂

液相色谱中常用的色谱柱填充剂;常见的柱填料是化学键合硅胶反相色谱系统采用非极性填料常用的是十八烷基硅烷键合硅胶,也使用了辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶如氰基键合硅胶和氨基键合硅胶相色谱系统使用极性填料,通常的填料是硅胶等离子交换色谱系统采用离子交换填料,分子排阻色谱采用凝胶或聚合物多孔微球

HPLC的固定相和流动相(二)

2.键合相的种类化学键合相按键合官能团的极性分为极性和非极性键合相两种。常用的极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)键合相。极性键合相常用作正相色谱,混合物在极性键合相上的分离主要是基于极性键合基团与溶质分子间的氢键作用,极性强的组分保留值较大。极性键合相有时也可作反相

HPLC的固定相和流动相(一)

在色谱分析中,如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离,是色谱工作者的重要工作,也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。一、基质(担体)HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝

正相键合相色谱法

键合相色谱法正相键合相色谱法 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似,也是烷烃(常用正已烷等)加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似,但极性小于硅胶,即用相同的流动相及其它条件相同时,同一组分的保留时间将小于硅胶

浅谈液相色谱柱的选择

随着HPLC的普及,分析方法学的开发成为一个合格的分析研究员的标配,而色谱柱的筛选是分析方法开发的第一步,也是最重要的一步,优秀的分析研究员可以根据化合物的结构特征很快确立所需的色谱柱,然后根据化合物的Pka,logP确立流动相。分析方法学的开发学问多多,本文就色谱柱的筛选进行简单介绍。1、HPLC

化学键合相色谱仪键合固定相的制备方法

化学键合相色谱仪键合固定相是利用化学反应将有机分子通过共价键键合在载体表面上,形成均一、牢固的单分子液膜而构成的固定相。一、键合固定相的分类:载体几乎都用硅胶。1、疏水基团:不同链长的烷烃(C8 和 C18)和苯基等。2、极性基团:氨丙基、氰乙基、醚和醇等。3、离子交换基团:作为阴离子交换基团的胺基

化学键合相色谱仪键合固定相的制备方法

化学键合相色谱仪键合固定相是利用化学反应将有机分子通过共价键键合在载体表面上,形成均一、牢固的单分子液膜而构成的固定相。一、键合固定相的分类:载体几乎都用硅胶。1、疏水基团:不同链长的烷烃(C8和C18)和苯基等。2、极性基团:氨丙基、氰乙基、醚和醇等。3、离子交换基团:作为阴离子交换基团的胺基、季

液相色谱柱通论

选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3.

选择液相色谱柱简单思路

1. 确定分离目的      确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质      评估分析物的化学性质,诸如化学结

如何选择符合您需求的HPLC或UHPLC色谱柱?(三)

3.ACE Excel为UHPLC带来了享有盛誉的ACE HPLC性能重要的是要认识到色谱柱的选择性和柱效是独立的变量,在开发分离方法时您不必选择使用一种而不使用另一种。事实上,为了实现最佳的总体分离效果,您应当对上述两个变量以及保留值进行优化。当需要实现高速分离时尤其如此。(参见图7)图 7:利用

液相色谱固定相分类解析

    液相色谱固定相一般分为5种类型,这五种不同的固定相又将液相色谱分为各具特色的液相色谱。    1、正相色谱    八十年代初,人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化