毛细管区带电泳色谱仪分析技术

毛细管区带电泳色谱仪(CZE)又称自由溶液区带电泳仪,整个系统采用同一种缓冲液充满,以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异进行分离。一、工作原理: CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管中,由于电渗流的存在,所有粒子都随电渗流一起向负极迁移,电渗流速度约是一般离子电泳速度的5~7倍。各种电性粒子在毛细管中的迁移速度分别为:1、阳离子:vap = veo+ vep,阳离子电泳方向与电渗流方向一致。2、阴离子:vap = veo-vep,阴离子电泳方向与电渗流方向相反。3、中性粒子:vap = veo,中性粒子运动方向与电渗流方向一致。当样品从阳极端注入毛细管时,不同电性的粒子将按不同速度向负极迁移,从负极端先后流出毛细管,出峰顺序依次是阳离子、中性粒子和阴离子。中性粒子无电泳现象,随电渗流同行,在阳离子后流出......阅读全文

毛细管区带电泳色谱仪分析技术

毛细管区带电泳色谱仪(CZE)又称自由溶液区带电泳仪,整个系统采用同一种缓冲液充满,以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异进行分离。一、工作原理: CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管

毛细管区带电泳色谱仪分析技术

 一、工作原理:  CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管中,由于电渗流的存在,所有粒子都随电渗流一起向负极迁移,电渗流速度约是一般离子电泳速度的5~7倍。各种电性粒子在毛细管中的迁移速度分别为:  1、阳离子:vap

毛细管区带电泳色谱仪工作原理

毛细管区带电泳色谱仪(CZE)的整个系统采用同一种缓冲液充满,以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异进行分离,是CEzui基本、应用最广的分离模式。CZE中,粒子的电荷性质不同,电泳方向不同;粒子的电荷数量不同,电泳速度不同;粒子的分子量不同,电泳速度不同。在毛细管中

毛细管区带电泳色谱仪常用缓冲液

毛细管区带电泳色谱仪的整个系统用同一种缓冲液充满,带电粒子的迁移速度是电泳速度和电渗流速度的矢量和,缓冲液的选择直接影响粒子的迁移和分离。常用缓冲液及其pKa值如下:  1、磷酸:pKa = 2.12  2、柠檬酸:pKa = 3.06  3、甲酸盐:pKa = 3.75  4、2-羟基异丁酸:pK

凝胶色谱仪分析技术

凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用,是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。一、工作原理:小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。大分子被排斥在外,出峰最快。二、固定相:1、半刚性凝胶:为高交联度的聚苯乙烯,孔径范围较宽。常以有机溶剂作流动相。2

毛细管区带电泳色谱仪缓冲液的选择

毛细管区带电泳色谱仪的分离过程在缓冲液中进行,缓冲液的选择直接影响粒子的迁移和分离。一、缓冲液的选择须遵循的要求:  1、在所选择的pH范围内有很好的缓冲容量。  2、在检测波长处无吸收或吸收值低。  3、为达到有效的进样和合适的电泳淌度,缓冲液pH值至少与被测组分的等电点相差l个pH单位。  4、

影响毛细管区带电泳色谱仪分离的操作条件

影响毛细管区带电泳色谱仪分离的操作条件有缓冲液、添加剂、分离电压和分离温度等。一、缓冲液:CZE分离过程在缓冲液中进行,缓冲液的选择直接影响粒子的迁移和分离。配制缓冲液时,必须使用高纯蒸馏水和试剂。使用前要用0.45μm滤膜过滤以除去颗粒等。1、缓冲液的选择须遵循的要求:(1)在所选择的pH范围内

高效凝胶色谱仪分析技术

       高效凝胶色谱仪分析中不具有分配、吸附和离子交换作用,是基于样品分子尺寸和形状不同实现分离的。一、工作原理:        小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰zui慢。        中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。        大分子被排斥在外,出峰zui快。二、固定相: 

毛细管区带电泳

样品在电解液中泳动,根据物质的荷/质比差异来进行分离,比值愈大,跑得愈快。 毛细管带电泳毛细管区带电泳的进样方式有三种,分别为压力进样、电动进样、浓缩进样,如下图: 方式 常用毛细管规格如图示,毛细管分非涂层毛细管(裸管)和内壁涂层毛细管(涂层管)两类。 分类非涂层毛细管-电渗流的概念(电渗流是CE

毛细管区带电泳色谱仪与毛细管等电聚焦电泳色谱仪比较

毛细管区带电泳色谱仪是利用溶质分子在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个个独立的溶质带而达到分离,毛细管等电聚焦电泳色谱仪是利用不同等电点的溶质分子分别聚集在毛细管内不同的位置上不作迁移而达到分离。两者比较如下:一、分离原理:  1、毛细管区带电泳色谱仪:电泳淌度不同  2、毛细管等电

毛细管区带电泳色谱仪缓冲液的选择要求

毛细管区带电泳色谱仪的整个系统用同一种缓冲液充满,带电粒子的迁移速度是电泳速度和电渗流速度的矢量和,缓冲液的选择直接影响粒子的迁移和分离。一、在所选择的pH范围内有很好的缓冲容量。二、在检测波长处无吸收或吸收值低。三、为达到有效的进样和合适的电泳淌度,缓冲液的pH值至少必须比被分析物的等电点相差l个

芯片毛细管区带电泳

毛细管区带电泳是芯片毛细管电泳分离蛋白质的一种最基本的分离模式。它基于不同的蛋白质分子在电场中的迁移速率不同而实现分离,是一种简单、快速的分离方法。采用区带电泳分离模式已成功地分离了多种蛋白质样品。Colyer等采用毛细管电泳芯片,以区带电泳模式对人血清蛋白样品进行了分离,可分辨出4个蛋白质区带(即

毛细管电色谱仪分析技术

效毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微

色谱仪常规的分析技术指标

常规液相色谱仪分析常用的主要技术指标是选择性因子、有效塔板数和分离度。一、选择性因子α:用选择性因子α来评价固定液。选择性因子α的定义与相对保留值基本相同。不同之处在于,选择性因子α是两个相邻峰的调整保留值的比率(后峰比率的前峰a(>1),而不是被测物质的调整保留值与标准物质的比率(可能小于1)。选

毛细管区带电泳的概念

中文名称毛细管区带电泳英文名称capillary zone electrophoresis;CZE定  义在毛细管内进行的区带电泳。常需对毛细管内壁作涂层处理尽量降低电渗流。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

液相色谱仪技术应用情况分析概述

 液相色谱仪填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成。   液相色谱仪使用注意事项:安装拆卸色谱柱必须在常温下,填充柱有卡套密封和垫片密封,卡套分三种,金属卡套,塑料卡套,石墨卡套,安装时不易拧的太紧。

极性键合相色谱仪分析技术

极性键合相色谱仪是以硅胶表面键合极性有机基团的键合相作为固定相的液相色谱仪。一、分离机制:分离机制有分配作用和吸附作用两种说法。1、分配作用:把硅胶表面键合的极性基团视为一层液膜,样品组分分子在流动相和极性液膜之间进行分配,按分配系数的差别而实现分离。2、吸附作用:把极性键合相视为一种弱吸附剂,样品

毛细管电色谱仪分析技术(二)

②电动填充法:电动填充是利用电泳原理,使固定相在一定pH下带电荷,在电场中定向移动而把固定相填充到毛细管中。与高压匀浆填充法相比,电动填充法可有选择地把荷质比相同的固定相填入毛细管中,柱床均匀。③超临界CO2法:超临界CO2法是在毛细管柱一端制作临时柱塞后,另一端与贮液罐相连,将预填充的填料放入贮液

毛细管胶束电泳色谱仪分析技术

毛细管胶束电泳色谱仪(MECC)是在缓冲液中加入浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂,胶束相在分离中起到准固定相的作用,是电泳技术与色谱技术相结合的产物。一、工作原理: MECC中,把离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)加入缓冲液,当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负电的胶束。虽然胶束带负

毛细管电色谱仪分析技术(一)

毛细管电色谱仪(CEC)整合了液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的优点,在毛细管柱中填充固定相颗粒、管壁键合或涂覆固定相、制成连续床固定相,以压力和电渗流共同驱动流动相,利用样品各组分在固定相和流动相中分配系数差异和本身淌度差异进行分离。在HPLC和CE双重分离机理的作用下,CEC对样品细微之

毛细管区带电泳的相关介绍

  CZE 分离多肽类物质主要是依据不同组分中的化合物所带电性决定,比传统凝胶电泳更准确。目前存在于CZE 分离分析多肽物质的主要问题是天然蛋白或肽易与毛细管硅胶柱上的硅醇发生反应,影响峰形与电泳时间,针对这些问题不少学者做了大量实验进行改进,如调节电池泳液的PH 值,使与硅醇反应的极性基团减少;改

毛细管区带电泳发展史

  电泳是电解质中带电粒子在电场力作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用这种现象对化学和生物化学组分进行分离的技术称为电泳技术,可以实现电泳分离技术的仪器称为电泳仪。从20世纪30~40年代起,相继发展了多种基于抗对流载体的电泳仪(如纸电泳仪和凝胶电泳仪等)。传统电泳仪由于受到焦耳热的限

毛细管区带电泳出峰顺序

  气象色谱用的最多的时毛细管柱,对于毛细管柱里样品的出峰顺序,  影响因素很多,主要有如下两点:  一:色谱柱填料的类型  二:样品本身的特性  例如毛细管柱的填料分为非极性柱,弱极性柱,中极性柱和强极性柱等,对于非极性柱,出峰顺序主要由样品本身的沸点(分子量)决定,沸点越高,出峰越慢。而在强极性

液相色谱仪使用的技术资料分析阐述

 液相色谱仪是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中,为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。    液相色谱仪的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100

毛细管等速电泳色谱仪分析技术

毛细管等速电泳色谱仪(CITP)是采用先导电解质和尾随电解质,利用待测离子淌度的不同进行分离。一、CITP条件:1、特殊的电解质系统:(1)前导电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力的离子。(2)尾随电解质:淌度比样品中任何离子的淌度都小并具有一定缓冲能力的离子。(3)对离子:以

白酒分析气相色谱仪的技术指标

一:填充柱测定白酒中的醇酯  方法原理:该方法采用DNP的填充柱,氢火焰离子化检测器检测,乙酸正丁酯为内标物定量白酒中的醇酯的含量。  测定组分:乙醛、甲醇、乙酸乙酯、正丙醇、仲丁醇、乙缩醛、异丁醇、正丁醇、丁酸乙酯、异戊醇、戊酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯。  检测条件:柱温90℃、检测器135℃、汽

气相色谱仪热裂解进样分析技术

气相色谱仪热裂解进样分析是在一定条件下,高分子有机物遵循一定的裂解规律,即特定的样品能够产生特定的裂解产物和产物分布,采用气相色谱分析和鉴定裂解产物,可据此对原样品进行表征。一、基本原理:将高分子样品置于裂解器中,在严格控制的操作条件下,使之迅速高温热裂解,生成可挥发的小分子产物,然后将裂解产物送入

毛细管凝胶电泳色谱仪分析技术

毛细管凝胶电泳色谱仪(CGE)是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合,是当今分离度极高的一种分离技术。一、载体特性:采用聚丙烯酰胺凝胶作为载体的目是防止CGE电泳过程中分子的对流和扩散,使待测组分得到更

琼脂糖凝胶电泳色谱仪分析技术

琼脂糖凝胶电泳色谱仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳技术,广泛用于核酸研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。一、工作原理:琼脂糖凝胶电泳中,DNA分子的迁移率与其分子量的常用对数成反比。DNA分子构象对迁移率也有影响,迁移率为共价闭环DNA>直线DNA>开环双链DNA

毛细管电泳色谱仪分离分析模式详解

分析模式详解。毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳