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如何做实时荧光定量PCR(realtimePCR)

标签: 实时 荧光定量 PCR realtime PCR 本生生物 所谓实时荧光定量 PCR 技术,是指在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 原理及材料: 实验材料:细胞样品 试剂、试剂盒:RNA 提取试剂盒 荧光定量 PCR MixTRIZOL dNTP lf 仿 逆转录酶 MMLV ybc Taq 酶 DEPC 水 ddH2O TE MgCl2 琼脂糖 溴化乙锭 MOPS jiaquan 乙酸钠 EDTA EB 溴酚兰 仪器、耗材:离心管 离心机 风光光度计 电泳槽 凝胶板 Realtime PCR 仪 实验步骤: 一、 样品 RNA 的抽提 1. 取冻存已裂解的细胞,室温放置 5 分钟使其完全溶解。 2. 两相分离 每 1 ml 的 TRIZOL 试剂裂解的样品中加入 0.2......阅读全文

实时荧光定量PCR(realtime PCR)

            实验方法原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

qRT-PCR

实验概要实时定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前,实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种:荧光探针和荧光染料。1)TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的

qRT-PCR

实验概要实时定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前,实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种:荧光探针和荧光染料。1)TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的

荧光定量PCR具体使用操作步骤简介

操作步骤荧光定量PCR 实验步骤:折叠样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层