用肽适配体正向分析细胞过程实验2
辅助方案 肽适配体靶点的鉴定实验方法原理通过配对相互作用或捕获法鉴定的肽适配体的假定靶点应当通过遗传学测试进行验证，例如：1. 用免疫沉淀法确定体内适配体的相互作用；2. 通过上位（显）性分析以确定适配体在与靶蛋白相同的区域发挥功能；3. 比较由靶蛋白删除或过表达引起的表型与由适配体造成的表型。实验材料编码硫氧还蛋白肽适配体的 DNA质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒完全极限（CM） 缺失成分液体培养基和平板捕获库实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用含有与 PEG202 多接头相容并与 LexA 编码框整合的限制酶切位点的引物进行 PCR 扩增编码硫氧还蛋白肽适配体的 DNA。2. 用标准的亚克隆技术将 PCR 产物插入到 pEG202 中以构建出肽适配体诱饵。3. 按照标准的乙酸锂转化法将各个肽适配体诱饵和 pSH18-34 （lacZ 报道质粒）转入 EGY48 （Mata） 中。同时用一对照质粒（......阅读全文
用肽适配体正向分析细胞过程实验2
辅助方案 肽适配体靶点的鉴定 实验方法原理 通过配对相互作用或捕获法鉴定的肽适配体的假定靶点应当通过遗传学测试进行验 证，例如： 1. 用免疫沉淀法确定体内适配体的相互作用； 2. 通过上位（显）性分析以确定适配体在与靶蛋白相同的区域发挥功能； 3. 比较由靶蛋白删除或过表
用肽适配体正向分析细胞过程实验
实验方法原理 实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒 完全极限（CM） 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50～100 ug 肽适配体库（在 pJM-2 或 pJM-3 中）转化酵母筛选株（106～107 转化株）。将转化株涂布到
用肽适配体正向分析细胞过程实验1
实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库 试剂、试剂盒 完全极限（CM） 缺失成分液体培养基和平板 仪器、耗材 30℃ 培养箱 实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50～100 ug 肽适配体库（在 pJM-2 或 pJM-3 中）转化酵母筛
构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验
实验材料 E.coli MC 1061 （Bio－Rad）硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液 试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶（CIP）限制性内切核酸酶反应缓冲液4dNTPTris·Cl培养基 仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒
肽适配体的亲和力成熟实验
实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备
肽适配体的亲和力成熟实验
实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「
构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验
实验方法原理 实验材料 E.coli MC 1061 （Bio－Rad）硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶（CIP）限制性内切核酸酶反应缓冲液 4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合
抗肽抗体的制备实验2
实验材料 抗体 试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS 仪器、耗材 分光光度计离心机 实验步骤 1. 将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中，置于15 ml 的玻璃试管中，温和振摇。 2. 加10 μmol
利用双杂交系统相互作用阱／筛选特定蛋白肽适配体实验
实验材料DNA酵母株试剂、试剂盒PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板仪器、耗材30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 使用标准的亚克隆技术，将编码诱饵蛋白的 DNA 插入 PEG20
简化肽图分析结果的确证过程
简化肽图分析结果的确证过程：基于 UNIFI 的沃特世生物制药系统解决方案的一项基本功能目的 展示 UNIFI ™ 科学信息系统的强大功能如何帮助用户查看和审核 UPLC®/MS 或 UPLC/MSE 肽图分析实验获得的 LC/MS 原始数据。 背景 肽图分析是药物蛋白鉴定的
用imagej－软件分析细胞划痕实验结果
任何实验都不会只做1次。假如在同一个处理组你重复了8次，那就测得8个结果。加一起除以10，就是均数。标准差反映的是这8个数据与均数的偏离程度。比如10±1，这个写法表明你这8个数据的平均值是10，而1代表这8个数据总体上偏离均数10的程度。如果这8个数据都在10左右，那标准差就会很小。如果8个数据里
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G 乙酸 甲醇 Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸 乙腈 2-丙醇
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
分子生物学中最重要的环节之一是对微量蛋白质进行分析，使对编码待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成为可能。为有效地做到这一点，通常需要知道蛋白质的内序列。在这一方面，肽段的有效分离是极重要的。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒考马斯亮蓝 G乙酸甲醇Achromobacte
蛋白质内序列分析用肽段的分离与纯化实验
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G乙酸甲醇Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸乙腈2-丙醇仪器、耗材 SpeedVac 型旋转浓缩器Tween-20UltrafreeTM MC 滤器C18 反相 HPLC 柱实验步骤 材料与设备考马斯亮蓝 G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液）乙酸 (5
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验2
实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒PBSA BSA：PBSA+0.5%BSAPBSA 2FB:含2%FBS的PBSA封闭缓冲液抗体：MAB4155F克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗体-FITC仪器、耗材具有488 nm氩激光器和525 20带通滤波器的高速细胞分选仪实验步骤(a)胰蛋白酶
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离——2DPP－分离磷酸肽
实验方法原理即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因，通常建议在质谱分析前作一些分离：(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中，肽分离技术可浓缩分析物，因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比活
人中性粒细胞激活肽2(NAP2)ELISA试剂盒
人中性粒细胞激活肽-2(NAP-2)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NAP-2 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 NAP-2与单抗结合，加入生物素化的抗人NAP-2，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物
用质谱数据对肽段从头测序实验
方案一 方案二 方案三 实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列，即相邻肽段间相差一个氨基酸残基，用质谱分析肽阶梯，通常用 MALD
用质谱数据对肽段从头测序实验
实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列，即相邻肽段间相差一个氨基酸残基，用质谱分析肽阶梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 测序用的是上文所述用于数据库检索的 CID 谱，但碎片离子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽阶梯是由化学或酶法降解肽段产生，由 C 未端或N未端
JY99IIDN超声波细胞粉碎机适伤用领域介绍
JY99-IIDN超声波细胞粉碎机，又名超声波破碎仪，超声波乳化机，是一种利用超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途仪器；它能用于多种动植物、病毒、细胞、细菌及组织的破碎，同时可用来乳化、分立、匀化、提取、消泡、清晰、纳米材料的植被、分散及加速化学反应等。 上海五相仪器JY99-IIDN超声
造血正向调控的细胞因子有哪些
造血正向调控的细胞因子：①干细胞因子（SCF）。②Flt3配体（FL），即fam样酪氨酸激酶受体3（FLT）配体。③集落刺激因子（CSF），是细胞因子中的一大类，有四种主要的类型：粒-单细胞集落刺激因子（CSF-GM）、粒细胞集落刺激因子（CSF-G）、单核细胞集落刺激因子（CSF-M）、巨核细
造血正向调控的细胞因子有哪些？
造血正向调控的细胞因子：①干细胞因子（SCF）。②Flt3配体（FL），即fam样酪氨酸激酶受体3（FLT）配体。③集落刺激因子（CSF），是细胞因子中的一大类，有四种主要的类型：粒-单细胞集落刺激因子（CSF-GM）、粒细胞集落刺激因子（CSF-G）、单核细胞集落刺激因子（CSF-M）、巨核细胞集
用质谱数据对肽段从头测序实验（一）
实验方法原理单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列，即相邻肽段间相差一个氨基酸残基，用质谱分析肽阶梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 测序用的是上文所述用于数据库检索的 CID 谱，但碎片离子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽阶梯是由化学或酶法降解肽段产生，由 C 未端或N未端断
用质谱数据对肽段从头测序实验（三）
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤另外一种便于人工解析 CID 谱及从头测序的化学方法是对肽段的羧基实行甲酯化。这个反应使肽段每一个羧基质量增加 14u, 包括未修饰的（末端、 Asp 和 Glu上的羧基。如果肽段中没有酸性残基，同时C未端没有被修饰，那么只有 y 系列离子及其中性丢失离子会表
用质谱数据对肽段从头测序实验（二）
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤第二种方法，也称为"nested peptide secquendng", 是在一个 Edman 降解循环中多次加入多肽/蛋白质底物心在此法中加入过量易挥发的 Edman 试剂以使反应完全，每一循环中的过显试剂可通过蒸发被除去。经 MALDI-MS 分析得到肽
细胞用培养箱培养的过程
温度下细胞保留的时间几乎是无限的。冻存过程中尽力选用细胞疏密程度降低温度速度及复苏时温度、消融速度等都对细胞活力有影响。为了保留细胞，尤其是不易取得的突变形细胞或细胞株，要将细胞冻存。而后将细胞转入低温培养箱中施行培育。复苏普通认为合适而使用快融办法，即从液氮中抽取冻存管后，迅即放入36度水中，使之
细胞用培养箱培养的过程
细胞用培养箱培养的过程温度下细胞保留的时间几乎是无限的。冻存过程中尽力选用细胞疏密程度降低温度速度及复苏时温度、消融速度等都对细胞活力有影响。为了保留细胞，尤其是不易取得的突变形细胞或细胞株，要将细胞冻存。而后将细胞转入低温培养箱中施行培育。 复苏普通认为合适而使用快融办法，即从液氮中抽取
观察单细胞分裂过程用什么
从一个受精卵发育成多种功能的胚胎，细胞要经过上千次分裂和复杂的排列重组。据物理学家组织网6月3日报道，霍华德·休斯医学研究院珍妮莉娅法姆研究学院开发出一种最新的成像技术，能以前所未有的速度和精确度看到这一过程，让人们能追踪胚胎成形时每个细胞在几天甚至几小时内的变化。相关论文发表在6月3日出版的《自然
细胞间黏附分子是整合素p2组的配体
（1）ICAM-1（CD54）：分子质量为85-110kDa，胞膜外区有5个IgSFC2样结构域，在细胞表面可能以二聚体形式存在。ICAM-1分布十分广泛，包括造血和非造血细胞，活化的T细胞、B细胞、胸腺细胞和DC等ICAM-1的表达明显上调。炎症介质也能明显上调内皮细胞和其他非造血细胞ICAM-1
注射用胸腺五肽
性状本品为白色冻干疏松块状物或粉末。鉴别(1)取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中含lmg的溶液,取上述溶液1ml,加胸腺五肽项下的双缩脲试液lml,即显蓝紫色或紫红色。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致检查酸碱度取本品,每瓶加水5ml溶解后