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琼脂糖凝胶中DNA的检测

琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。试剂、试剂盒溴化乙锭SYBR Gold实验步骤1. 凝胶溴化乙锭染色法观察琼脂糖凝胶中 DNA 的最简便、最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色(Sharp et al. 1973)。溴化乙锭含有一个可以嵌入 DNA 堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与 DNA 的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每 2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子(Wari......阅读全文

琼脂糖凝胶电泳实验——琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳可应用于:(1)DNA切胶回收;(2)DNA分离;(3)佐证DNA是否重组,质粒等是否切开以及其他分子生物学研究。实验方法原理用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻

琼脂糖凝胶配方

琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的

琼脂糖凝胶电泳

实验方法原理 琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 nm 的超螺旋结构。实验材料 DNA 样品DNA 大小标准品试剂、试剂盒 琼脂

琼脂糖凝胶电泳

            实验方法原理 琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 nm 的超螺旋结构。

琼脂糖凝胶的简介

  琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DN

琼脂糖凝胶电泳

   学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理;  (2) 掌握使用水平式电泳仪的方法;  (3)掌握核酸琼脂糖凝胶电泳的基本操作  2实验原理  琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳可以用于:(1)检测PCR结果;(2)分离不同大小的DNA条带。实验方法原理琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 n

琼脂糖凝胶的配制

称量、溶胶、倒胶、拔梳。配置步骤如下:1、称量,小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104gTBE13mL。2、熔胶,将所称量的琼脂粉与TBE在锥形瓶中混合,在微波炉内反复加热2到3次至琼脂粉溶解并无气泡。3、倒胶,干净的胶槽内摆好梳子,往胶内滴加1uL左右核酸染料,混匀,待冷却至不烫手,轻轻倒入胶板内

什么是琼脂糖凝胶?

  琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DN

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳1.      用封边带封住塑料托盘开放的两边或清洁干燥的玻璃板的边缘形成一个模具,置一个水平支架上。2.      配制足量的电泳缓冲液(1×TAE或0.5×TBE)用以灌满电泳槽和配制凝胶。 配胶和灌满电泳槽使用同一批缓冲液。3.      根据欲分离DNA片段大小用电泳缓冲液配制