工程T细胞高效鉴别肿瘤

近日,来自国外一项临床前试验结果显示,一种工程化嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor,CAR)T细胞的技术—亲和力调整技术或可帮助科学家们有效区分癌细胞和正常细胞,从而帮助研究者在抵御实体瘤的过程中降低免疫疗法对机体正常细胞的毒性。 许多实体癌症都含有较高水平的特定蛋白质,比如ErbB2和EGFR,这种特定蛋白质或可作为抗癌疗法的合适靶点,然而诸如这样的蛋白质在正常细胞中水平较低,正因为如此,发育成为靶向作用肿瘤细胞中特定蛋白质的CAR T细胞就会识别并且攻击含有该蛋白质的正常细胞,从而引发更加严重的毒性。 为了开发出可以有效区分癌细胞和正常细胞的CAR T细胞,研究者利用突变的4D5抗体的序列构建了可以携带scFvs(重组单链抗体)的一组CARs;4D5抗体对ErbB2的亲和力不断发生着变化,下一步研究者将不同的scFvs掺入到了CAR中,从而就会产生一系列CAR T细胞,而这种新形成的CA......阅读全文

抗体亲和力测定

简介抗体亲和力是指抗体与抗原表位或其决定簇之间的结合力,这种作用力包括氢键、引力、疏水作用力等。亲和力大小可以用KD表示,计算方法为:KD=[Ab-H]/([Ab][H]) 式中[]代表摩尔浓度,Ab为抗体,H为半抗原,Ab-H为结合物。 服务内容百欧泰生物技术团队运用平台的技术系统对抗体的亲和力和

抗体的亲和力

抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol,通常K的范围在 1

Science子刊:增加胶原蛋白亲和力可改善癌症免疫疗法

  基于免疫检查点抑制剂(CPI)和白细胞介素-2(IL-2)的癌症免疫疗法正变得越来越普遍,这是因为它们具有令人印象深刻的激活患者自身免疫系统以对抗肿瘤的能力。然而,全身性的免疫系统激活方法不是没有风险的,免疫疗法通常伴随着严重不良事件。  为了解决这个问题,在一项新的研究中,来自美国芝加哥大学、

如何测定抗体亲和力

在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法,如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法,这是目前国际上流行的方法,该方法灵敏,客观。另

如何测定抗体亲和力

在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法,如平衡透析、竞争结合、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、ELISA和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法,这是目前国际上流行的方法,该方法灵敏,客观。另

蛋白质的吸附性质和亲和力有什么区别

材料表面蛋白质吸附的影响因素:蛋白质(浓度、速度、分子大小、亲和性、结构重组) ; 材料表面(理化性质、疏水性、荷电特性、形貌、机械性质、电学性质) 特点: (1)蛋白质在表面的浓度比它以前所在的溶液中的浓度大得多。 (2)蛋白质在表面和 溶液中是完全不同的两种状态,在表面状态称为被吸附态。 (3)

蛋白质的吸附性质和亲和力有什么区别

材料表面蛋白质吸附的影响因素:蛋白质(浓度、速度、分子大小、亲和性、结构重组) ; 材料表面(理化性质、疏水性、荷电特性、形貌、机械性质、电学性质) 特点: (1)蛋白质在表面的浓度比它以前所在的溶液中的浓度大得多。 (2)蛋白质在表面和 溶液中是完全不同的两种状态,在表面状态称为被吸附态。 (3)

抗体亲和力成熟的概念

抗体亲和力成熟(antibody affinity maturation)是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中,再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。只有那些表达高亲和力抗原受体的B细胞,才能有效的结合抗原,并在抗原特异的Th细胞辅助下增殖,产生高亲

实现核磁共振解析中等亲和力的配基和靶点蛋白作用模式

  中国科学技术大学副教授阮科课题组在核磁共振研究中等亲和力的化学工具分子和靶点蛋白作用模式方面取得重要进展。相关成果于8月29日在线发表在《德国应用化学》上,论文的共同第一作者是中国科大博士生高佳和清华大学博士生梁鄂。  蛋白-配基的相互作用模式是理性药物发现的核心。复合物晶体结构研究受限于小分子

实现核磁共振解析中等亲和力的配基和靶点蛋白作用模式

  中国科学技术大学副教授阮科课题组在核磁共振研究中等亲和力的化学工具分子和靶点蛋白作用模式方面取得重要进展。相关成果于8月29日在线发表在《德国应用化学》上,论文的共同第一作者是中国科大博士生高佳和清华大学博士生梁鄂。   蛋白-配基的相互作用模式是理性药物发现的核心。复合物晶体结构研究受限于小

细胞膜上能增强C3b对H因子亲和力

已发现其有5个变异型,编码H因子的基因定位于人的第1号染色体的长臂32区。即FH1-5H因子的核苷酸序列已进行了鉴定,并推导出其全部氨基酸的一级结构,含有20个SCR借此与C3b结合。H因子与MCPCR1CR2DA F及C4bp具有同源性,共同属于补体激活调节剂(RCA 基因家族的成员。  根据电泳

肽适配体的亲和力成熟实验

实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备

肽适配体的亲和力成熟实验

实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「

高亲和力高纯度零污染的细胞培养级抗体制备指南

单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),是针对专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,主要原理是利用产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。目前大量制备单抗的方法主要有两种方法:一种是动物体内生产法(腹水制备),在小鼠腹腔内接种

平衡法选择高亲和力噬菌体抗体

[器材和试剂] ● 链霉亲和素磁珠(DynabeadsM280,Dynal) ● 磁性1.5ml试管架(Dynal) ● 磷酸盐缓冲液(PBS) ● 2%脱脂奶粉PBS(2%MPBS) ● 生物素化试剂盒 ● 含0.1为Tween-20的PBS(PBS/Tween) ● 100mmol/L HCI 

Countstar®-FL在抗体亲和力实验中的应用

抗体是自然产生用于帮助免疫系统抵御细胞内外侵害的免疫球蛋白。免疫荧光法测定细胞水平的抗体亲和力大小是评价抗体效果非常重要的指标,当前主要的测定方法是利用流式细胞仪以实现相对定量。而Countstar® FL可通过间接免疫荧光法检测不同抗原抗体反应呈现的平均荧光强度直接定量评价抗体亲和力大小,同时也可

血清素化显著增加了WDR5对组蛋白H3的结合亲和力

  组蛋白 H3Q5 (H3Q5ser) 的血清素化是最近发现的组蛋白翻译后修饰,在神经元细胞分化过程中作为与 H3K4me3 协同作用的基因激活的许可标记。然而,任何特异性识别 H3Q5ser 的蛋白质仍然未知。  2021年6月18日,中国科学技术大学臧建业,张璇及上海交通大学Mo Xi共同通讯

AI设计高亲和力和特异性蛋白质结合剂:医学革命的崭露头角

AI设计与蛋白质高亲和力和特异性结合的分子2023年12月18日华盛顿大学医学院蛋白质设计研究所的AI设计的蛋白质。 [Ian Haydon/UW Medicine Institute for Protein Design]华盛顿大学医学院蛋白质设计研究所的贝克实验室继续推动AI驱动的蛋白质设计创新

ELISA检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力

【材料和试剂】 (1)酶标板 (2)酶标仪 (3)0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) (4)1%A (5)HRP标记的抗M13噬菌体多抗 (6)2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10μg

ELISA检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力

实验概要本实验利用ELISA检测了噬菌体抗体与目的抗原的亲和力。主要试剂1. 0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)2. 1%BSA3. HRP标记的抗M13噬菌体多抗4. 2mol/L H2SO4主要设备1. 酶标板2. 酶标仪实验步骤1. 将抗原用PBS或0.5mol/L Na2CO3(p

亲和素和生物素为什么亲和力最高

生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异性亲和

碘亲和力滴定法测定直链淀粉含量

碘亲和力滴定法原理:当淀粉溶液用碘进行电位滴定时,在碘与淀粉形成络合物期间没有电学性质(电流、电压)变化,但一旦有游离碘存在即产生电位(或电流),并可看到电位(或电流)的变化,因而可从电位(或电流)滴定曲线求出形成络合物的碘量,计算相当于碘结合量的淀粉量。具体测定方法有电位滴定法和 电流滴定法,这两

弓形体-IgG-亲和力试验有何临床意义?

弓形体 IgG 亲和力实验一般在参比实验室应用。感染后高亲和力的 IgG 抗体至少在孕 12-16 周才出现(具体时间依赖应用的实验方法)。出现高亲和力抗体提示感染至少出现在 16 周以前。因此,妊娠第 1 个月的孕妇,不管 IgM 抗体试验的结果,高亲和力的 IgG 试验结果提示胎儿基本上

高亲和力单克隆抗体制备问题及对策

1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净

碘亲和力法判断直链淀粉与支链淀粉的纯度

  直链淀粉和支链淀粉是淀粉的两大主要组分,由于二者的分子结构、分子聚集状态各异,从而使得不同来源的淀粉有各自的应用表现。已有研究表明,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉的产品加工、物化特性等有着直接影响。而直链淀粉和支链淀粉的含量不同,关系着小麦等物质的品质。因此,我们经常需要用直链淀粉测

早皮质类固醇给药可选择性抑制低亲和力的记忆CD8+-T细胞

  在过去的十年中,免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade, ICB)在治疗多种晚期癌症方面显示出显著的有效性。但是,ICB治疗通常会因免疫相关性不良事件(immune-related adverse event, irAE)而变得复杂,如果对irAE不进行治疗的话,它

如何研究细胞关键蛋白

来自上海生科院生化与所的研究人员利用多种细胞手段发现了两种关键细胞蛋白的作用机理,这两种蛋白分别是C末端Src激酶(C-terminal Src kinase,Csk)和细胞极性封闭蛋白Occludin。研究论文分别发表在《Proteomic》和《Developmental Cell》上。

细胞化学基础锌指蛋白

定义通常由一系列锌指组成。 具有重复结构的氨基酸模式,相隔特定距离的胱氨酸结合锌指,能与某些RNA/DNA 结合。作用锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,对基因调控起重要的作用。根据其保守结构域的不同,可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA-RN

尿红细胞(THP)蛋白

THP 是肾小管髓袢升支粗段和远曲小管近段上皮细胞分泌的一种大分子糖蛋白。已证明肾小球来源的尿红细胞表面被覆THP ,而非肾小球来源的红细胞则没有,应用THP 细胞化学技术亦可鉴别肾性或非肾性血尿。(一) 参考值尿细胞THP 细胞化学定位:阴性(二) 临床意义鉴别肾性和非肾性血尿。

研究人员发表抗体亲和力体内定向进化系统“EASINESS”

  上海交通大学系统生物医学研究院陶生策团队,开发了一种基于大肠杆菌的抗体亲和力体内定向进化系统“EASINESS”,可以在一周内将目标抗体亲和力提升1-2个数量级,且无需复杂的机械装置与人工操作。该研究基于一种易错DNA聚合酶I选择性地突变ColE1质粒实现体内抗体突变库的构建,以及来自mDHFR