RNAi药物市场潜力巨大但路途遥远
RNA干涉技术（RNAi）正在受到越来越多的关注，一些大型制药企业已经注入数以十亿美元的资金。由于RNAi特异性抑制蛋白质的合成，所以在理论上优于任何以抑制蛋白功能为机制的传统药物。但是，目前仍没有任何一种RNAi新药上市，最早也要等到2010年，市场达到一定规模至少要5-10年。 现在有4家公司的RNAi新药候选者进入后期临床研究，这4家公司是美国默克公司（NYSE: MRK）、瑞士的诺华（NYSE: NVS）和美国的OPKO以及Alnylam公司。最早上市RNAi新药的可能是总部在美国迈阿密的OPKO，总市值为6.5亿美元，其Bevasiranib已进入III期临床研究，也是截止到目前唯一进入III期临床的RNAi药物，适应症是老龄视力丧失，是发达国家致盲的最常见原因。如果III期临床研究成功，2010年该药可能上市，并可能成为“重磅炸弹”药品，与基因泰克（NYSE:DNA）的单抗药物Lucent......阅读全文
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技术可用在研究与胚胎发育相关基因的功能上，但是由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释，使得这种方法在研究成体的基因功能时有一定的局限性。为弥补早期 RNAi 技术的不足，Tavernarakis 等将 RNAi 技术做了一些改进及更动，将目的基因之标的序列以反向重复的方式，由
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面，基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物（genetically modified organisms）的障碍，另一方面，它又是植物抵抗外来核酸入侵（如病毒）的一种反应，为植物抗病毒的遗传育
RNA干扰技术(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达，而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA（sense RNA）以期观察到基因表达的增强。但得到的结果
RNA干涉实验
化学合成siRNA分子实验 体外转录合成siRNA分子实验 采用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA分子 采用RNaseⅢ制备siRNA分子实验 实验方法
RNA干涉实验
RNA 干涉（RNA1） 是指在真核细胞中引入双链 RNA ( doubt-stranded RNA，dsRNA ) 分子从而导致具有序列同源性的基因产生特异件基内沉默（gene silencing ) 的现象。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理当确定了靶基因上的 siRN
RNA干涉实验
实验方法原理 当确定了靶基因上的 siRNA 分子作用位点以后，根据靶位点的序列可以很方便地推导得到相应的 siRNA 分子的正义与反义 RNA 链序列。它们包含 19 bp 的互补双链区和两侧的不配对区（每侧为 2 个 U 成 2 个 T )，在合成时用 T 替代 U 可以降低成本并可以提
反义技术——RNA干扰（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干扰（RNA interference，RNAi）的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的（1），是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步，已经有许多这方面的综述发表（2-4）。RNA干扰是由长的双链 RNA
罗氏制药公司宣布退出RNA干涉研究领域
新药研发陷入困境罗氏退出RNA干涉研究领域 罗氏公司总部位于瑞士巴塞尔，是全球最大的医药公司之一。据最新出版的《科学》杂志报道，11月下旬，罗氏宣布退出RNA干涉（RNAi）研究领域，这一决定是该公司计划裁减6%的人力即4800人的计划的一部分。 RNA干涉是一种分子生物学上由双
RNA干扰（RNA－interference，RNAi）基础知识(3)
SiRNASmall interfering RNA (siRNA)：是一种小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员，激发与之互补的目标mRNA的沉默。ShRNAshRNA 短发夹RNAshRNA
RNA干扰（RNA－interference，RNAi）基础知识(2)
1RNA i的发现RNA i是在研究秀丽新小杆线虫（C. elegans）反义RNA （antisenseRNA ）的过程中发现的，由dsRNA 介导的同源RNA 降解过程。1995年，Guo等发现注射正义RNA （senseRNA ）和反义RNA 均能有效并特异性地抑制秀丽新小杆线虫par
RNA干扰（RNA－interference，RNAi）基础知识(1)
Rnai最近由于RNA 干扰（RNA interference，RNA i）的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的（1），是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在 RNA i领域取得的进步，已经有许多这方面的综述发表（2-4）。RNA 干扰是
RNA干扰RNAi的生物特性
RNAi抑制转座子活性两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关① 发现蠕虫mut-7 基因参与RNAi 并且与转座子的转座抑制有关；② 在果蝇中，参与RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失，同时提高了反转录转座子活性。RNAi抵御病毒感染在拟南
RNA干扰（RNAi）实验成功要素
基因和siRNA选择RNAi实验的通量可从沉默单个感兴趣的基因，到少量相关基因或同一个通路上的基因，到全基因组高通量筛选，取决于需要解决的生物学问题。siRNA的设计至关重要。转染优化用于RNAi实验的细胞应当有效转染siRNA。转染必须经过优化确保siRNA的浓度是最低的有效浓度以避免非特异性效应
Rules－of－siRNA－design－for－RNA－interference－(RNAi)
General GuidelinessiRNA targeted sequence is usually 21 nt in length.Avoid regions within 50-100 bp of the start codon and the termination codonAvoid
RNAi（RNA干扰）的分子机制
通过生化和遗传学研究表明，RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段，加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明；一个称为Dic
RNAi药物市场潜力巨大但路途遥远
RNA干涉技术（RNAi）正在受到越来越多的关注，一些大型制药企业已经注入数以十亿美元的资金。由于RNAi特异性抑制蛋白质的合成，所以在理论上优于任何以抑制蛋白功能为机制的传统药物。但是，目前仍没有任何一种RNAi新药上市，最早也要等到2010年，市场达到一定规模至少要5-10年。 现在有4家公
哺乳动物RNAi技术－Mammalian－RNA－Interference
Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York Excerpted from RNAi: A Guide To Gene S
RNA干扰（RNAi）实验原理与方法（2）
dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤，为研究人员节省时间和金钱（注意：通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜）。不过这种方法的缺点也很明显，就是有可能引发非特异的基因沉默，特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示这种情况通常不会造成影响。最
RNA干扰（RNAi）实验原理与方法（1）
近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。一、R
RNA干扰（RNAi）实验原理与方法（3）
3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法，
－默沙东退出RNAi研究领域
尽管最近罗氏公司、赛诺菲两个制药巨头宣布重返RNAi疗法研究领域，默沙东公司却做出相反的决定，宣布撤出这一研究领域。公司最近宣布将相关的 Sirna公司以1亿7千5百万美元的价格出售给Alnylam公司。这也是默沙东公司宣布进行研发部门重组后的又一个大动作。 公司于2006年以
RNAi——双链RNA引起的基因敲除（2）
在构建双链RNA的表达载体时，使用RNA多聚酶Ⅲ来指导RNA的合成。这是因为RNA多聚酶Ⅲ有明确的启始和终止序列，而且合成出的RNA不会带有polyA尾。当RNA多聚酶Ⅲ遇到连续5个胸腺嘧啶时，它指导的转录就会终止，并且转录产物在第二个尿嘧啶处被切下来。U6启动子能被RNA多聚酶Ⅲ识别， 合
RNAi——双链RNA引起的基因敲除（1）
1995年，康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现，反义和正义RNA都阻断了基因的表达，他们对这个结果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究证明，在正义RNA也阻断了基因表达的试验中，真正起作用的是双链RNA[1]。这些双链RNA是体外
Nature子刊：增强RNA干涉的效力
人们可以通过纳米颗粒将短链RNA运输到目标细胞，关闭功能发生异常的基因，从而治疗癌症和其他疾病。不过迄今为止，科学家们还不完全了解，纳米颗粒进入细胞后发生的情况。 现在，麻省理工MIT的一项新研究展现了这些纳米颗粒的命运，这一发现能帮助人们大大提高siRNA的运输效率。文章于六月二十三日发
罗氏收购Alnyam－展开RNAi领域最大合作
来自纽约7月9日的消息，全球最大医药公司之一罗氏Roche Holding AG宣布计划收购美国生物制药公司Alnyam（Nasdaq: ALAN），并已与其签订总值为10亿美元的合作协议，联合开发以RNA干涉（RNAi）技术为基础的新药。这是迄今为止本领域最大规模的合作，也是自上周五英国制药公司阿
专访RNAi前沿科学家刘一
5月14日的《Nature》杂志以封面文章形式发表了德克萨斯大学西南医学中心刘一的一篇RNAi研究前沿文章，刘一教授发现了一类新的RNAi分子，qiRNA。人们对RNAi的了解又深入了一步。 为了让读者更进一步的了解qiRNA，生物通记者采访了文章的通讯作者刘一教授，百忙中的刘一教授爽
RNAi实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程
RNAi 实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程，本实验方法来自于加州大学Jim教授实验，很权威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
RNAi技术研究进展
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是多种生物体内由双链RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介导同源mRNA 降解的现象。RNAi现象先后在不同生物中被发现，植物学家称它为共抑制(co-suppression)或转录后基因沉默(post transcri
RNAi技术研究进展
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是多种生物体内由双链RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介导同源mRNA 降解的现象。RNAi现象先后在不同生物中被发现，植物学家称它为共抑制(co-suppression)或转录后基因沉默(post tran
RNAi技术研究进展
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是多种生物体内由双链RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介导同源mRNA 降解的现象。RNAi现象先后在不同生物中被发现，植物学家称它为共抑制(co-suppression)或转录后基因沉默(post transcri