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HLA分型技术(二)

(二)PCR/SSO技术 此法乃用人工合成的HLA型别特异的寡核苷酸序列作为探针,与待检细胞经PCR扩增的HLA基因片段杂交,从而确定HLA型别,PCR技术可将HLA复合体上指定基因片段特异性地扩增5~6个数量级;而专门设计的SSO(序列特异的寡核苷酸sequencedpecific oligonucleotide)探针又能探测出等位基因间1~2个核苷酸的差异,故PCR/SSO技术具有灵敏度、特异性强、需样本量少等优点。 (三)PCR/SSP技术 目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异性引物(sequence specific primer,SSP),借助PCR技术获得HLA型别特异的扩增产物,可通过电泳直接分析带型决定HLA型别,从而大大简化了实验步骤......阅读全文

PacBio RS II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]

PacBio RS II测序系统一经推出,其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇,尤其是在HLA检测分型领域,国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发,推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。His

HLA分型技术(一)

  HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性;80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。  一、血清学分型技术  (一)HLA

生物芯片北京国家工程研究中心:十年磨砺 用“芯”创造

  2010年5月6日,中共中央总书记、国家主席胡锦涛陪同朝鲜劳动党总书记、国防委员会委员长金正日参观博奥生物有限公司。新华社供图  2008年12月27日,中共中央政治局常委、国务院总理温家宝来到北京中关村科技园区,看望广大科技工作者,就园区的创新发展问题进行专题调研。这

HLA分型技术

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免

HLA抗原的检测(二)

  (四)HLA-DP抗原的检测  HLA-DP抗原的检测可采用预处理淋巴细胞分型试验(primed lymphocyte typing test,PLT)基本步骤是首先取有一个单倍体相同的两个个体的淋巴细胞进行混合培养,这在双亲与子女间很容易找到,如亲代a/b,子代a/c。先将a/c

罗氏挑战Illumina不败棋局,测序领域如何布局?

  2020 年 5 月 22 日,罗氏宣布已收购初创测序技术公司 Stratos Genomics,以推进罗氏纳米孔测序仪的开发。  近些年,以单分子荧光测序和单分子纳米孔测序为原理的三代和四代测序技术得到快速发展,其超长读长、灵活便捷的技术优势点燃了产业界。越来越多的生物科技公司和大型企业布局单

液相芯片技术的原理与应用进展

   液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原 抗体、酶 底物、配体 受体的结合

液相芯片技术的原理与应用

液相芯片,也称为微球体悬浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible MultiAnalyte Profiling)技术的新型生物芯片技术平台,它是在不同荧光编码的微球上进行抗原抗体、酶底物、配体

造血干细胞血样检测获“国际通行证”

  不久前刚为一位荷兰患者捐献造血干细胞的密云小伙儿陈刚昨天出院,这是中华骨髓库在本市的HLA(类白细胞抗原)分型检测实验室获国际认证后进行的首次跨国捐赠。至此,本市造血干细胞涉外捐献者已突破10例。  “不敢犹豫,我多一分疑虑,患者就多一分危险。”陈刚如此描述自己捐赠时的感受,这次他的血样,在本市

造血干细胞血样检测获“国际通行证”

   不久前刚为一位荷兰患者捐献造血干细胞的密云小伙儿陈刚昨天出院,这是中华骨髓库在本市的HLA(类白细胞抗原)分型检测实验室获国际认证后进行的首次跨国捐赠。至此,本市造血干细胞涉外捐献者已突破10例。   “不敢犹豫,我多一分疑虑,患者就多一分危险。”陈刚如此描述自己捐赠时的感受,这次他的血样,在

华大基因新技术实现一次性达到HLA分型最高分辨率

  骨髓和其他器官移植时,供者和受者之间人类白细胞抗原(HLA)相容程度越高,排斥反应的发生率就越低,移植成功率和移植器官长期存活率就越高。反之,就越容易发生排斥反应。7月开始,深圳华大基因应用新一代测序技术,只需通过一次实验就能够读取数千份样本的HLA序列数据,并一次性达到HLA分型的最

组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较

血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求。为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤。现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下。一、资料和方法本

主要组织相容性复合体MHC扩展单体型

   近年研究表明,在正常人以及某些疾病对HLA-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ这三类基因还存在连锁不平衡现象,并构成一些具有分布特异性的大单体型,并先后提出不同的术语加以概括,如MHC扩展单体型(MHC-extended haplotype,EH)、MHC祖传单体型(MHC ancestral

PacBio测序有望掀起下一场遗传诊断的革命

  从一代到二代再到三代,近年来测序技术的发展势不可挡。单分子测序也逐渐表现出它的优势,在测序舞台上发挥着举足轻重的作用。近日,比利时鲁汶大学和瑞典乌普萨拉大学的研究人员在《Nucleic Acids Research》发表综述文章,介绍了PacBio SMRT测序技术在临床中的应用。  文章简单回

香港中文大学与华大基因签署临床基因检测合作协议

  2011年8月17日,香港中文大学(以下简称:香港中大)与华大基因在港签订临床基因检测合作协议,该协议以香港中大位于韦尔斯亲王医院的临床基因实验室为基地,合作进行临床基因检测,并开展基因组研究项目。协议在国务院副总理李克强的见证下,由香港中大校长沈祖尧教授及华大基因理事长杨焕明院士签署;香港中大

程京:中国生物芯片探路者

  2009年12月2日,中国工程院新增院士名单公布。清华大学医学院生物医学工程系46岁的程京教授当选为院士。当这一中国工程技术界最高荣誉降临时,他淡定地说:“我一直都想保持低调。”   在百合花飘香的医学院办公室里,记者见到了刚参加完活动的程京。“昨天刚从成都飞回来,今天不知道你们要拍照,还

人类白细胞抗原(HLA)检测及临床意义

人类白细胞上有3类抗原:红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原(HLA)。  1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,

2020盘点,肿瘤精准免疫诊断领域有哪些趋势

  千百年来,癌症一直是人类生命健康的最大威胁。据《2017年中国肿瘤登记年报》统计,我国每年有约1万人确诊为癌症,平均每分钟就有7个人确诊。  免疫疗法为肿瘤治疗带来新的希望,反应率成瓶颈  肿瘤免疫疗法(Immuno-Oncology Therapy,I-O)首次出现于 19世纪末期,经过130

肿瘤精准免疫诊断领域趋势有哪些

  千百年来,癌症一直是人类生命健康的最大威胁。据《2017年中国肿瘤登记年报》统计,我国每年有约1万人确诊为癌症,平均每分钟就有7个人确诊。  免疫疗法为肿瘤治疗带来新的希望,反应率成瓶颈  肿瘤免疫疗法(Immuno-Oncology Therapy,I-O)首次出现于 19世纪末期,经过130

国内外生物芯片技术的现状与未来发展趋势

  生物芯片是一类快速、高效、高通量的生物分析器件或集成化分析系统,包括微阵列芯片、微流控芯片、芯片实验室以及相关的仪器和设备。它集合计算机、微电子、微机械、生物化学、分子生物学和生物信息学等技术,在一个微小的芯片表面或芯片内部的微流体系统研究生物大分子之间或者生物大分子与其他化学小分子之间的反应。

生物芯片技术与产品发展趋势 整合样品制备

生物芯片是一类快速、高效、高通量的生物分析器件或集成化分析系统,包括微阵列芯片、微流控芯片、芯片实验室以及相关的仪器和设备。 生物芯片是一类快速、高效、高通量的生物分析器件或集成化分析系统,包括微阵列芯片、微流控芯片、芯片实验室以及相关的仪器和设备。它集合计算机、微电子、微机械、生物化

HLA的分型方法

 HLA的分型方法是检验主管技师考试要求掌握的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。   1.淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ

HLA配型与骨髓移植

一、  骨髓移植概述骨髓移植(bone marrow transplantation ,BMT)的实质是造血干细胞移植,干细胞具有能复制并分化为造血和免疫活性细胞的能力。根据干细胞的来源不同可分为自体、同基因(syngeneic)和异基因(allogeneic)BMT。同基因骨髓

华大免费为罕见病提供检测

  昨日,记者从华大基因研究院获悉,华大医学近日展开了基因科技助力罕见病计划之“子琪计划”,免费为100名粘多糖病患者提供HLA骨髓配型检测服务。在减轻患者经济负担的同时,提高社会对罕见病患者群体的关注。  据悉,“子琪计划”源自粘多糖病患儿5岁潘子琪的名字。今年1月,华大医学为子琪与其姐姐成功配型

HLA-B27检测方法的分析与对比

王向东江苏南通良春中医医院随着网络及媒体的发展,强直性脊柱炎(AS)也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星,到一些普通的患者,都在经历着病痛的折磨。HLA-B27(人类白细胞抗原B27),是强直性脊柱炎(AS)实验室检查的重要指标,在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天,我们从检验

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍: HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.

人类白细胞抗原HLA其他临床意义

   1.HLA与输血的关系 多次输血后可使受体产生抗HLA抗体,白细胞膜受到破坏,释放内源性热原质,引起发热反应和白细胞下降。有建议输血小板进行治疗时,最好测定HLA-A、B抗原,防止由于患者产生针对血小板膜HLA抗原的抗体,避免血小板被破环所造成的“无反应(refractor

HLA细胞法分型试验介绍

HLA细胞法分型试验介绍:HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.2ml到反

生物芯片北京国家工程研究中心项目通过专项验收

2007年7月18日和20日,北京市发展和改革委员会分别组织相关专家小组,对生物芯片北京国家工程研究中心建设项目的基本建设、竣工财务决算和创新能力建设三个专项情况进行了验收。验收专家组进行了实地考察,听取了项目建设法人单位博奥生物有限公司(简称“博奥生物”)的情况汇报,查阅了相关资料,并在此基础上进

苏大附一院HLA配型实验室获国际最高认证

  白血病可通过造血干细胞移植来帮助根治,不过在进行移植前,HLA(人类白细胞抗原)配型又是一个关键环节。日前,苏大附一院HLA配型实验室获得了国际最权威的美国组织相容性和免疫遗传学会(简称ASHI)的认证,成为了大陆首家获得此项资质的机构。这样一来,中华骨髓库和世界范围骨髓库的资料数据就能“无障碍