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免疫组化的操作步骤

一 免疫组化(SP法)操作步骤 1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。 (注:孵育不要超过 10 分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 - 10% 正常羊血清,这一步可以省略。) 6. 缓冲液洗 5min/2 次。 7. 滴加一抗工作液 37 ℃孵育1 - 2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定) 8. 缓冲液洗 5min/2 次。 9 . 滴加 Primary Antibody Enhancer(增强子),在室温下孵育 20 分钟。 10 .缓冲液洗 5mi......阅读全文

免疫组化技术规范

   欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会(CCP)免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法,同时,发现和推广标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标

免疫组化技术规范(一)

欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会(CCP)免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法,同时,发现和推广标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标准化,

乙脑减毒活疫苗加强免疫与水痘减毒活疫苗联合接种

  水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性呼吸道传染病,传染性强,常在儿童中暴发流行。近年来,国内有研究[1-3]显示,接种2剂次的水痘疫苗与1剂次相比,具有更好的免疫持久性和更强的保护性。世界卫生组织文件[4]中指出,单价水痘减毒活疫苗与其他儿童疫苗同时接种是安全的,免疫原性不劣于单独接种,如破伤风

免疫组化技术规范-1

欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会(CCP)免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法,同时,发现和推广标准化的染色程序,改善和提高免疫组化实验的可靠性,使免疫组化技术更具标准化,

免疫组化实验原理和步骤

  实验原理:   抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原

免疫组化&病理诊断(二)

2.5对“未分化”恶性肿瘤的分类未分化恶性肿瘤包括癌或肉瘤,在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞的起源特征不能分类,初步区分组织学类型用非特异性抗体,在其基础上再选用特异性抗体做进一步鉴定。如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白,有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原,一些黑色素瘤表现出

免疫组化 & 病理诊断 (二)

2.6进一步分类不同器官与组织交界处肿瘤由于重叠的特征,在一些组织器官交界处的肿瘤,仅凭组织学基础对肿瘤进行分类很困难。如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是间质起源的胃肠道间质瘤(GIST),还是神经起源的神经鞘瘤;同样发生于组织交界处的肿瘤有睾丸胚胎癌与精原细胞癌,两者较难区别,且治疗与

免疫组化&病理诊断(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些

免疫组化 & 病理诊断 (一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20个世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一

【一文掌握】免疫检查点抑制剂治疗的预测性生物标记物

  免疫检查点抑制剂治疗开创了治疗新时代,随之的疗效预测评价的生物学标记物研究也将带来更大的益处。  引言  免疫系统对肿瘤细胞监视和清除有重要作用。肿瘤细胞通过各种机制逃避免疫是肿瘤特征之一。Chen和Mellman描述的肿瘤免疫循环是抗肿瘤免疫增强反应策略的基石。包括的步骤有:肿瘤抗原的释放、树

免疫组化实验过程中的注意事项

如何随心所欲的做好免疫组化?免疫组化(Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了,从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论,一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体,成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在,至此之后不断对于方法改良创新,也就形成了我们实验中才使用的免

免疫组化技术在病理诊断中的应用

由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起,所以,这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例,在免疫组化技术出现以前,对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平,而引入免疫组化技术后

研究康复训练对学习记忆和精神行为的影响

目的:阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)又称老年性痴呆,是一与年龄老化相关、以认知功能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病。 我们选择SAMP8小鼠为研究对象、SAMR1小鼠为正常对照,探讨丰富康复训练对SAMP8学习记忆能力和精神行为的影响及其机制,为应

药物对动物体内溶血素含量的影响实验

实验方法原理 《名医别录》对人参的临床药用选择还有“人薓乃重百济者,星系而坚白,味薄於上党,次用高丽,高丽即辽东,形大而虚软,止应择取之尔,实用并不及上党者,不乃百济远矣,百济今属高丽,高丽所献兼有两种”的描述,实验材料 小鼠试剂、试剂盒 绵羊红细胞补体都氏试剂人参氢化可的松注射液仪器、耗材 微量加

Vector免疫组化笔(H-4000)使用方法

Vector免疫组化笔,即ImmEdge Hydrophobic Barrier Pen,又称ImmEdge Pen,超级免疫组化笔,适用于玻璃切片的各种免疫组织化学染色实验,如PAP法,ABC法,免疫荧光法,冰冻切片及原位杂交技术,可减少抗体和试剂用量,避免染色时液体流淌和扩散,提高操作速

药物对动物体内溶血素含量的影响实验

实验方法原理药物对动物体内溶血素含量的影响实验测定药物对小鼠溶血素的影响,并用SPSS软件进行统计学分析。实验材料小鼠试剂、试剂盒绵羊红细胞补体都氏试剂人参氢化可的松注射液仪器、耗材微量加样器恒温振荡器紫外可见分光光度计实验步骤1.  实验分组及处理昆明种小鼠80只,体重18~22 g,随

人体衰老生物标志物检测与衰老机制研究

人口老龄化是21世纪我国社会经济发展中的重大国情。截至2019年底,我国60岁以上老龄人口已达到2.54亿,占总人口的18.1%。我国人均预期寿命已达77.0岁,但人均健康预期寿命仅为68.7岁,平均有8年多时间处于带病生存状态。健康老龄化是应对人口老龄化的国际共识。我们面临的老龄对健康影响的诸多问

免疫组化设备优势介绍

  免疫组织化学技术在病理诊断中具有十分重要的作用。为保证免疫组化制片的准确性,可重复性与整体染色的一致性,全自动免疫组化染色仪已被广泛使用。  全自动免疫组化仪的优点:  1. 全自动免疫组化仪具有对切片以及抗体的识别功能,保证抗体准确滴加无误;  2. 仪器内部恒温,基本不受外界环境温度影响; 

免疫组化实验原理和步骤(五)

(6)结果判断免疫组化的结果判断有两种方法:一是对以检测结果阳性细胞指数来定性(如核抗原的标记),判断方法是以一个规野中阳性细胞数不总细胞癿百分比,再取10个相同视野算取平均指数。另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定,一般阳性细胞数在0-25为阴性,25-50为十,50-75为十十,75以

免疫组化染色应该注意的问题

免疫组化染色方法已不是什么很难的问题,操作步骤简单也易掌握,但要染好免疫组化,其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事,但最基本的应从以下方面加以注意:(1) 去除内源酶及内源性生物素 一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织,其中自身含有一定量的内源酶和内源性生物素,而免疫组

我国体外诊断试剂临床使用情况、问题与建议

2015年,全国卫生产业企业管理协会医学检验产业分会受托对北京、上海、山东、广东、江苏、浙江、江西、福建8个省市51家医疗机构(三级甲等医院24家,二级甲等医院15家,一级医院11家)和一家第三方医学实验室体外诊断试剂使用情况进行了认真深入的调查,通过调查真实地摸清了我国体外诊断试剂的使用情况。第一

为什么仅仅通过NGS来测基因组突变...

Illumina最近的一个大动作就是投入一亿美金,分出一部分骨干,成立一个以“液态活检”为中心的公司。所谓液态活检,就是不用组织穿刺,通过 血液,尿液这类非侵犯性取才得来的标本对疾病进行诊断和评估。液态活检是精准医疗的重要组成部分,试图在血液里找到肿瘤细胞,或肿瘤DNA,通过高通量测 序

支原体肺炎患儿自身免疫功能的检测分析

    【摘要】 目的 观察支原体肺炎患儿自身免疫功能的变化。方法 将278例肺炎患儿分为支原体肺炎组135例、细菌性肺炎组143例,选取同期门诊体检正常小儿124例作为正常对照组,分别检测三组儿童的T细胞亚群、免疫球蛋白、补体C3、抗核抗体和循环免疫复合物。结果

布鲁克推出两款timsTOF新品,助力“真”单细胞蛋白组学

*  独特的 timsTOF SCP 技术,通过无偏、深度单细胞 4D-蛋白质组学与scRNA测序提供补充,彻底改变了定量单细胞生物学研究;Mann等人的论文中,突破性地成功鉴定并定量了单细胞中1,400多种蛋白质。*  新一代 timsTOF Pr

免疫组化实验原理和步骤(三)

免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所

复发/转移性乳腺癌标志物临床应用专家共识(二)

3、复发/转移性乳腺癌一线治疗疗效的预测生物标志物3.1   BRCA1/2 具有明确遗传倾向的乳腺癌患者约15%携带BRCA1/2基因胚系变异,携带BRCA1/2基因致病突变者,不论女性还是男性,乳腺癌发病风险均大幅增加。目前NCCN、ESMO、ASBS及CSCO等指

肿瘤免疫微环境分析方案助力PD-1/PD-L1疗效预测

近年来肿瘤免疫治疗取得了一系列突破性成果,成为继肿瘤手术治疗、放化疗及靶向治疗之外的革命性治疗手段,特别是基于PD-1、CTLA-4等免疫检查点抑制剂的治疗方案表现尤为突出。即便如此,肿瘤的免疫治疗仍面临巨大挑战,如疗效不确定性、总体有效率低、耐药抵抗及检测生物标志物缺乏等都制约了对患者的精准治疗。

免疫组化实验原理和步骤(四)

免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题,操作步骤简单也易掌握,但要染好免疫组化,其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事,但最基本的应从以下方面加以注意:(1)去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织,其中自身含有一定量的内源酶和内源性

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

双光束分光光度计与单光束分光光度计比有哪些优点?

   良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组