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ELISA实验所用试剂详解

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。1 免疫吸附剂 已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月以上。有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。 www.labdd.com1.1 固相载体 固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加......阅读全文

ELISA的试剂-2

3.1.3  包被用抗原   用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中

ELISA实验中常见问题和注意事项

  1 临床标本的收集和保存  用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆)。本实验室用ELISA测定乙肝两对半,甲肝,戊肝,抗HIV的标本时,在处理和保存方面要考虑以下几个方面:  1)要注意避免出现严重溶血及血清中混有红细胞。当标本出现严重溶血及血清中混有红细胞时,反应孔不易洗净,残留在反

免疫球蛋白标记技术

酶标记抗体 荧光素标记抗体技术 125I标记单克隆抗体技术             实验方法原理 酶标

免疫球蛋白标记技术_酶标记抗体

免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。实验方法原理酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗

ELISA的操作要点

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操

酶联免疫吸附(ELISA)实验——双抗体夹心法(测抗原)

酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。实验方法原理图1. 双抗体夹心法测抗原示意图 本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品

PCR-ELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

酶联免疫吸附(ELISA)实验

双抗体夹心法(测抗原) 间接法(测抗体) 竞争法测抗原             实验方法原理 图1. 双抗体夹心法测抗

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

确保ELISA自动化检验的质量需注意的几个要点

在20世纪90年代中期以前,我国血液ELISA检验主要靠手工操作。从20世纪90年代中期开始,逐步开始自动化。目前,不少采供血机构已实现血液ELISA检验的自动化。1 正确认识检验自动化与检验质量的关系人们通常认为,只要购置了自动化仪器,血液ELISA检验的质量自然就会得到保证。而实际上,拥有自动化

酶联免疫吸附(ELISA)实验

酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。实验方法双抗体夹心法(测抗原)间接法(测抗体)竞争法测抗原实验方法原理图1. 双抗体夹心法测抗原示意图 本法首先也是用特异性抗体

ELISA的操作要点(二)

六、显色和比色(一) 显色显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定

实时荧光定量PCR

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在许多

赭曲霉素(Ochratoxin)酶联免疫分析(ELISA)

赭曲霉素(Ochratoxin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中赭曲霉素(Ochratoxin)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用直接竞争EL

四环素酶联免疫分析(ELISA)

四环素酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中四环素残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有四环素偶联抗原,加入四环素标准

地高辛(Digoxin)酶联免疫分析(ELISA)

地高辛(Digoxin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中地高辛(Digoxin)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有地高辛(Digoxin)偶联抗原,加入地高辛

伏马菌素 (FB)酶联免疫分析(ELISA)

伏马菌素 (FB)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中伏马菌素 (FB)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方

磺胺嘧啶(SD)酶联免疫分析(ELISA)

磺胺嘧啶(SD)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中磺胺嘧啶(SD)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有磺胺嘧啶(

红霉素(Erythromycin)酶联免疫分析(ELISA)

红霉素(Erythromycin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中红霉素(Erythromycin)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争EL

桔霉素(Citrinin)酶联免疫分析

桔霉素(Citrinin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中桔霉素(Citrinin)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要:本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状,从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技

黄曲霉毒素B1(AFB1)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用...

本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于玉米、大米、麦类、豆类、花生、花生酱中黄曲霉毒素B1(AFB1)残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法,在微孔板包被有黄曲霉毒素B1(AFB1)偶联抗原,加入黄曲霉毒素B1(AFB1)标准品或样品,游离黄曲霉毒素B1(AFB1)

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明

中文名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒别名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA Kit保存温度:2-8℃低温保存有效期:6个月试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-52含量。检测原理:采用双抗体夹心ABC-

人SP-DELISA试剂盒-实验测定质量

  人SP-DELISA试剂盒-实验测定质量使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。   产品用途:用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。   检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属   产品保存:2~8℃、有效期6个月,我司elisa试剂盒为

抗TP抗体筛查试验的假阳性问题及其对策

  一、梅毒体外诊断试验  1.梅毒的体外诊断试验分类  梅毒的体外诊断试验按试验所用抗原分为非密螺旋体抗体试验(nontreponemal antibody test, NTrAT)和密螺旋体抗体试验(treponemal antibody test, TrAT)。NTrAT包括快速血浆反应素环状

德国IBL中国代理商深圳市科润达生物工程有限公司

  德国IBL公司简介    德国IBL国际有限公司是一家有着近30年经验的专业医疗诊断试剂研发制造商,并在多个国家有分支机构和合作伙 伴,在全球90多个国家有广泛的分销网络。其产品已经通过ISO9001、ISO13485和欧洲CE认证,并且通过了美国FDA的认证。公司产品系列包 括酶联免疫分析试

ELISA中的试剂(1)-免疫吸附剂

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)

ELISA中的试剂(2)-结合物

3.2  结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要

犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒说明

中文名:犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒别名:犬肌红蛋白(MYO/MB)ELISA  Kit规格:48t/96t保存:2~8℃有效期:6个月样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作

Western Blot的过程与优化,着重于化学发光检测

实验步骤 一、蛋白质印迹法 蛋白质印迹 (Western Blotting) 法是在混合的复合物中鉴定和定量特定蛋白质的一种有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。这一技术对固定在硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯