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多色纤维荧光原位杂交实验

实验方法原理试剂、试剂盒培养细胞悬液PBS晕圈溶液牛血清白蛋白乙醇醚10 X 切口缓冲液核苷酸混合物Bio-16-dUTP二硫苏糖醇酵母 RNA鲑鱼精 DNASSCTNT 溶液TNB 溶液仪器、耗材微型离心机Camag UV 盒 II荧光显微镜探针DNA实验步骤一、制备含 DNA 纤维的载玻片标本大多数类型的细胞,只要保持没有固定或干燥且细胞核完整,都适于做纤维 FISH 分析。冻存组织标本和沉淀的细胞团块,只要组织能重新悬起成细胞悬液,就还可以使用。有大量细胞质的细胞需要更剧烈的处理以使其裂解。一般情况下都是先采用最温和的方法,如果裂解不充分,就增加 SDS 的处理。制备开始前,将下列物品放置在冰上:1.每种晕圈溶液和超纯水配制的 0.05%SDS 溶液分别放入 IOOmL 烧杯中,另外两个 IOOmL 烧杯分别装超纯水。2.一个试管装 20%BSA,另一个试管装 PBS。3.玻璃板(5 mm 厚)。制备细胞悬液适用于培养的细......阅读全文

FISH荧光原位杂交技术简介

FISH荧光原位杂交技术:1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验,获得成功。1987年,染色体原位抑制杂交法的创建,使FISH技术得以迅速发展。随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰荧光素等非放射性物质标记探针,创立了双色FISH荧光原位杂交技术 。1990年,

FISH荧光原位杂交技术简介

FISH荧光原位杂交技术:1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验,获得成功。1987年,染色体原位抑制杂交法的创建,使FISH技术得以迅速发展。随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰荧光素等非放射性物质标记探针,创立了双色FISH荧光原位杂交技术 。1990年,Ne

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用   微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已

微生物学检验基本技术(2)

第六节 自动化技术在微生物检验中的应用  微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界

荧光原位杂交的染色体分析

荧光原位杂交的染色体分析(一)标本的制备1.室温下,依次用70%、90%和100%的乙醇脱水5min。2.空气干燥载玻片。3.若短期使用,载玻片可在室温贮存数天。若载玻片要长期保存,应在室温下过夜使组织“老化”(aged),然后放入容器中,该容器密封于含干燥剂的塑料袋内,-70℃保存。根据作者的经验

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

实时荧光定量PCR技术在分子生物学和医学研究等领域的...

  定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推出,它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用对荧光信号积累的实时检测来监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该

FISH 检测乳腺癌中 HER2 扩增实验

            试剂、试剂盒 胃蛋白酶 中性福尔马林缓冲液 甲酰胺 乙醇

FISH 检测乳腺癌中 HER2 扩增实验

基因扩增经常在人肿瘤细胞中被检测到并在肿瘤发生中起重要的作用。用比较基因组杂交对肿瘤细胞进行全基因组扫描,揭示出在实体肿瘤基因组的许多区域有基因拷贝数的改变。对改变区域 DNA 的深入研究显示在实体瘤中复杂的 DNA 重排涉及多个基因并跨越几个 Mb。在染色体倍体变化中,经常伴有基因重排。尽管研究