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荧光基因分型筛查微小亚端粒重排实验

实验方法原理 实验材料 样品 DNA试剂、试剂盒 PCR 引物 氯化镁溶液dATP、dGTP、dCTP 和 dTTP 混合液Taq 聚合酶96孔板PCR热循环仪琼脂糖EB 溶液上样缓冲液电泳缓冲液Long Ranger™ 凝胶溶液尿素仪器、耗材 水平凝胶电泳装置紫外透射反射仪滤膜 GS-400 HD ROXABI 377 自动测序仪实验步骤 一、端粒卫星的 PCR 扩增1.将引物置于冰上融化后轻轻混匀，稍离心。2.对于每个标记物，准备 12 个反应的混合液包括：196μL 高压蒸馏水、32.5 μL 10XPCR 缓冲液、9.75μL 氯化酶、32.5μLdNTP 混合物、正反向引物各 2uL 和 1U Taq 酶，在冰上操作和保存。3.将上述 15uL PCR 反应混合液加到 10uL DNA 中，用铝箔胶盖密封 96 孔板。4.扩增前将 96 孔板放到热循环仪上，94°C 变性 5 min。5.循环条件为 94°C、30s，......阅读全文