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细胞破碎技术的基本概念及其基本方法1

生物分离是从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关产品(如具有药理活性作用的蛋白质等)的过程,又称为下游加工过程。生物分离过程的主要特点:常无固定操作方法可循,生物材料组成非常复杂,分离操作步骤多,不易获得高收率,培养液(或发酵液)中所含目的物浓度很低,而杂质含量却很高,分离进程必须保护化合物的生理活性,生物活性成分离开生物体后,易变性、破坏, 基因工程产品,一般要求在密封环境下操作。生物分离的一般工艺流程:发酵液→预处理→细胞分离→( 细胞破碎→细胞碎片分离 )→初步纯化→高度纯化→成品加工的过程,而胞内产物需经细胞破碎,细胞碎片分离等步骤;胞外产物则将细胞去除后,对余下的液体即可进行初步纯化。在生物分离技术中细胞的破碎应用非常的广泛,尤其在生物技术迅猛发展的今天更是不可小视。组织细胞的破碎方法很多,有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。在破碎前,材料常需要预处理,如动物材料......阅读全文

超高压均质机的知识要点,一看便知!

   超高压均质机主要应用于脂质体、脂肪乳、纳米混悬剂、SLN、微乳、脂微球、乳剂、乳品、大输液、脂肪乳、细胞破壁、酵母细胞破碎(毕赤酵母、酿酒酵母、汉逊酵母等)、大肠杆菌破碎、结核杆菌破壁、丝状破碎、人工倍体细胞破壁、动物细胞破碎、动物组织细胞破碎、Vero细胞破碎、花粉破碎、植物细胞、藻类破碎提

超声波细胞破碎仪各大品牌的比较

超声波细胞破碎仪—也称为超声波细胞破碎机、超声波细胞粉碎仪、超声波破碎机、细胞破碎仪、超声细胞破碎仪等,是利用一种超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途的仪器;超声波细胞破碎仪能用于各种动植物细胞、病毒细胞、细菌及组织的破碎,也可用于各类无机物质的破碎重组,同时可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡

细胞破碎仪的机械破碎技术

细胞破碎仪的破碎技术是怎样的?在生物产物的分离提取中,如果目标物质为胞外产物(如霉菌产生的糖化酶等),其提取过程较简单,只需直接进行固液分离,获得澄清的滤液,再进行分离纯化操作;如果目标物质为胞内产物或多细胞生物组织中的各种生物分子(如碱性磷酸酶等胞内酶、部分外源基因表达产业或植物细胞产物等),都需

细胞破碎-超声波和超高压的比较

破碎细胞,进而提取出高纯度、高活性的蛋白质或多肽,是每个科研工作者和从事生物技术工作的人的共同心声。超声波破碎法在细胞破碎中应用最普及,它的原理是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。超声破碎操作简便,但是破碎成本高,易引起温度的剧烈上升。在中~大

可溶性抗原(soluble antigen)的制备及鉴定

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备用于制备免疫原的材料必须是

微生物琥珀酸半醛脱氢酶ELISA试剂盒固体样本的收集方法

微生物琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)ELISA试剂盒固体样本的收集 1、组织标本:切割标本后,称取 1g 组织,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分),仔细收集上清。分装一 份待检测,其余冷冻备用

超声波细胞破碎仪选型

目前,生产超声波细胞破碎仪的厂家比比皆是,销售超声波细胞破碎仪的商家更是多如牛毛,更有各个厂家生产产品的科技含量各异,再加上同一品牌适用不同要求的型号多样,导致市场上超声波细胞破碎仪的价格大幅度范围波动,但是,只要我们首先根据需要确定所需超声波细胞破碎仪的大致性能,选定基本款式,然后在此基础上比较同

低温超高压连续流细胞破碎仪技术简介

生物技术工业中,分离纯化的成本常常占整个过程成本的60%~90%。我国生物技术产业以传统的发酵工业为主,产品分离纯化是发酵工业最重要的阶段,是整个发酵生产线的下游,不仅决定产率,而且决定产品的质量和安全性。这部分包括的操作较多:细胞与发酵液的分离、破碎细胞释放胞内产物、膜分离去除细胞碎片等。(200

细胞破碎技术的基本概念及其基本方法-3

(6)冻结-融化法将细胞放在低温(-150C),然后在室温中融化,反复多次,细胞壁破裂。(7)干燥法经干燥后的菌体,其细胞膜的渗透性发生变化,同时部分菌体会产生自溶,然后用丙酮、丁醇或缓冲液等溶剂处理时,胞内物质就会被抽提出来。破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比数,即: Y(%)=[

可溶性抗原的制备及鉴定-1

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备 用于制备免疫原

超声波细胞破碎仪的原理和用途

声波细胞破碎仪是一种常用的能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎,同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。今天我们主要来介绍一下超声波细胞破碎仪的原理和用途,希望可以帮助到大家。超声波细胞破碎仪的原理超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过

细胞破碎及超声波细胞破碎仪应用

  细胞破碎是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。   但是由于细菌、酵母、真菌、植物细胞壁的组成成分不同,且同类细

超声波细胞破碎仪使用注意事项

超声波细胞破碎仪使用注意事项    超声波细胞破碎仪是用来进行细胞破碎的超声波实验仪器,主要工作原理为超声波的空化作用。超声波细胞破碎仪的原理和应用范围:超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密

超声波细胞破碎仪应市场需求向高端靠拢

超声波细胞破碎仪应市场需求向高端靠拢     超声波细胞破碎仪把与变幅杆相连的换能器放入隔音箱顶部的专用插孔内,完后把电源线连接在主机后面的电源输入接口;并连接好主机电源线,设定“超声时间、间隙时间、工作次数”,一般超声时间不宜开的过长,控制在1-5秒为宜,工作时zui

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎

超声波细胞破碎仪选购需要注意的事项

超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用。仪器又名超声微波协同萃取仪,超声波细胞裂解仪,超声波纳米材料粉碎机。超声波细胞破碎仪由超声波发生器和换能器两大部分组成 

技术:超声破碎细胞常见问题

大肠杆菌表达外源蛋白,在超声破碎的时候,用含有1%triton-X-100的PBS悬浮,然后超声的效果较好,1%triton-X-100的作用还是很明显的,对其他的一些细菌同样起作用。   细菌沉淀直接加样品1buffer,再加5ul的巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10mi

生物大分子制备的前处理

生物大分子制备的前处理 生物大分子制备的前处理(生物材料的选择、细胞破碎、生物大分子的提取) 1 生物材料的选择  制备生物大分子,首先要选择适当的生物材料。材料的来源无非是动物、植物和微生物及其代谢产物。从工业生产角度选择材料,应选择含量高、来源丰

包涵体的纯化

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放

超声波细胞破碎仪常见问题汇总

最近先欧仪器针对网友对超声波细胞破碎仪的问题进行了一定的汇总和解答,希望能给用户在今后使用超声波细胞破碎仪带来方便。问题一:超声波细胞破碎仪结构上有啥特点?  1、超声波细胞破碎仪可储存5个控制模式。  2、定时数字显示,输出能量由光条显示,0~100%连续可

聚能生物与国家蛋白质平台开展广泛合作

  JNBIO(聚能生物)是一家由留学人员创办的高新技术企业,自主创新与欧洲前沿技术相融合,开发生产低温超高压连续流细胞破碎仪,是国家技术创新基金立项扶持的项目。   JNBIO系列低温超高压连续流细胞破碎仪自投入市场以来,积极开展与国家蛋白质科学研究平台的合作。到目前为止,中国科学院生物物理研究

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术:破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

生物化学实验基本技术—破碎技术

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化,都需要事先将细胞和组织破碎,使生物大分子充分释放到溶液中,并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植

细胞破碎及超声波细胞破碎仪应用

  细胞破碎是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。   但是由于细菌、酵母、真菌、植物细胞壁的组成成分不同,且同类细

超声波细胞破碎仪在市场上发展的脚步

超声波细胞破碎仪在市场上发展的脚步    超声波细胞破碎仪是一种用于细胞破碎的实验室仪器,相信很多人对这个都不是很陌生的,但是超声波细胞破碎仪如何操作很多人却不是那么的清楚,这里我们来看看到底超声波细胞破碎仪如何操作吧。    首先我们需要确认超声波

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎

包涵体的纯化

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放

细胞破碎技术

细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。 结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。细胞破碎阻力  细菌   几乎所有细菌的细胞壁

亚细胞结构的分离与鉴定-2

第三节 微粒体的分离细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,称微粒体(microsome)。分离