间接免疫荧光法检测自身抗体

自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号也能够被识别。间接免疫荧光法不需要复杂、费时的化学制备程序,而酶联免疫吸附测定等实验,要取得高特异性则必须提取和纯化抗原,并将其吸附于固相载体上,如果抗原不纯,则相关抗体会出现假阳性结果。 间接免疫荧光法保留了原基质的完整抗原谱,因而可同时检测大量抗体.获得较高的检测效率。当抗几种不同抗原的抗体需要在一种生物基质上同时检测时(如抗细胞核抗原抗体),或为每一种实验逐一准备抗原很困难或相当复杂时,就应该选择免疫荧光法。另外,应用免疫荧光法还可检测到一些至今未知的抗体。 在没有荧光显微镜时,可尝试用酶标记的第二抗体代替荧光标记的......阅读全文

间接免疫荧光法检测自身抗体

    自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号

间接免疫荧光法检测自身抗体

自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号也能够被

间接免疫荧光法原理

间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原-抗体复合物中第一抗体结合,洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光,以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统,缺点是易产生非特异性荧光。

活细胞间接免疫荧光法

一.实验器材:1.  器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2.  试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1.  将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟

自身免疫性肝病的自身抗体检测

自身免疫性肝病是-类原因不明的慢性肝病,主要包括3种与自身免疫密切相关的,以肝、胆损伤为主的疾病:自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)。自身免疫性肝病的诊断主要依靠病史、临床表现、体征和实验室检查结果。每种自身免疫性肝病都具有特征性自身抗体谱,自身抗体

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

自身免疫性肝病(AILD)与自身抗体检测

自身免疫性肝病(AILD)是一组肝脏免疫耐受机制失衡引起的肝细胞或胆管上皮慢性损伤性炎症疾病,根据其临床表现、生化、免疫学、影像学和组织病理学特点,可分为以肝实质细胞进行性损伤为主的自身免疫性肝炎(AIH),以胆道系统受累为主的原发性胆汁性肝硬化(PBC)和原发性硬化型胆管炎(PSC)。自身免疫性肝

间接免疫荧光法有哪些优缺点

优点:可直接看到细胞核,判断疾病的方向缺点:培养荧光操作人员大约需要半年时间,成本高(需要荧光显微镜);不能量化指标,周期长,半定量。

间接免疫荧光法的操作步骤介绍

  1、细胞准备与固定  (1)单层生长细胞:取对数生长细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中,置二氧化碳培养箱培养1-3天,待细胞接近长成单层,取出盖玻片,进入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根据实验目的,

免疫学实验自身免疫抗体检测介绍

  自身免疫抗体检测介绍:  正常抗体具有自身免疫调节功能,产生极弱的自身抗体。病人由于免疫调控功能缺陷,导致机体对自身细胞抗原产生反应,表现为以细胞介导的细胞毒性作用和细胞表面特异性抗原与自身抗体结合而产生的免疫反应。  自身免疫抗体检测正常值:  正常值呈阴性  自身免疫抗体检测临床意义:  异

免疫学实验自身免疫抗体检测介绍

  自身免疫抗体检测介绍:   正常抗体具有自身免疫调节功能,产生极弱的自身抗体。病人由于免疫调控功能缺陷,导致机体对自身细胞抗原产生反应,表现为以细胞介导的细胞毒性作用和细胞表面特异性抗原与自身抗体结合而产生的免疫反应。   自身免疫抗体检测正常值:   正常值呈阴性   自身免疫抗体检测

自身免疫性疾病实验诊断的自身抗体检测介绍

  自身免疫性疾病的发生同自身抗体的产生密切相关,因此自身免疫性抗体的检查对自身免疫疾病的诊断尤为重要。自身抗体检查包括如下几类。  1.抗核抗体谱  包括抗核抗体、抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体、抗其他细胞成分抗体(如抗细胞质成分抗体、抗核包膜蛋白抗体、抗细胞周期抗原抗体等

自身免疫抗体检测的检查过程

  研究对象取静脉血2ml,分离血清,20℃保存待测。酶联免疫吸附(ELISA)法。测定结果采用χ2检验。

自身免疫肝病相关抗体检测的相关介绍

  自身免疫肝病相关抗体检测是指对引起自身免疫异常并导致肝脏疾病的自身抗体的检测。自身免疫性肝病与病毒感染、药物、遗传等其他因素所致的肝病不同,是一组由于自身免疫异常导致的肝脏疾病,突出特点是血清中存在自身抗体,对诊断有相对特异性,常见的自身免疫肝病相关抗体有抗核抗体、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体等。

自身免疫抗体检测的注意事项

  不合宜人群:无要求。  检查前禁忌:早晨空腹检测,因此一般禁忌进食后检查。  检查时要求:注意血清标本不被污染和按照医生的安排去做。

自身免疫肝病相关抗体检测的检查方法

  多采用免疫印迹法进行自身免疫肝病相关抗体的检测,将患者的血清样本与检测膜条温育,如果样本阳性,出现特异性抗体与相应抗原位点结合,再加入酶标记的抗人IgG进行第二步温育,最后加底物可产生颜色反应。其检查步骤为:稀释待测血清;滴定已稀释的血清至反应槽反应区,避免产生气泡;温育30分钟,用洗涤液洗涤3

自身免疫抗体检测的临床意义

  异常结果:自身免疫性抗体在不同类型肝功能异常患者血清中为阳性。血清自身抗体的检测对诊断、鉴别、治疗自身免疫性肝病与其他肝病具有一定的临床意义。自身免疫抗体在不孕不育人群中有较高的发生率。观测女性不孕不育症与更多自身免疫抗体的关系,为免疫性不孕不育患者的诊治提供依据。  需要检查的人群:一般是肝病

关于自身免疫抗体的实验室检测

从医学检验到检验医学,整个检验行业面貌一新,尤其是近年来相关政策的出台以及检验新技术的涌现,共同推进检验医学的进一步发展,我们也一直在不断的改进中发现和解决问题。对于国内检验行业的进步,不论是新技术、新政策,工作在一线的使用者们是问题的发现者,也是最权威的发言人。因此,我们衷心希望“临床在线”栏目能

什么是自身抗体和自身免疫性疾病

自身抗体是指针对自身组织、器官、细胞及细胞成分的抗体,分为天然自身抗体和病理性自身抗体。天然自身抗体存在于健康人和动物血清中,多为 IgM(即“免疫球蛋白M”) 型,主要识别细胞内的抗原、细胞膜或分泌成分,具有一定的生理功能(清除体内的死亡细胞碎片等),与自身抗原亲和力低但具有广泛的交叉反应性。病理

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家

三、《自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议》十三条本《建议》可为广大临床医生和检验医师在日常诊疗实践中拟定检测项目及检测流程时提供参考。自身抗体检测的合理应用有赖于检验医生和临床医生的共同合作。1、《建议》十三条2《建议》解读 (1)对临床怀疑有自身免疫性疾病的患者建议进行自身抗体的检测

间接免疫荧光抗核抗体检测怎么看

看有荧光增强标记的地方。间接免疫荧光抗核抗体检测技术是直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。间接免疫荧光法(IIF)这是进行抗核抗体、抗核仁抗体和抗胞浆抗体筛选检测

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家(上)

自身抗体检测是自身免疫性疾病诊治中的重要工具,随着早期诊断、规范化治疗的开展,自身抗体检测在疾病诊断、监测及预后评估中发挥的作用也日益受到重视。但是,由于目前自身抗体检测缺乏统一的标准化检验方法,加上工作条件、传统诊疗习惯、结果判读以及医疗保险限制等方面的因素影响,导致自身抗体检测在临床应用上存在着

自身抗体检测在自身免疫病中的临床应用专家建议

自身免疫病是由于免疫功能紊乱,机体产生针对自身抗原的病理性免疫应答反应而引起器官或系统损伤的一类疾病。根据临床表现和病变累及的范围,自身免疫病可以分为系统性和器官特异性,前者以SLE、SSc、RA、APS等为代表;后者包括自身免疫性肝炎(AIH)、PBC、自身免疫性甲状腺炎、胰岛素依赖性糖尿病等。自

自身免疫性疾病新型自身抗体研究进展

     自身免疫性疾病(autoimmune disease, AID)是指机体免疫系统对自身成分的免疫耐受被打破, 从而攻击自身的器官、组织或细胞, 引起损伤而诱发的一类疾病。按受累器官组织的范围将AID分为器官特异性AID和非器官特异性AID两大类。器官特异性AID是指病变局限于某一特定器官或

自身免疫性疾病新型自身抗体研究进展

  自身免疫性疾病(autoimmune disease, AID)是指机体免疫系统对自身成分的免疫耐受被打破, 从而攻击自身的器官、组织或细胞, 引起损伤而诱发的一类疾病。按受累器官组织的范围将AID分为器官特异性AID和非器官特异性AID两大类。器官特异性AID是指病变局限于某一特定器官或组织,

间接免疫荧光抗核抗体检测是什么意思

检测自身抗体的方法有多种,包括间接免疫荧光法、颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验、放射免疫法、免疫双扩散法、参比对流免疫电泳法、免疫印迹法、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法以及速率免疫比浊法等,间接免疫荧光法即适用于检测针对原位成分也适用于可溶性成分的抗体,其余各法均适用于针对可溶性成分的抗体,可根据临

临床化学检查方法介绍自身免疫抗体检测介绍

自身免疫抗体检测介绍:  正常抗体具有自身免疫调节功能,产生极弱的自身抗体。病人由于免疫调控功能缺陷,导致机体对自身细胞抗原产生反应,表现为以细胞介导的细胞毒性作用和细胞表面特异性抗原与自身抗体结合而产生的免疫反应。自身免疫抗体检测正常值:  正常值呈阴性自身免疫抗体检测临床意义:  异常结果:自身

关于自身免疫肝病相关抗体检测的检查前准备

  1.检查前注意事项  (1)向患者解释清楚检验目的、采血时间和注意事项。  (2)采血前患者应避免剧烈运动和劳动,一般要求患者休息15分钟后进行采血,冬季应使患者暖和后保持血液循环通畅再采集,以保证检测结果的准确性。  (3)根据具体情况,尽量避免药物干扰。  2.标本采集  采集静脉血,用离心