蛋白质分子量的测定：SECMALS与传统校正法（一）
溶液中蛋白质的物理性质和行为取决于与蛋白质的纯化和构成及其自身固有属性相关的多种因素。 尺寸排阻色谱 (SEC) 是一种强大的工具，常用于分析蛋白质的回收率、分子量和聚集性。 SEC 的工作原理涉及在样品流经多孔的惰性色谱柱基质时对样品进行分离。 较小的分子进入填料孔内，而较大的分子则被排除在外，因此可更快速地通过色谱柱。 结果是获得基于流体力学体积的分离，但是人们通常要求得出分子量。 以前，通过比较未知蛋白质与（已知分子量的）标准球状蛋白质的洗脱时间估算分子量，我们把这一过程称为“传统校正法”。 通常使用诸如紫外 (UV) 等单一的浓度检测器完成上述操作。 然而，现在我们联合使用光散射检测器和浓度检测器（紫外或折光率，RI），可不依赖保留时间测定蛋白质分子量。 这一进步非常有用，因为许多蛋白质不具有球状结构，使得它们测得的分子量不准确。 由于增加了更多检测器（如另一台浓度检测器）、特性粘度 (IV) 和动态......阅读全文
蛋白质分子量的测定：SECMALS－与传统校正法（一）
溶液中蛋白质的物理性质和行为取决于与蛋白质的纯化和构成及其自身固有属性相关的多种因素。 尺寸排阻色谱 (SEC) 是一种强大的工具，常用于分析蛋白质的回收率、分子量和聚集性。 SEC 的工作原理涉及在样品流经多孔的惰性色谱柱基质时对样品进行分离。 较小的分子进入填料孔内，而较大的分子则被排除在外
蛋白质分子量的测定：SECMALS－与传统校正法（二）
表 1：BSA 单体、二聚体和三聚体的测得分子量三聚体二聚体单体RV 峰 - (ml)14.3115.3717.05Mn - (kDa)203.8135.266.4Mw - (kDa)204.4135.366.5Mw/Mn1.0031.0011.001Wt Fr（峰）0.0540.1650.78图
蛋白质分子量测定的相关介绍
随着质谱技术的发展，分子量的测定已从传统的有机小分子扩展到了生物大分子。MALDI-MS技术以及极高的灵敏度、精确度在蛋白质分析中得到了广泛的应用。该技术不仅可测定各种疏水性、亲水性和糖蛋白的分子量，还可以测定蛋白质混合物的分子量。这可认为是蛋白质分析领域的一项重大突破。
测定蛋白质分子量的常用方法
知道蛋白质分子量、氨基酸组成计算器http://www.proteomics.com.cn/tools/mwcal/一般的方法：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量[原理]十二烷基硫酸钠（Sodium dodecyl sulfate, 简称SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量，
cod测定中吸收校正法
吸收校正法 这种方法的原理是在完全吸收并准确测定体系内Cl-氧化产物Cl2的量的基础上，从总COD中减掉这部分Cl2相当的COD。该方法采用和标准法同样的消解方式，只是消解时选用一个特制带吹咀的锥形瓶，加热结束后用充气泵吹出体系内滞留的Cl2，并在多孑L玻板吸收管中加以吸收，然后用碘量法测定吸收
常用的一些测定蛋白质分子量的几种方法介绍
1．凝胶过滤法 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。未知
溶菌酶纯度鉴定与分子量测定
一、实验目的和内容目的：1. 通过本次实验的学习与操作，使学生在实验过程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）测定蛋白质纯度与分子量的原理与依据；2. 要求学生掌握电泳原理以及SDS－PAGE垂直板电泳分离蛋白质技术；3. 熟悉垂直板电泳操作原理和方法，凝胶染色与脱色方法，凝胶图谱的绘制与计算
蛋白质测定仪与两种传统测定法相比优势尽显
随着社会经济的发展以及人们生活水平的提高，“健康”成为了我国大部分百姓的生活指标。而其中，饮食健康较为重点，如今的消费者不仅要求饮食的安全性，对食物的营养均衡更是有极大的追求。正如蛋白质含量，因其是人体不可或缺的营养物质，所以在许多食物营养价值中都占据着举足轻重的地位。因此，现如今有
凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验
实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel C
凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验
实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel Chromatography) 。凝胶一般是由葡聚糖的胶体
SDSPAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定
一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠（SDS），大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，
凝胶层析(gel－chromatography)法测定蛋白质分子量
一、实验目的1.了解凝胶层析的基本原理。2.掌握利用凝胶层析法测定蛋白质分子量的实验技能。二、实验原理凝胶层析 (gel chromatography)是20世纪60年代发展起来的一种分离分析方法。其法有许多同义词如凝胶过滤、分子排阻层析、分子筛层析、凝胶渗透层析等。凝胶层析是利用具有一定孔径大小的
凝胶层析法(gel－chromatography)测定蛋白质分子量
一、实验目的1. 了解凝胶层析的原理及其应用。2. 通过测定蛋白质分子量的训练，初步掌握凝胶层析技术。 二、实验原理 凝胶层析又称排阻层析，凝胶过滤，渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等，而测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。凝胶是一种具有立体
核酸纯度、浓度与分子量测定实验
实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光，其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm，在此波长下，吸光度1 A相当于一定浓度的核酸，可以通过A260/A
核酸纯度、浓度与分子量测定实验
实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm，在此波长下，吸光度1 A相当于一定浓度的核酸，可以通过A260/A280 的比值，来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂
实验室测定蛋白质分子量的方法有哪些
测定蛋白质分子量的常用方法：粘度法、凝胶过滤层析法、凝胶渗透色谱法、SDS-凝胶电泳、渗透压法、质谱法包括电喷雾离子化质谱技术和基质辅助激光解吸电离质谱技术、光散射法（多角度激光散射）、沉降法（超速离心法）。1、粘度法 一定温度条件下，高聚物稀溶液的粘度与其分子量之间呈正相关性，随着分子量的增大，聚
蛋白质分子量(protein－molecular－weight)的测定——葡聚糖凝胶过..
实验原理葡聚糖凝胶（Sephadex）过滤法测定蛋白质分子量的原理，主要是依据这种凝胶具有分子筛作用，一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内，凝胶孔隙所占的体积称为内水容积Vi，凝胶颗粒间的自由空间所占的体积称为外水容积V0。当样品流经凝胶柱时，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝胶内部
蛋白质的分子量是多少
一般来说，蛋白质的分子量需在8000以上。若分子量再小一些就属于多肽的范围了。分子质量：设氨基酸的平均相对分子质量为a，含b个二硫键，蛋白质的相对分子质量=ma-18(m-n)-2b，也即氨基酸的平均分子量x氨基酸总的分子数（肽链数+肽键数）-18x脱水缩合的水分子数（和肽键数相等）。
怎么算蛋白质的分子量
蛋白质的分子量的计算：1、可以用氨基酸数n乘以110（蛋白质中氨基酸平均分子量）来粗略估计蛋白分子量。2、也可用软件，将DNA翻译成蛋白，精确计算其分子量。3、用excel自己做了一个表，如果知道组成蛋白的各种氨基酸的数目，可以精确计算分子量和分子式（或称作化学式）。常见蛋白质分子量参考值（单位：d
质谱法鉴定蛋白质分子量
质谱法鉴定蛋白质分子量对样品的消耗很少，且具有更高的灵敏度、分辨率和准确度，有利于对复杂混合物样品的分析。目前广泛使用的用干蛋白质鉴定的质谱分析主要使用两种类型质谱:一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量，MALIDI离子源产生的离子多带单电荷，质谱图中的峰与样品各组分质量数是一-对应的，不用
多角度光散射（MALS）检测器工作原理及性能特点（三）
以马尔文的Viscotek SEC-MALS 20为例，较新的MALS检测器都已重点采用垂直样品池，以突破横向样品池设计固有的局限性。在这种结构中，流动相和激光彼此垂直，并且和横向系统一样可以容纳多个测量角度，但这种设计可以使小角度测量具有更大的物理空间，从而提高了准确测量的概率。 图3：在垂直
XRF分析仪的基体校正法和重叠校正法
增量法是当没有适当的标准样片时使用的方法，即往样品中添加已知的与测量元素相同的元素，根据X射线强度的增加率对目的元素定量分析，但要注意：适用于1%以下、背景是否扣除、试样的混匀程度。
如何查找蛋白质的分子量大小
www.uniprot.orgUniProt是一个集中收录蛋白质资源并能与其它资源相互联系的数据库，也是目前为止收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全面的一个数据库。 UniProt是由欧洲生物信息学研究所（European Bioinformatics Institute）、美国蛋白质信息资源（P
如何查找蛋白质的分子量大小
www.uniprot.orgUniProt是一个集中收录蛋白质资源并能与其它资源相互联系的数据库，也是目前为止收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全面的一个数据库。 UniProt是由欧洲生物信息学研究所（European Bioinformatics Institute）、美国蛋白质信息资源（P
Folin酚法(Lowry)测定蛋白质的分子量应的注意事项
仪器有分光光度计 台式离心机 精密天平 三角瓶 烧杯 量筒 移液器 Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马
快速电脑水分仪与传统的水分测定方式对比
随着种业现代化的发展，对种子检验的水平要求也越来越大，与此同时种子检验工作的压力也越来越大。以种子水分测定为例，传统的水分测定方式在当前的种子检测过程中，呈现出了其局限性，在一定程度上限制了种子行业的发展，已经很难使用现代工作的需要，因此采用快速电脑水分仪来进行测定，是当前种子水分检测工作的
快速电脑水分仪与传统的水分测定方式对比
随着种业现代化的发展，对种子检验的水平要求也越来越大，与此同时种子检验工作的压力也越来越大。以种子水分测定为例，传统的水分测定方式在当前的种子检测过程中，呈现出了其局限性，在一定程度上限制了种子行业的发展，已经很难使用现代工作的需要，因此采用快速电脑水分仪来进行测定，是当前种子水分检测工作的迫切需要
多角度光散射（MALS）检测器工作原理及性能特点（一）
摘要：光散射检测仪能够直接测量分子量分布，因此在凝胶渗透色谱以及尺寸排除色谱法分析中起着重要作用。比较常用的是多角度光散射(MALS)检测仪，因为在某些情况下，它们能为回转半径（Rg）的测量提供最精确的数据，而在另外一些情况下MALS已经成为公认的行业标准。马尔文仪器公司新型Viscotek S
一体化专用GPC测定高聚物分子量
本实验考察了新型一体化专用凝胶色谱仪HLC-8320GPC EcoSEC的基本性能，对比了一体化仪器和组合式仪器在保留时间重复性、基线稳定性方面的区别；对保留时间、分子量测定结果的日内、日间重复性进行了考察；采用单分散宽孔径分布的聚苯乙烯填料装填的TSK-GEL SuperM
蛋白质含量的测定方法（一）
实验原理：蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法、双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法