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单亲二倍体的分子检测实验

实验材料 样品 DNA试剂、试剂盒 引物dNTP 混合物反应缓冲液Taq DNA 聚合酶丙烯酰胺甲叉丙烯酰胺TBE过硫酸铵仪器、耗材 热循环仪PCR 管电泳装置实验步骤 一、PCR 反应实验程序1.准备 PCR 反应混合物:根据 DNA 样本的数量来确定除了 DNA 外其他混合物的体积(额外增加一份来确保有足够的 PCR 反应混合物),将扩增每一个遗传标记并且在每一个 PCR 反应管内分 19.5uL 的反应混合物。2.在每个管子中加 0.5, 的 DNA 样本。3.如果不用带有加热盖的 PCR 仪,那么就需要在每个管子的顶部加入矿物油来防止液体蒸发。4.把管子放在 PCR 仪中,95°C 加热 3 min 变性 DNA。5.95°C 变性 40s、55°C 引物退火 40s、72°C 延伸 40s,循环 30?35 次。6.72°C 终末延伸 7 min。7.把 PCR 产物和尿素上样缓冲液 I:......阅读全文

DNA测序技术的现状和发展(八)

虽然这些最初的纳米孔实验并没有获得预期结果,但它们至少显示出纳米孔在单分子技术方面的应用优势,例如高度的敏感性,同时也带动了纳米孔核酸分析技术的研究热潮,并在理论及实验方面取得了一些成果。自从发现在电场力作用下,长达1000个碱基的单链DNA分子也能通过纳米孔之后,人们就更加坚信, 廉价的纳米孔

IMGE:作物育种的“马良神笔”

  高产优质新品种是农业的基石,但传统作物育种方法周期长、效率低。近年来,随着分子生物学、基因组学和农业生物技术的发展,新的作物育种技术不断涌现,一定程度上加快了作物育种进程、提高育种效率,但在实际应用中仍存在较多不足。  日前,中国农业科学院生物技术研究所和华南农业大学的科研人员研发出一种基于单倍

流式细胞术在临床检验中的应用

付海龙(蚌埠医学院研究生部)赵亚萍(解放军82医院检验科)流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学、流体力学、激光技术、电子计算机技术等高度结合和发展的结晶,是一种在功能水平上对单细胞或其他细胞粒子、抗原物质进行快速检测分析和分选的技术〔1〕。FCM

DNA测序技术的现状和发展(七)

3. 新一代测序技术的前景在2007年6月,James Watson的基因组序列登录到了GenBank数据库当中,这是第一次使用非Sanger测序法获得了人类个体基因组序列,并且第一次将个人基因组序列公之于众。整个测序过程在两个月之内就完成了,花费不到100万美元,这只占耗时10年之久的人类

高龄孕妇产前诊断技术大PK

  产前诊断的实验室技术由筛查与确诊两部分组成。筛查是胎儿异常风险的评估,诊断通常需采用侵入性技术,是胎儿异常的确诊手段,医生可依据该产前诊断结果,进行临床处理或对孕妇提出胎儿处置的建议,但存在一定的风险,有应用对象的局限、孕妇接受度的制约,以及医疗资源的限制等。应充分考虑各项技术的优势与局限。  

2019年,中国“大农业”里那些高科技

   今年,我国“大农业”科研领域又诞生了诸多令人惊奇的发现,每一条都与我们息息相关。它们涵盖了观赏农业、林业、作物、医学等各个领域,包括睡莲、玉米、硅藻等进展。为了展现这些成就,本报特此就我国农业科学家今年发表的大部分重要论文进行梳理,以飨读者。野生玉米大刍草、SK、现代玉米自交系ZHENG58的

《自然》及子刊综览

  《自然—遗传学》  草莓基因组研究获新成果  《自然—遗传学》本周在线发表的一篇论文报告了一个几近完整的草莓参照基因组。该基因组为了解这一广受欢迎的水果的起源和演化历史提供了新见解。  八倍体栽培种草莓卡姆罗莎有8组染色体,也被称为花园草莓,因味美清香而深受喜爱。  美国密歇根州立大学的Patr

Cell Res重点论文:单细胞表观多组学测序技术最新突破

  2017年6月16日,北京大学生命科学学院生物动态光学成像中心汤富酬课题组在《Cell Research》杂志在线发表了题为“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研

Cell Res重点论文:单细胞表观多组学测序技术最新突破

  2017年6月16日,北京大学生命科学学院生物动态光学成像中心汤富酬课题组在《Cell Research》杂志在线发表了题为“Single-cell multi-omics sequencing of mouse early embryos and embryonic stem cells”的研

Nature:借助第三代测序韩国发表最连续人类基因组

  国立首尔大学医学院的研究人员和美国被誉为“测序黑马”的公司——10x Genomics联合运用去年新发售的GemCodeTM测序平台以及第三代测序PacBio单分子实时测序平台在本期的Nature上发表了一项新的研究,对一名韩国人的基因组(AK1)进行从头组装和单倍体型定相信息分析。这是迄今为止

测序先锋Craig Venter完整测定自身基因组

基因遗传密码比之前预想的复杂的多 科学网 备受争议的基因组研究先锋Craig Venter又有新动作!他的研究小组详细地测定了他自己的基因组序列,使得人们能够观测单个基因组中基因的变化。初步分析报告发表在最新一期的《PLoS生物学》上。 此次研究的领导者、美国J. Craig

流式细胞仪的发展历史及其原理与应用进展(二)

流式细胞术发展趋势可归纳为: ①流式细胞仪从单纯大型仪器发展为适应各种实际应用的便携式、台式、高分辨率、高质量分选的研究型流式细胞仪; ②对流式细胞术检测荧光参数,从采用荧光单色、双色分析发展为多色分析,目前最多可同时检测15 种荧光信号; ③从检测参数的相对定量发展为绝对定量; ④从检测参数的手动

微阵列—比较基因组杂交技术检测染色体异常

【摘要】近年微阵列一比较基因组杂交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技术被应用到临床细胞遗传学领域。该技术是选择DNA特殊片段作为靶,固化在载体上,形成密集、有序的分子微阵列。然后,从测试标本中提取DNA,将测试DNA

染色体制备仪

  培养细胞的染色体核型分析技术在产前诊断,肿瘤预后,不孕不育查因,科学研究等方面应用广泛,也是细胞遗传的一项基本检测技术。  通过体外培养获得大量的分裂细胞之后,加入秋水仙素,使分裂中的细胞停止于分裂中期,再经过染色体制备,将染色体的条带染色显示出来,显微镜下计数细胞核型、染色体数目及条带,分析后

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...

实验材料核苷酸                                         &n

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

            试剂、试剂盒 扩增缓冲液 dNTP 混合溶液 甲酰胺上样缓冲液 蔗糖凝胶缓冲液 TBE 电泳缓冲液

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖凝胶缓冲液TBE 电泳缓冲液限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶人类基因组 DNA正向引物和反向引物[a-32P]dCTP丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸胺甘油TEMED仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 沸水浴电泳板、破璃和 0.4 mm 隔

单链构象多态性和异源双链分析方法检测突变实验

险测突变的目的主要是为弄懂人类遗传性疾病的分子机制,以便有效的针对这些疾病进行预防、诊断和治疗,但更多的是用于分析不同生物体基因型与表型之间的关联。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液dNTP 混合溶液甲酰胺上样缓冲液蔗糖

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验

实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)

安捷伦科技创造出一款独具特色的细胞遗传学工具

安捷伦科技将 CGH 和 SNP 分析结合到同一芯片上创造出一款独具特色的细胞遗传学工具   2010 年 10 月 11 日,北京——安捷伦科技公司(纽约证交所:A)今日推出 SurePrint G3 Human CGH+SNP 芯片平台,这一创新型的系统能够同时分析染色体拷贝数改变和不改变的染色

高通量芯片技术在细胞遗传学检测领域的划时代飞跃

  细胞遗传学是从细胞的角度,主要是从染色体的结构和行为来研究遗传现象,并找出遗传机制和遗传规律。目前和基础理论与临床医学紧密结合对于遗传咨询和产前诊断具有重要意义。而迅速发展的芯片技术在检测通量、分辨率、灵敏度等方面都远远超过了传统的细胞遗传学方法。因此可以说高通量芯片技术是细胞遗传学检测领域的一

用流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

用流式细胞仪检测细胞凋亡

  细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰

华大基因再出手 单细胞转录组学测序技术的系统分析

  单细胞转录组测序(Single-cell RNA-seq)是在单细胞水平对转录组(mRNA)进行测序的一项新技术,可发现细胞群体中真正起作用的细胞,特别适合对高度异质性的干细胞、肿瘤细胞及胚胎发育早期的细胞群体进行研究,认识细胞分子机制和基因调控网络。单细胞RNA-seq技术需要在测序前制备文库

作物基因组学研究进展(二)

⑵小麦基因组研究小麦是全球最重要的粮食作物之一,小麦的稳产和增产对我国乃至全世界粮食安全的影响举足轻重。近年来由于全球气候变化、环境变化的影响,小麦生产面临严峻的挑战,对于小麦的育种和品种改良工作提出了新的要求。普通小麦(Triticum aestivum L.)是3个不同亚基因组形成的异源

华大发布“676”高精度基因组标准及解决方案

  6月15日,在欧洲人类遗传学大会(ESHG 2019)上,全球基因组学领导机构华大集团发布了基于华大智造自主测序技术DNBSEQTM和stFLR的“高清”组装基因组解决方案及标准。在大会现场,华大集团高级副总裁、华大智造首席科学官Rade Drmanac博士向在场嘉宾阐述了华大定义“高清”基因组

流式细胞仪在细胞凋亡检测应用

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪 检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。下面是一幅凋亡过程图。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺

AFLP标记技术

实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的