以双链DNA为模板的体外诱变:用DpnⅠ选择

实验材料 带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株 试剂、试剂盒 ATP 含有四种 dNTF 的混合溶液 诱变缓沖液 NaOH NaAC TE 噬菌体 T4DNA 连接酶 噬菌体 T4 多核苷酸激酶 DpnI 限制性内切酶 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶 寡核苷酸引物 质粒 DNA 仪器、耗材 ......阅读全文

分子遗传学词汇体外诱变

中文名称:体外诱变英文名称:in vitro mutagenesis定  义:在离体条件下用物理、化学或生物因子处理DNA使其发生突变。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

以双链-DNA-为模板的体外诱变:用-DpnⅠ选择

            实验材料 带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株 试剂、试剂盒 ATP 含有四种 dNTF 的混合溶液

以双链-DNA-为模板的体外诱变:用-DpnⅠ选择突变体实验

本方案和方案 4 是以变性质粒 DNA 为模板,使用两条寡核苷酸和高保真聚合酶引导 DNA 合成。本方案中,经多轮热循环全长双链质粒 DNA 将以线性形式扩增,产生一种 DNA 双链上带交错缺口的突变质粒(Hemsleyetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J

以双链-DNA-为模板的体外诱变:用-DpnⅠ选择突变体实验

实验材料 带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株试剂、试剂盒 ATP含有四种 dNTF 的混合溶液诱变缓沖液NaOHNaACTE噬菌体 T4DNA 连接酶噬菌体 T4 多核苷酸激酶DpnI 限制性内切酶热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶寡核苷酸引物质粒 DNA仪器、耗材 带障蔽的自动微量移液器用

分子遗传学词汇靶突变

中文名称:靶突变英文名称:target mutation定  义:利用体外诱变的基因置换野生型基因,从而改变该基因的功能。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

​枯草杆菌蛋白酶的基本信息

枯草杆菌蛋白酶催化水解蛋白质为氨基酸 ,在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值 ,被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。产生这类酶的菌有地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、缓慢芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌和南极嗜冷芽孢杆菌等。它们产生的酶分别被称为枯草杆菌蛋白Carlsbe

C.B.S变性梯度凝胶电泳DGGE-应用原理及注意事项

  原理:变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophresis,DGGE)是一种实用价值较高研究DNA突变的分析方法。本质是一类电泳(电泳定义:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子

C.B.S变性梯度凝胶电泳DGGE-应用原理及注意事项

  原理:变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophresis,DGGE)是一种实用价值较高研究DNA突变的分析方法。本质是一类电泳(电泳定义:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子

C.B.S变性梯度凝胶电泳DGGE-应用原理及注意事项

原理:变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophresis,DGGE)是一种实用价值较高研究DNA突变的分析方法。本质是一类电泳(电泳定义:带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis, EP)。利用

比较详细的PCR

1.PCR反应的最适条件4.1 TaqDNA聚合酶在早期进行的PCR反应中,使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段,,即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性,DNA合成反应只能在370C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90C以上进行,故在每两个循

比较详细的PCR-技术

实验概要一种比较详细的PCR技术实验原理1. TaqDNA聚合酶在早期进行的PCR反应中,使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段,即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性,DNA合成反应只能在37°C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90°C

HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解

用于基因工程的工具酶一,限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1) 50年代初发现细菌能将外来DNA片段在某些专一位点上切断,从而保证其不为外来噬菌体所感染,而其自身的染色体DNA由于被一种特殊的酶所修饰而得以保护,这种现象叫做限制