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蛋白质的双向电泳实验

实验方法原理 蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing ,IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。蛋白质双向电泳是将蛋白质等电点和分子量两种特性结合起来进行蛋白质分离的技术, 因而具有较高的分辨率和灵敏度, 已成为蛋白质特别是复杂体系中的蛋白质检测和分析的一种强有力的生化手段。实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 AcrBisTEMED 原液过硫酸铵两性电解质载体尿素NP-40NaOHH3PO4SDSTris-Cl2-巯基乙醇SDS-PAGE甘氨酸溴酚蓝琼脂MgCl2抗坏血酸PVP甘油2-巯基乙醇丙酮仪器、耗材 研钵石英砂烧杯试管玻璃棒量筒双向电泳槽实验步骤 1. 叶片可溶性蛋白质的制备: 取叶片200 ......阅读全文

双向琼脂糖凝胶电泳实验

【实验目的】了解和掌握双向电泳技术,并学习用它来研究与DNA 复制相关的问题.【实验原理】DNA 分子有线状的,还有一些非线状的,如复制叉和重组DNA 结构.双向琼脂糖凝胶电泳技术就是被人们开发用以研究一些非线状DNA 分子的.双向琼脂糖凝胶电泳技术(2-D gel)实际上可分为两类:中性/

双向电泳的新进展和新工具

  随着蛋白质组学概念的提出,双向电泳(2D gel electrophoresis)一度曾变得很流行。近几年,因质谱技术的快速发展,LC-MS的热度似乎更高。然而,在某些应用上,双向电泳更有优势。   双向电泳提供了整个样品的鸟瞰图,而这是质谱无法比拟的。它可以对样品中复杂的蛋白质进行整体性

固相化 pH 梯度双向凝胶电泳实验

方案1 双向凝胶电泳鼠肝蛋白质提取物的制备实验 方案2 双向凝胶电泳真核生物细胞裂解物的制备实验 方案3 双向凝胶电泳大肠杆菌裂解液的制备实验 方案4 双向凝胶电泳脑脊液蛋白样品的制备实验 方案5 第一向:蛋白质的等电聚焦电泳实验

固相化 pH 梯度双向凝胶电泳实验9

方案9 胶体考马斯亮蓝染色实验暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏固相化 pH 梯度双向凝胶电泳实验标签:双向凝胶电泳蛋白质 固相化pH 蛋白质与蛋白质组学实验指南 第四章双向电泳是研究蛋白质组学的一种有效方法。与单向电泳相比,它能从复杂的蛋白质混合物中分离出更多的成分。电泳时,蛋白

影响双向电泳分离效果的若干实验条件比较研究(一)

陈华 ,刘树滔 ,温腾 ,原山武 ,久保田英博 ,饶平凡(1.福州大学生物工程研究所,福建福州350002;2.日本ATI''''O公司技术开发部,东京113—8425)摘要:对第一向为载体两性电解质pH梯度等电聚焦双向电泳(Iso—DALT)中若干影响分离效果的实验

三氟拉嗪处理后的白杄花粉管蛋白质组学研究

实验概要本实验运用双向电泳技术、计算机图像分析与大规模数据处理技术以及质谱技术研究了。钙调素调节的下游效应蛋白的表达模式和活性,通过鉴定这些蛋白、分析它们的表达模式以及它们依赖于Ca2 的与CaM的相互作用,将有助于我们了解钙-钙调素信号在时间和空间上的特异性,初步探讨了细胞如何通过钙-钙调素信号响

双向电泳实验

ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法             实验方法原理 双向电泳(two-dime

双向电泳的实验过程

实验概要本实验介绍了双向电泳的详细实验过程。实验原理2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。主要试剂1. BSA2. Bradford液3. DTT4. 0.

双向电泳实验——ISO-DALT 方法

实验方法原理双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒尿素去污剂仪器、耗材

双向电泳常见问题解答

随着人类基因组草图完成,蛋白质组研究全面展开。作为经典蛋白质组学分离技术,双向电泳越来越被科研人员所熟知。但要想得到漂亮的双向电泳谱图,却并不那么容易。我们将针对双向电泳过程中常出现的问题进行总结,希望能给您的实验带来帮助。 本期我们重点关注双向电泳图谱中常出现的水平条纹。双向电泳水平条纹

技术生物所举行双向电泳技术基本原理与操作专项培训

现场示范  为提高科研人员实验操作技能,保障仪器操作规范,中科院技术生物所于6月20日邀请通用电气工程师围绕双向电泳技术展开原理与技能培训,以帮助相关研究人员从蛋白质组学层面,更精准地进行生物样品的蛋白质动态变化研究。培训共20余名研究人员参与,大家就相关实验中遇到的问题展开深入探讨

双向电泳实验——IPG-DALT 方法

试剂、试剂盒尿素去污剂还原剂载体两性电解质仪器、耗材IPG 凝胶实验步骤一、第一向1. 固相 pH 梯度凝胶或凝胶条的准备固相 pH 梯度凝胶的灌注及聚合方法请参阅 固相 pH 梯度等电聚焦 有关章节,如需要可切成 3~5 mm 宽的胶条在 -20℃ 保存一年。为避免繁琐和复杂的灌胶和切胶条程序和保

花粉管钙通道抑制后蛋白质组学研究

实验概要本实验运用蛋白质组学技术手段对钙通道受抑制后花粉管中蛋白质表达模式进行研究,以期鉴定出与Ca2 调节花粉管生长相关的蛋白质,拓展对Ca2 在花粉管生长调节机制的认识。主要设备IPGphor II等电聚焦系统(Amersham Biosciences,Sweden)ZipTipC18 (Mil

双向电泳实验

试剂、试剂盒 尿素去污剂仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶实验步骤 一、第一向1. 等电聚焦凝胶的准备双向电泳通常用聚丙烯酰胺凝胶作介质,但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非离子或两性离子去污剂。为了增加样品的可溶性,可加 0.5% CHAPS。在第一向电泳中,最重要的是用载体两性电解

生物学重复和技术重复的区别

生物学重复是指不同生物个体或者不同生物群体的样品之间进行地相同处理而进行的实验,而技术重复是指同一样品进行的多次相同实验。举例:对来自三只健康小鼠A、B、C的血清样品分别各进行一次双向电泳,这三次双向电泳就是生物学重复;而取其中一只小鼠的血清样品进行三次双向电泳,或者将三只小鼠的血清混合后的样品进行

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

            实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonuc

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

实验方法原理 在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。实验材料 HeLa S3 细胞抗体试剂、试

蛋白质的双向电泳实验_等电聚焦法

蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。本实验目的是

蛋白质组学概念的起源和发展

  蛋白质组学的诞生和发展,离不开多学科和技术的逐渐交叉融合。这些学科技术包括(但不限于)基因组学、生物化学、分析化学、自动化、基于电磁场的精密质谱仪、信号处理、数理统计和计算机科学。近年来,分子医学、大数据技术和人工智能的发展,进一步加速推动了蛋白质组学的成长,使之在精准医疗领域展示出越来越大的应

双向电泳的实验过程

实验原理2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。主要试剂1. BSA2. Bradford液3. DTT 4. 0.05% 的溴酚兰 5.

双向电泳操作步骤及相关溶液配置

A. 实验过程一 实验原理:    2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离.这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息.二 实验步骤:1. 样品的溶解    取纯

电泳仪

电泳仪是一种开关电源,在电泳实验过程中为电泳设备提供实验所需要的电压、电泳、功率等相关电源的一种设备。根据不同的实验要求和不同的电泳仪,分别可用来做不同的实验,比如基础型电泳泳可以用来做常规水平电泳、中小垂直电泳、醋酸纤维膜等普通电泳实JJ验要求,推荐用于基础教学、临床诊断;通用型电泳仪可以各种印迹

双向电泳实验过程及相关溶液配置

双向电泳实验过程及相关溶液配置A. 实验过程一、 实验原理:2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。二、 实验步骤:1. 样品的溶解取纯化后的晶体蛋白3.0m

ZOOM® IPGRunner™系统:简化的双向电泳(2D gel eletrophoresis)

摘要双向电泳(Two-dimensional(2D) gel electrophoresis)是一项基于蛋白的两种不同特性:电荷和质量来分离蛋白的技术。首先基于蛋白固有电荷,通过等电聚焦(isoelectric focusing IEF)进行第一向蛋白分离,然后根据蛋白的质量,在第二向中通过SDS-

循环肿瘤细胞的检测方法

  近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C

双向电泳

实验概要本实验介绍了双向电泳技术,先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到二维分布的蛋白质图。实验原理双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上

不均一核糖核蛋白复合物的制备实验

在核内,RNA 聚合酶 Ⅱ 的转录产物同大量不同类型的核前体 mRNA/mRNA 结合蛋白,不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucUoprotein,hnRNP)  结合形成 hnRNP 复合物。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法

实验室超纯水设备的原理及纯化过程

  导读:随着超纯水现用途越来越广,实验室超纯水机收到越来越多实验室的欢迎,实验室超纯水设备制水便捷,可以有效提高工作效率,同时可以很大程度降低制水成本,并能保证水质。  另外像一些高端实验如动植物细胞培养、高效液相色谱、质谱分析、等离子耦合光谱、原子荧光、凝胶分析、细胞免疫、试管婴儿、TOC分析、

实验室超纯水设备的原理及纯化过程

  随着超纯水现用途越来越广,实验室超纯水机收到越来越多实验室的欢迎,实验室超纯水设备制水便捷,可以有效提高工作效率,同时可以很大程度降低制水成本,并能保证水质。   另外像一些实验如动植物细胞培养、液相色谱、质谱分析、等离子耦合光谱、原子荧光、凝胶分析、细胞免疫、试管婴儿、TOC分析、P

现有技术水平蛋白质水平上研究基因功能的技术有哪些

  随着分子生物学技术的开展,对生物基因组中包含的全部基因及其所翻译的蛋白质的功用加以解读和描绘,特别是大量未知基因的功用及其相应蛋白质产物的功用停止研讨成了基因工程研讨的热点方向。而在蛋白质程度上定量、动态、整体性研讨生物体的蛋白质组学,将在后基因组时期大大促进我们对基因功用的了解。酵母双杂交实验