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试管婴儿植入前遗传学诊断单细胞PCR的方法(2)

7.等位基因特异性扩增 在设计引物时,根据已知突变位点的特征,在引物3’端或中间设计一错配碱基,使之仅能与突变型或野生型基因互补,而只扩增相对应的突变型或野生型基因。主要用于点突变导致的遗传病的检测。其优点是只需一步PCR,而无需电泳和标记,摆脱了分子生物学方法中必经电泳的现象。在相互竞争的突变型和野生型引物中,分别采用不同荧光染料标记扩增的DNA,可直接对扩增产物进行判读。另外使用具有特定酶切位点的内嵌引物,也可提高产物特异性和产量,DNA扩增后用酶切割,由酶切产物可明确是否有基因突变,该法已应用于单个精子的DNA分析。8.全基因组扩增技术 PGD的难点之一是可检测的材料极为有限,通常仅l一2个卵裂球细胞,约15–30pg的基因组DNA,很难进行一个基因的多种突变或多位点基因的改变的基因分析。全基因组扩增技术建立和成熟对PGD的开展具有重要的意义。主要有引物延伸前扩增和简并寡核苷酸引物PCR两种方法。它能够无选择偏移的......阅读全文

北医三院乔杰:辅助生殖技术有了哪些进步?冻卵好么?

  试管婴儿并不是试管里长大的婴儿,其全称是体外受精-胚胎移植技术(IVF),就是分别将卵子与精子取出后,置于试管受精,再将受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。  1988 年 3 月 10 日,中国大陆首例试管婴儿郑萌珠在北京大学第三医院诞生。2019 年 4 月 15 日,郑萌珠成为母亲,产下一名

单细胞基因组测序如何实现:从实验到分析,步步解析

  随着生命科学研究的微观化,基于细胞群体的研究方法已不适用于某些研究领域(如肿瘤异质性、早期胚胎发育等)。单细胞基因组测序通过在单个细胞水平上进行测序,解决了用组织样本无法获得不同细胞间的异质性信息或样本量太少无法进行常规测序的难题,为科学家研究单个细胞的行为、机制等提供了新的方向。  【应用概览