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细胞培养污染的预防

体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。 一般预防可从以下几方面着手:1、添加抗生素各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理。2、从物品、用品消毒灭菌着手 细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。 定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯......阅读全文

微生物细胞、植物细胞与动物细胞在培养上的主要区别

微生物细胞培养,简称微生物培养,包括原核细胞培养(细菌培养)和真核细胞培养(霉菌培养和酵母培养)。这些细胞小、且具有细胞壁,细胞周期非常短,如细菌每20-30min增殖1次。植物细胞培养指原生质体培养。未考虑分离出原生质体的植物细胞培养,无论是游离的单细胞或组织块,都称作植物组织培养。动物组织细胞培

细胞污染的一些总结和心得

小生刚开始做细胞培养不久,对于一个细胞培养的新手来说,最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子,结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得,整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助,也希望各位达人作出补充,大家共

细胞培养污染的途径、危害及预防措施(一)

污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,而实验结果造成潜在的威胁,而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物

细胞培养污染的途径、危害及预防措施(二)

3 生物性污染的来源、危害及预防 外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。只要在一个开放的环境中进行培养,都难以避免发生污染。发生污染的可能性取决于操作方法、培养室的无菌环境以及实验室的规章制度。生物性污染对细

动物细胞大规模培养方法

根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5.培养过程产

细胞培养技术

实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件  1、实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染

293细胞的大规模培养

293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤,心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293

悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用

细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式,其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段,在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方

细胞培养实验的离心机的选择

实验记录手册|细胞培养实验的离心机选择细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生

细胞培养实验的离心机选择

 细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一

动物细胞大规模培养技术-1

一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年,动物细胞培养规模开始扩大,发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法,利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等,动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市

细胞培养反应器的操作模式

动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。 1. 批式操作(batch c

动物细胞大规模培养技术-2

2、固定化方法的选择 (1) 培养规模 由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度,且细胞的产率主要取决于细胞的扩散,因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作,但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。 (2) 培养方式&nbs

细胞培养反应器的操作模式

实验概要动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。实验步骤1. 批式操作(batch culture)&

细胞污染的分类、来源及预防污染的措施

细胞污染是细胞培养的大敌,预防和避免污染是细胞培养成功的关键。一旦轻敌就会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。而且小编的童鞋也经常向我抱怨:每到毕业季,就蓝瘦,香菇是因为细胞死了一批又一批,毕业遥遥无期啊!那么如何打一场漂亮的细胞保卫战呢?下面就跟随小编一起来学起来吧

方案27.5 羊膜细胞的培养

封闭式试管培养 开放式盖玻片培养             实验方法原理 在标准培养箱(37°C ) 中用 Lei

羊膜细胞的培养

封闭式试管培养 开放式盖玻片培养             实验方法原理 在标准培养箱(37°C ) 中用 Lei

掌握了这些细节,师姐再也不用担心我养不好细胞啦~

很多小伙伴在养细胞的时候,总是会出现这样或那样的问题,很多时候,那是因为你没有注意以下的细节问题,现在我们一起来看看:细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热

生物工程中的无血清细胞培养

无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑,其一般是在合成培养基的基础上,引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分,使培养基能满足动物细胞培养的要求,又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后,新的无血清培养基不断问世,人们经过研究发现,只要在培养基中增加某些适于细胞生长的

羊膜细胞的培养——封闭式试管培养

实验方法原理在标准培养箱(37°C ) 中用 Leighton 塑料管培养细胞,然后用胰蛋白酶悬浮法收集细胞。实验材料羊水标本D-PBSA秋水仙酰胺胸腺嘧啶核苷溴脱氧尿核苷胰蛋白酶EDTAHistopaque-l077试剂、试剂盒完全培养液胰蛋白酶和EDTA混合液消毒剂如Virkon氯化钾低渗溶液固

无血清技术及其培养基

经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。 无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们

细胞体外培养的三大污染

细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然

浅析细胞体外培养的三大污染原因

细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然

无血清的细胞培养

实验概要    经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。 实验原理    无血清培养基(serum free  medi

细胞培养技术-1

一.细胞培养的基本原理  细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞,用培养基制成细胞悬液,在体外适宜条件下,使细胞生长繁殖,并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液,组织培养使用的是组织块(0.5~1立方毫米)或薄片

细胞培养大攻略2

26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养

细胞培养板的选择与常见问题解答(一)

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。(1)平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择:贴壁细胞一

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

肿瘤组织源性的原代细胞培养

一、肿瘤细胞培养的概述        肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用肿瘤原代细胞培养基础培养基、5~10%血清浓度、细胞培养添加剂、抗生素等等即可。或在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添

原代细胞的培养与建系-3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 &