创新基因诊断,助力精准健康小海龟科技专访
第五届易贸生物产业大会（EBC 2020）于2020年5月27-29日在苏州知音温德姆酒店举行。大会聚焦精准医疗，深入探讨药物研发、细胞免疫、分子诊断、商业化等医药医疗全产业链热门话题。汇聚了政府、学术、产业、投资等一线领域的科学家、学者、企业家、投资人等两百多位嘉宾，从政策、技术、临床、市场等多角度出发，以主题发言、嘉宾论坛、线上直播等多样化的形式精彩呈现。作为致力于基因检测与分子诊断前沿领域的高新技术企业小海龟科技参会并作了《数字PCR技术新动态及应用新场景》的报告。借此机会，本站就疫情期间新冠病毒核酸检测、数字PCR仪实际应用等问题，采访了小海龟科技副总裁王怀舟先生。 小海龟科技副总裁王怀舟先生小海龟科技创立于2015年4月，核心团队成员有超过20年的相关领域专业经验。主要聚焦于精准医疗上游、分子诊断相关的设备、试剂耗材的全自主研发。以芯片为核心，在此基础上开发成套设备、及诊断试剂盒。共申请了36项发明ZL，目前......阅读全文
基因精准医疗步入临床小海龟科技数字PCR率先实现量产
数字PCR（digital PCR，dPCR）是一种新的核酸检测和定量方法，属于第三代PCR技术，将一个PCR反应平分至数万个微反应中，每个微反应有0或1个目标DNA序列，实现对样品的绝对定量和超高灵敏度的检测，具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性，是目前最精准、最灵敏的基因检测技术，
数字PCR简介
1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后，PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进
数字PCR技术
数字PCR作为第三代PCR技术，它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础，结合现代微机电和光学检测技术，实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元，然后对众多微反应单元
一文知晓PCR，定量PCR，数字PCR方法选择
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。diyi代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过
数字PCR发展历程
传统的荧光定量PCR，经过多年的发展，已是很成熟的实验方案了。其中，最常用的是Taqman法和SYBR Green法。而在这二种方法当中，Taqman法又以其特异性高、定量精确，得到广大用户的认可。但是Taqman法PCR，它还是一个相对定量的办法。它测的是一个Ct值，也就是PCR到第几个循
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应，部分这些反应包含了靶标分子（阳性），而其他不包含（阴性）。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间，TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时，没有信
数字PCR应用（二）
4、能够有效区分浓度差异（变化）微小的样品：更好的准确度、精密度和重复性，可以用于精确测定靶基因的相对表达，基因拷贝数变异分析等。图4. qPCR和dPCR的对比 四．dPCR的多指标检测的实现 如同qPCR一样，dPCR中实现多指标的并行检测能显著降低检测成本，获取更丰富的检测信息。 不同于qPC
数字PCR应用（三）
Fluidigm公司于2006年底推出了基于集成流体通路（IFC）芯片的Bio-Mark™ 高通量基因剖析系统。 其创新在于集成液体通路技术：应用集成电路制造工艺（光刻）在硅片或石英玻璃上刻上许多微管和微腔体，经过不同的控制阀门控制溶液在其中的活动来完成生物样品的分液、混合、PCR扩增。图8. Bi
什么是数字PCR
数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理是将一个PCR反应体系分配到大量微小的反应单元中，在每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA 模板) ，进行单分子模板扩增，扩增结束后通过阳性反应的数目和统计学方法计算原始样本中目标基因的拷贝数。
数字PCR应用（一）
一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运
什么是数字PCR？
数字PCR技术也称为第三代PCR技术，是一种核酸高灵敏检测和绝对定量的新方法。同传统的PCR相比，数字PCR增加了对反应体系进行分隔（Partition）的操作，将几十微升的反应体系分隔成了数万微小独立反应体系，核酸模板在这种分隔过程中被充分稀释，理想状态下每个微滴中含有1个分子的核酸模板，扩增完
数字PCR的优势
数字PCR是生命科学领域最引人瞩目的创新之一。与其他传统分子诊断技术相比，数字PCR技术的优势在于: 高灵敏度，可实现单分子级检测dPCR本质上将一个传统的PCR反应变成了数万个PCR反应， 在这数万个反应单元中分别独立检测目的序列，从而大大提高了检测的灵敏度。 高精度，可检测微
什么是数字PCR
数字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应，部分这些反应包含了靶标分子（阳性），而其他不包含（阴性）。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间，TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时，没有信
BioDigital.青数字PCR：实现更高通量的核酸绝对定量
——上海小海龟科技有限公司总裁吴东平博士专访 分析测试百科网讯 2021年3月28日，第十八届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会（简称“CACLP”）在“山城”重庆悦来国际博览中心召开。在本次展会上，上海小海龟科技有限公司（简称小海龟科技）为观众带来了全自动化数字PCR解决方案。分析测试百科
普通－PCR、实时荧光定量－PCR－和数字－PCR－对比分析
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由于
普通－PCR、实时荧光定量－PCR－和数字－PCR－对比分析
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由
普通PCR、实时荧光定量PCR、数字PCR技术的功能区别
一、普通PCR技术 KARY MULLIS （1944.12.28-2019.8.7） Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法（polymerase chain reaction ，PCR），据说是载着女友开车的时候，忽然灵光一闪，想到了PCR原理（论开车的好处）
RainDrop数字PCR系统实现10重PCR分析
【摘要】美国RainDance Technologies公司拥有ZL的RainStorm即皮升级微流体液滴制备技术，基于此核心技术RainDance推出了新型RainDrop 数字PCR系统，这一新型系统除具有超高检测灵敏度和精确绝对定量能力外，更拥有无与伦比的多重分析能力，可实现10重PCR分
快速了解荧光定量PCR与数字PCR区别
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。 1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由
知晓PCR，定量PCR与数字PCR的实验方法与选择
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将PC
普通－PCR、实时荧光定量－PCR－和数字－PCR－对比分析（一）
提起 PCR，在生物及其相关行业内可谓如雷贯耳，无人不知无人不晓，其影响之深，应用之广可见一斑。1985 年，美国 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人发明了聚合酶链反应（PCR），实现了在试管中模拟细胞内的 DNA 复制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶进行 PCR，由于该酶不
普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析（二）
模板 DNA 量越多，荧光达到域值的循环数越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据样品 Ct 值，就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点
数字PCR技术的原理
PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。
数字PCR的研究历史
1983年由美国Mullis首先提出设想，1985年发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，标志着PCR技术的真正诞生。1999 年，美国学者 Kenneth Kinzler 与 Bert Vogelstein 首次提出了数字 PCR (digital PCR，dPCR)的概念，实现了核酸拷贝数绝对
数字PCR应用及前景
剖析|你想要知道的数字PCR应用及前景 一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real
数字PCR检测技术介绍
数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，又称单分子PCR，它的原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ，实现“单分子模板PCR扩增”。 扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标
数字PCR技术的优势
1.绝对的定量：不依赖于标准曲线和参照样本，直接检测目标序列的拷贝数。 2.高灵敏度检测：灵敏度高达0.01%，可以检测含量极低的核酸序列（如CTDNA）。 3.区分浓度差异微小的样品：可以精准测定靶基因相对表达，基因拷贝数变异等。
数字PCR应用及前景
一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运
数字PCR的前生今世
近年来，数字PCR已取得了很大的进展，这在很大程度上要归因于商业化系统的开发，如QX200。这些技术进步似乎预示着一个转折点，更多的研究人员很快将能使用这种技术。这将推动新应用的开发，挖掘出数字PCR的全部潜能，并让科学家转向更强大的生物标志物研究，甚至单细胞分析。 2月底，Bi