Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文
Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol
Cosmid－DNA－Isolation
实验概要 Isolation of high yields of highly pure cosmid DNA using PureLink™ HiPure Plasmid Purification Kits. 实验原理 The PureLink™ HiPure Plasmid Purif
Plasmid－or－Cosmid－DNA－Miniprep
This protocol can be used to isolate sufficient amount DNA from 1.5ml o/n culture or 3ml 6hr culture to do several enzyme digestions.Spin 1.5ml o/n cu
Cosmid－Cloning:－Cell－preparation,－DNA－packaging,－and－Cell－Transfection
Cosmid Cloning: Cell preparation, DNA packaging, and Cell TransfectionProtocol taken from Stratagene's Gigapack packaging extracts instruction man
Large－Scale－Plasmid,－Cosmid,－BAC,－PAC,－and－Fosmid－DNA－Isolation
DNA Isolation by a Cleared Lysate Method Followed by Double Acetate Precipitation Version 3b - updated September 26, 1999The Most Recent Roe Lab Imple
Sequencing－off－Cosmid,－BAC,－PAC,－－with－ABI－Big－Dye－Terminators
Big Dye Protocols and Notes - Cosmid, BAC, BAC, Fosmid TemplatesHi all,Over the past two months, we have been testing various reaction conditions for
质粒DNA提取技术
实验概要通过本实验，学习和掌握碱裂解法提取质粒的方法和技术。实验原理质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA，大小在1～200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线
RNA提取技术概述
RT-PCR是将RNA的反转录（Reverse Transcription，RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术，近年来得到快速发展和广泛应用。首先，经反转录酶的作用，以RNA为模板，合成互补的DNA链（cDNA），再以cDNA为模板，通过PCR扩增合成目的片段。RT-PC
外周血DNA提取技术
方法一：1. 标本预处理：将1ml EDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中，加入1ml磷酸缓冲盐溶液（PBS），混匀，3500g离心15min,倾去含裂解红细胞上清。重复一次。用0.7ml DNA提取液混悬白细胞沉淀，37℃水浴温育1h。2. 消化：上述DNA提取液混悬白细胞，37℃水浴
核酸提取技术简史
核酸提取被用于许多分子生物化学试验和诊断，是克隆、转化、酶切、体外转录、扩增、测序等试验的第一个步骤。然而由于细胞内存在大量蛋白质、碳水化合物、原始样品中的代谢物以及其它污染物，提取高质量的核酸并非易事。现阶段的层析柱核酸提取方法有：（重要东西一般都放在前边的，所以先介绍最新的技术，我们精耐特基因的
超声提取与热回流提取技术优点对比
超声提取主要是运用了超声波的原理，由于超声波自身所具有的性质空化作用，机械效应及热效应，由于自身的这几个特点决定了它对中药提取的得天独厚的优势，它利用自己的空化效应和机械效应能迅速作用于中药材植物细胞的细胞壁，使得纤维素分子和果胶分子发生分离，细胞壁的架构发生破坏，细胞内容物比如多糖类、黄酮类、生物
超声波提取技术
超声波是指频率为20千赫～50兆赫左右的机械波，需要能量载体—介质—来进行传播。超声波在传递过程中存在着的正负压强交变周期，在正相位时，对介质分子产生挤压，增加介质原来的密度；负相位时，介质分子稀疏、离散，介质密度减小。也就是说，超声波并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之间产生声波空化作
DNA提取纯化技术概述
质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为核酸克隆和测序最常用的载体。质
超声波提取技术
超声波提取技术超声波是指频率为20千赫～50兆赫左右的机械波，需要能量载体—介质—来进行传播。超声波在传递过程中存在着的正负压强交变周期，在正相位时，对介质分子产生挤压，增加介质原来的密度；负相位时，介质分子稀疏、离散，介质密度减小。也就是说，超声波并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之间
OmegaSE血液DNA提取技术
实验概要OmegaSE血液DNA提取试剂盒说明书(E.Z.N.A. SE Blood DNA Kit)。主要试剂1. 用dd H2O稀释ERLBuffer(10×)。2. 用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D3471-00：加入27 ml dd H2O D34
免疫球蛋白提取技术
实验材料 动物血清初乳胆汁试剂、试剂盒 硫酸铵NH4OHPBSNaH2PO4NaH2PO42H2OBaCl2HgIKIHClNaOHPBDEAE52葡聚糖凝胶G200无水硫酸钠硼酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机透析袋低温冰箱电泳槽电泳仪
核酸提取荡涤时技术条件
核酸提取荡涤时技术条件一、荡涤首先必须要将沉淀悬浮起来；二就是要有一定的时间，特别是当核酸沉淀比较大时(使核酸沉淀zui后蓬松)；三是小量多次；第加减乘除四种是去上清要彻底。 课本中的操作基本上都是“倒掉上清后倒置在吸水纸上一会儿”，这一描写本身没有问题，且非常便捷，但由于他来自海外，天然就
核酸提取荡涤时技术条件
核酸提取荡涤时技术条件一、荡涤首先必须要将沉淀悬浮起来；二就是要有一定的时间，特别是当核酸沉淀比较大时(使核酸沉淀zui后蓬松)；三是小量多次；第加减乘除四种是去上清要彻底。 课本中的操作基本上都是“倒掉上清后倒置在吸水纸上一会儿”，这一描写本身没有问题，且非常便捷，但由于他来自海外，天然就
4－多糖提取技术服务
4 多糖提取技术服务服务简介 多糖分离纯化的核心是获得低分散性、电荷均一的多糖，以适宜后续结构解析和活性功能的深入分析。而天然多糖来源广且化学成分复杂，粗多糖中通常伴随着一些蛋白质、脂肪和色素等物质，不利于多糖的结构鉴定及后续活性分析。样本经研磨粉碎后、热水提取、醇沉、除蛋白、脱色、脱脂等一系列成熟
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于：（1）推知机体的体液免疫功能；（2）诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵提纯为基础，再经过层析柱的方法来提高免
基本操作技术：提取与过滤
当需要以植物药材为原料制剂备浸出制剂时，一般均择适宜的浸出方法和溶媒，将药材中有效成分可有效发提取出来，然后将取液过滤以作进一步处理。一、提取又称浸提。浸提过程一般分为三个阶段：浸润渗透一解吸溶解一扩散及溶剂置换。影响浸提的因素有：药材粉碎度、温度、时间、浓度差（即细胞内外浓度）以及溶媒的PH值等。
超声波提取技术要点
超声波提取技术 要点在工业化超声提取的过程中有几个要点是广大超声提取客户需要注意的地方，如果这些地方注意不到就会影响到收率，作为一个有数年超声提取经验的企业，我感觉应该有责任和义务把超声提取技术的要点告诉大家，以免大家走弯路。1、浸泡时间：浸泡时间对提取效率的影响实际上是药材湿润程度对提取效率的影响
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术 实验方法原理 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相
超声提取技术与其他新兴技术的联用
超声波-微波协同提取新技术将超声与 微波两种作用方式相结合，充分利用超声波振动的空化作用以及微波的高能作用，克服了常规超声波和微波提取之不足，实现了低温常压条件环境下，对固体样品进行快速、高效、可靠的预处理 [2] 。 超声波提取和 生物酶提取工艺结合可以明显降低提取温度，缩短提取时间，节约溶
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
免疫球蛋白提取技术（二）
（12）IgG的纯度鉴定，可采用下列方法之一鉴定。①玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可加样电泳后，只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时，同时可用全血清样品，不同浓度（NH4）2SO4盐析样品进行电泳，以资比较。②琼脂双相双扩散鉴定预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗IgG血清
蛋白质提取与纯化技术
实验概要大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在，需要不同的纯化策略。现在，许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能，这些自然需要将蛋白质分离出来后，进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认，蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的，尽管DNA序列具有异乎
蛋白质提取与纯化技术
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方
蛋白质提取与纯化技术
以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个
免疫球蛋白提取技术（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数