核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四环素Ticarcillin仪器、耗材 电转化仪器PCR(薄壁）试管管壁厚度规则的试管链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 —、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱（SigmaB-2629)蓝色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD-5751)DNA 缓冲液（TEN)10mmoI/LTris-HCl,pH7.910mmol/L 氯化纳0.1mmol/L EDTA乙醇, 用 25% 的 DNA 缓冲液配成......阅读全文
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物，接着用酶处理 PCR 产物，然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤，即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
核糖克隆实验
—、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱（SigmaB-2629)蓝色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四
核糖克隆实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四环素Ticarci
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶
miRNA－－克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达，还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mmol/L
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mm
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达，还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
克隆串联体实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶 仪器、耗材 试剂盒PCR仪 实验步骤 一、在pZero的I位点连接串联体 1.SphI酶切载体，与按大小回收的串联体片段连接；我们推荐在pZero的Sph1位点上克隆串联体，有关于在此载体上克隆的细节我们参考
克隆串联体实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE cDNA标签 连接酶 仪器、耗材 试剂盒
克隆串联体实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶仪器、耗材 试剂盒PCR仪实验步骤 一、在pZero的I位点连接串联体1.SphI酶切载体，与按大小回收的串联体片段连接；我们推荐在pZero的Sph1位点上克隆串联体，有关于在此载体上克隆的细节我们参考了Zero Background 克隆试剂盒
多克隆抗体提取实验
实验材料 血清试剂、试剂盒 DEAE纤维素磷酸盐缓冲液仪器、耗材 烧杯布氏滤斗滤纸实验步骤 1. 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g，置于1 000 ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡
相互作用克隆实验
实验方法原理它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体，如 λgt 11 构建的适当的表达文库。编码诱饵蛋白的基因常用于在中合成重组融合蛋白。重组融合蛋白使用具放射性的 [32P] 作标记。由于 cAMP 依赖蛋白质激酶（蛋白质激酶 A，PKA）的识别位点被引入重组融合蛋白质，从而可通过 PKA
YAC克隆的分析实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 AHCYPD甘油仪器、耗材 培养箱冷冻管实验步骤 1. 用接种棒将含重组载体pYAC的AB1380菌株划线接种在AHC平板上，倒扣平板于30℃培养，直至长出1~3 mm 大小的红色菌落为止。2. 短期保存：用Parafilm膜将平板周围封起来，于4℃可保存4~6周。
克隆载体的准备实验
试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇酚：氯仿-异戊醇（25:24:1)氯化锂 (LiCl10mol L)酚（Tris-饱和）TE 缓冲液乙醇碱性磷酸酶平末端限制性内切酶和反应缓冲液克隆载体仪器、耗材 水浴锅真空干燥机 琼脂糖凝胶电泳设备和试剂实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿-异戊醇（24:1)酚
软琼脂克隆形成实验
原理：细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大，一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形
克隆载体的准备实验
许多载体及其衍生物被开发出来用于克隆 PCR 产物，其中包括典型的 pBluescript 类载体。它们具有多克隆位点和简化的多克隆位点，PCR-Script Direct 质粒也是这样。简化的多克隆位点允许使用者把常用的限制酶位点整合到 PCR 引物中，同时还避免了相同的目标序列同时出现在质粒载体
多克隆抗体纯化实验
实验材料 动物血清样品试剂、试剂盒 正辛酸醋酸缓冲液PBS仪器、耗材 透析袋高速低温离心机实验步骤 一、材料和试剂 1. 正辛酸 2. 60 mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液，PBS 3. 透析袋 4. 高速低温离心机 二、操作步骤 1. 将待提取样品用60 mmol/L，pH4.0醋
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验可以用于：（1）从表达特定融合蛋白质的重组噬菌体构建噬菌体溶源菌；（2）从该溶源菌诱导合成并纯化出融合的目的蛋白质。实验方法原理具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体，在感染于寄主细菌细胞时，前者往往在菌体内增殖并将菌体裂解。实验材料大肠杆菌噬菌体试剂
相互作用克隆实验
相互作用克隆 实验方法原理 它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体，如 λgt 11 构建的适当的表达文库。编码诱饵蛋白的基因常用于在中合成重组融合蛋
相互作用克隆实验
实验方法原理 它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体，如 λgt 11 构建的适当的表达文库。编码诱饵蛋白的基因常用于在中合成重组融合蛋白。重组融合蛋白使用具放射性的 [32P] 作标记。由于 cAMP 依赖蛋白质激酶（蛋白质激酶 A，PKA）的识别位点被引入重组融合蛋白质，从而可通
软琼脂克隆形成实验
实验方法原理 软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞，某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖，不适用此法。某些恶性肿瘤细胞，不仅在贴壁状态下能增殖，在悬浮状态下也能增殖，其在软琼脂中形成克隆的能力反映了其恶性程度。
软琼脂克隆形成实验
原理：细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大，一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形
细菌克隆的溶解实验
试剂、试剂盒 IPTG溶源菌抽提缓冲液氯化钠溶菌酶LB 琼脂平板仪器、耗材 气体恒溫箱液氮Millipore 滤纸水浴摇床牙签或接种环噬菌体λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重组子大肠杆菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试
克隆载体的准备实验
试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇 酚：氯仿-异戊醇（25:24:1) 氯化锂 (LiCl 10mol L) 酚（Tris-饱和） TE 缓冲液
软琼脂克隆形成实验
实验方法原理 软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞，某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖，不适用此法。某些恶性肿瘤细胞，不仅在贴壁状态下能增殖，在悬浮状态下也能增殖，其在软琼脂中形成克隆的能力反映了其恶性程度。
软琼脂克隆形成实验
原理：细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大，一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形
软琼脂克隆形成实验
软琼脂克隆形成实验可用于：（1）细胞分化的基础研究；（2）临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。实验方法原理软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞，某些细胞(如正常成纤维细胞)在悬浮状态下不能增殖，不适用此法。某些恶性肿瘤细胞，不仅在贴壁状态下能增殖，在悬浮状态下也能增殖，其在软琼脂中形成克隆的能力反映