Antpedia LOGO WIKI资讯

四环素作为可诱导基因表达的调控物实验

下面的方案分成 3 个阶段:用 pTet-tTAk 稳定转染成纤维细胞,稳定转染可诱导表达 tTA 的 NIH-3T3 细胞,分析转染细胞中的蛋白表达。稳定转染细胞系表达反式激活因子和靶基因分为两个阶段。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料pSV2-His带有靶基因开放阅读框的 pTet-Splice带有报道基因的 pTet-SpliqeNIH-3T3 细胞pPGKPuro可诱导表达自调控 tTA 的稳定细胞系试剂、试剂盒CaCl2小牛血清氯喹HEPES 缓冲液磷酸缓冲液合适的限制性内切酶胰酶-EDTADMEM 完全培养液选择培养液蛋白样品缓冲液抗体Tris-甘氨酸 SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材塑料克隆环聚丙乙烯管组织培养皿组织培养板沸腾的水浴锅聚偏二氟乙烯膜实验步骤阶段 1:pTet-tTAK 稳定转染成纤维细胞材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。CaCl2......阅读全文

四环素作为可诱导基因表达的调控物实验

            实验材料 pSV2-His 带有靶基因开放阅读框的 pTet-Splice 带有报道基因的 pTet-Spliqe N

瞬时转染真核基因表达调控技术

调节瞬时转染基因的表达l      四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物阶段一:pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞培养和转染细胞1.      在DMEM完全培养液中培

四环素作为可诱导基因表达的调控物实验(二)

21. 当单层细胞再次生长到大约 80% 汇合度,每个细胞克隆收集一部分,在液氮中冻存。余下的细胞进行传代培养,直到数量足够用于测试蛋白的诱导表达。以后使用冻存细胞的时候, 需要复苏,然后在含有 500umol/L L-组氨醇和 0.5ug/ml 四环素-HCl 但不含组氨酸的 DMEM 培养液中培

11种四环素类抗生素的HPLC方法确认

【四环素】四环素类抗生素(Tetracyclines)是由放线菌产生的一类广谱抗生素,包括金霉素(Chlotetracycline)、土霉素(Oxytetracycline)、四环素(Tetracycline)、及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素、二甲胺四环素等,其结构均含并四苯基本骨架;广泛用于多

四环素作为可诱导基因表达的调控物实验(一)

实验材料 pSV2-His带有靶基因开放阅读框的 pTet-Splice带有报道基因的 pTet-SpliqeNIH-3T3 细胞pPGKPuro可诱导表达自调控 tTA 的稳定细胞系试剂、试剂盒 CaCl2小牛血清 氯喹HEPES 缓冲液磷酸缓冲液合适的限制性内切酶胰酶-EDTADMEM 完全培养

四环素酶联免疫分析(ELISA)

四环素酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中四环素残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有四环素偶联抗原,加入四环素标准

液相色谱法测定水产品中抗生素残留

方案优势       快速准确               采用标准       国家相关标准     &nb

抗原标记蛋白复合体纯化实验——条件性表达FLAG标记

实验方法原理有时导入的 FLAG 标记蛋白编码序列在逆转录病毒介导的转基因和药物筛选建立的克隆化细胞系中不表达。这可能是由于外源基因产物没有被调控的或组成型表达所造成的细胞毒性。为了克服这个问题,基于四环素的使用,一个可诱导的哺乳动物表达系统可以用来“打开”或“关闭” FLAG 标记蛋白的表达。在建

四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒说明书

  四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒:   四环素检测试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。四环素检测试剂盒可定性、定量检测,本试剂盒适用于蜂蜜、牛奶、组织(含水产)中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素等四环素类药物的残留检测。   一、概要  

四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒说明书

四环素检测试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。四环素检测试剂盒可定性、定量检测,本试剂盒适用于蜂蜜、牛奶、组织(含水产)中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素等四环素类药物的残留检测。一、概要四环素类药物(Tetracyclines,TCs)是以四并苯为母核

论链球菌表型耐药分析

关键词:链球菌;抗生素;药敏试验;耐药性摘要:链球菌病是主要的人兽共患传染病之一,发病率较高,给养殖业和公共安全带来极大危害,其防治一直是人们关注的焦点,近年来,已产生大量耐药性菌株。以省市为序,总结了自2000年以来链球茵表型耐药的情况,以期对链球菌耐药性的研究以及临床用药有所帮助。  猪链球菌病

揭秘细菌耐药性传播之谜,破解多重耐药菌不是梦!

   感染,曾是造成人类死亡的第一大疾病,是抗生素的发明,让这一曾经意味着死亡的疾病变成了几天就可治愈的"小病"。但正在人们为之欢呼之时,抗生素的耐药性问题不断凸显。在美国,每年至少有23,000人死于耐抗生素感染,作为抗生素滥用大国,中国的情况只会更严峻。今天,具有多重耐药基因

土霉素、金霉素和四环素的检测方法

1、 分析目标化合物:    土霉素,金霉素,四环素 2、 仪器设备:    带荧光检测器的高效液相色谱仪, 3、 试剂:    除下列试剂外,使用附录2所列试剂,    咪唑:特级  &n

土霉素、金霉素和四环素的检测方法

1、 分析目标化合物:土霉素,金霉素,四环素 2、 仪器设备:带荧光检测器的高效液相色谱仪, 3、 试剂:除下列试剂外,使用附录2所列试剂,咪唑:特级咪唑缓冲溶液:将68.08g咪唑、0.37g EDTA 和10.72g乙酸镁溶解在800mL水中,用乙酸调节pH7.2后,加水至1

离子液体[ Bmim] PF6 溶剂浮选分离富集2光度法测定

  离子液体[ Bmim] PF6 溶剂浮选分离富集2光度法测定   环境中痕量四环素类抗生素的研究   王 良1 ,2 , 马春宏1 ,2 , 李华明2 , 闫永胜3 2   (1. 吉林师范大学化学学院,吉林四平136000 ;   2. 江苏大学化学化工学院,江苏镇江212013)

在线样品处理加快兽药残留分析

为了保证食物供应链的安全性和全球健康风险管理的有效性,对食品和农产品中化学物质残留水平进行精确的检测是非常必要的。而化学物质的残留分析要求检测技术具有足够高的灵敏度,能够在污染物的最大检出限(MRL)或最大检出限水平以下从给定样品中检出被污染物并对其进行定量。另外,因为食品安全相关规定日益严格

Science:细菌在接触抗生素时产生抗药性新机制

  大肠杆菌在抑制细胞生长的抗生素存在下也能够合成抗药性蛋白。这是法国研究人员在一项新的研究中报道的研究结果。他们还发现了这种细菌是如何实现这一壮举的:一种保存完好的膜泵将抗生素从细胞中转运出去---只要足够长的时间就可以让细胞有时间接受来自相邻细胞的编码抗药性蛋白的DNA。相关研究结果发表在201

四环素的定向发酵

一、目的和要求   1、通过实验加深对定向发酵的理解。   2、学习利用沉淀或溶媒法提取四环类抗生素的操作技术。 二、原理   金霉素在化学结构上与四环素十分相似,区别仅在C-7位上,以Cl取代了H。所以,金霉素又称为7-氯四环素。金霉素链霉菌是金霉素的产生菌,但当培养基中存在抑氯物质

氨基苷类抗生素

第三十八章  氨基苷类抗生素第一节  氨基苷类抗生素的共性    [抗菌作用] 一、抗菌谱:对多数G-杆菌有强大的抗菌作用;绿脓杆菌、耐青霉素金葡菌对其中某些品种亦敏感;对G-球菌如淋球菌、脑膜炎球菌的作用较差。二、抗菌

畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法

中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法 GB/T 14931.1-94 (高效液相色谱法) Method for determination of oxytetracyline tetracyline and chlortetracycline re

种植体周围炎净化处理对牙种植体钛合金表面粗...(五)

E)光动力学疗法处理表2A–E:Ti合金样品表面局部区域组成的EDS分析数据,其中Kα为X射线测量值,σ为%wt浓度数据的标准偏差:A)对照样品;B)碳酸氢盐喷射抛光样品;C)四环素处理样品;D)超声处理样品;E)光动力学疗法处理样品。粗糙度结果粗糙度分析侧重于以CM获得的Ti合金样品数据,CM可测

编委陈令新:近海环境抗生素测定的样品前处理研究进展

近海环境中抗生素分析样品前处理技术的研究进展  抗生素是指能在低浓度下有选择性地抑制或影响其他生物功能的一类物质, 包括生物产生的和人工合成的。抗生素被誉为20世纪最重要的医学发现之一。在世界范围内, 每年有越来越多的抗生素被人工合成, 而且抗生素的消费使用量也在逐年增加, 预计至2030年畜用抗生

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(二)

6.10  菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1  组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制:

水环境污染物四环素固态纳米孔监控技术研究中取得进展

  近日,中国科学院重庆绿色智能技术研究院精准医疗单分子诊断技术研究中心、环境与健康研究中心和电子科技大学付永琪团队合作在基于固态纳米孔传感的水环境污染物四环素监控技术研究方面取得进展,相关研究成果以Monitoring tetracycline through a solid-state nano

SPE800/HPLC-UV前处理并检测鸡肉猪肉中的土霉素四环

  近来,养殖肉鸡的过程引起了普遍关注,鸡的生长速度和在密集养殖条件如何维持健康是关注的焦点。四环素类药物可用来预防和治疗动物类疾病。但如果长期使用将导致四环素类药物在动物组织中的残留。残留在动物组织中的四环素类药物会影响食用者的健康。欧盟及我国都对动物组织中的四环素类残留量都有严格规定。

高效液相色谱法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残...

高效液相色谱法测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量1.实验目的 据标准GB/T 14931.1-94测定畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量。最低检出浓度为:0.15,0.20,0.65mg/kg。 2.试验原理 样品经提取,微孔滤膜过滤后直接进样,用反相色谱分离,紫外检测器检测,与标

四环素控制系统诱导基因表达实验——pTet-tTAK 稳定转染1

为了克服用别的方法在哺乳动物细胞中诱导基因表达所遇到的困难,四环素调控的基因表达系统被发展出来。这些困难包括多向性的、非特异的作用;或诱导试剂、处理方法对细胞的毒性;高的非诱导表达背景等。本实验所描述的方法是用改造的含有转录激活因子的四环素调控系统,它能在培养的细胞和转基因小鼠(在某种程度上)中表达

药敏试验中抗生素组合及选用

1.肠杆菌科细菌:氨苄西林、哌拉西林(或替卡西林、羧苄西林)、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢他啶、头孢三嗪、头孢噻肟、环丙沙星(或诺氟沙星、氧氟沙星)、庆大霉素(或阿米卡星)、复方新诺明、呋喃妥因、氨曲南。 耐药菌株及产ESBL菌株加做:阿莫西林/CA、氨苄西林/SB、替卡西林/CA、哌拉西林/三唑巴

高耐庆大霉素肠球菌耐药性接合转移试验的方法探讨

  肠球菌是医院感染的重要病原菌 [1] ,对多种抗菌药产生耐药性,而且耐药菌株不断增加,接合转移是导致肠球菌庆大霉素等耐药基因转移、耐药性播散的重要原因,深入研究接合转移试验有助于了解肠球菌耐药性的产生机理。我们研究了不同培养基和不同转移方法对肠球菌质粒转移试验结果的影响,并对接

紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用

紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用 综述了近年来紫外可见分光光度法在抗生素药物分析中的应用,其中包括内酰胺类、氨基糖苷类四环素类、大环内酯类、喹诺酮类抗生素;并展望了该方法今后的发展趋势。  自1940年青霉素应用于临床以来,已发现的抗生素种类达千余种, 临床中常用的亦