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ELISA常见问题及解决方案

一.背景高或者非特异性染色 原因解决方案抗体的非特异性结合更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。未充分清洗酶标板确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步骤之间清洗3~5次,不要增加清洗次数。清洗完成后,将酶标板用力按压在纸巾上,以除去残余的缓冲液。清洗溶液中应添加适量的Tween-20(推荐浓度0.01-0.1%)。缓冲液被污染缓冲液应新鲜配制,一周内使用,并过滤除菌。孵育温度太高整个实验过程应在室温25℃。孵育时间过长缩短孵育时间酶标记物污染了底物或者阳性对照污染了微孔吸取不同的试剂时应更换吸头,并使用不同的贮液器。最好用移液器加入或去除清洗缓冲液(倒入/倒出可能导致交叉污染)。检测抗体或Avidin-HRP的浓度过高检测浓度计算是否正确,或者进一步稀释后再使用。底物在使用前曝光在将底物加入到微孔中以前,应始终避......阅读全文

ELISA

ELISA是一种经典的测定液体样本中蛋白含量的方法。该方法优点在于可以准确定量蛋白含量,且测定样本的种类可以多种多样。本期小编带你一起了解ELISA不同样品的制备方法。细胞培养上清液移取细胞培养基至离心管中,4℃ 下以 1500 rpm 的速度离心 10 分钟。立即分装上清液,并将样品储存在 -80

ELISA

Gangliosides ELISA protocol (Contributed by pingsunjim)This protocol can be used for detection of gangliosides.Specific antibodies to gangliosides are

ELISA

实验概要ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。实验原理ELISA是以

COMPETITION ELISA

The ELISA protocols for detection of the antibody binding to an antigen-coated microtitre plate are standard laboratory techniques and will not be de

ELISA with Platelet

OUTLINE This modification of qualitative ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) is used for either screening detection of anti-platelet antibodie

COMPETITION ELISA

实验概要         The ELISA protocols for detection of the antibody binding to an antigen-coated microtitre plate are standard laboratory techniques

Indirect ELISA

实验概要 In  the indirect ELISA, the enzyme-antibody conjugate uses an antibody  against the type of antibody that is used to detect the antigen, kind of

ELISA: Direct

实验概要The following protocol provides a method of direct ELISA by Peprotech.主要试剂Tween-20 (Sigma Cat. # P-7949) BSA (Sigma Cat. # A-7030)  ABTS Liquid Su

ELISA实验

实验材料 抗原血清试剂、试剂盒 碳酸盐包被缓冲液PBSTBSA仪器、耗材 96孔酶标板4℃冰箱恒温培养箱分光光度计实验步骤 一、包被抗原 1. 用50mM 的碳酸盐包被缓冲液(pH 9.6)溶解抗原,使抗原浓度为10-20 μg/ml,加100 μl/孔到96 孔酶标板,4℃放置过夜。2. 第二天弃

Competitive ELISA

DAY 11. Coat Nunc immuno-module plates overnight, in usual manner.2. Set up competition assay between antibody and competing substance :-Prepare a 1:2