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多肽分析过程中常见问题解读

小分子越来越难做,大分子发展很强势,似乎成为了近年来药物研发市场的重要表现之一,“多肽”类药物正是其中的一大热门。目前多肽药物的质量监管日趋渐严,在这种趋势下,寻找能满足更高分离度,灵敏度的分析方法就显得尤为重要。很多小伙伴在在开发多肽类样品分析方法中总是遇到各种的问题,无比烦恼。这里小编就总结了一些在多肽方法开发中常见的问题分享给各位小伙伴。 1、多肽含量与多肽纯度有什么区别?一条多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质,多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量,不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此一条多肽即使纯度达到99%,因为产品中还包含水份及有机盐分等,它的含量可能也只有70-80%。 2、如何溶解多肽?多数多肽都可以用超纯水溶解,对于一些难溶的多肽,先要分析其氨基酸序列,对于酸性多肽,可先以小量碱性......阅读全文

分析型多肽色谱仪种类

分析型多肽色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:化验室分析型多肽色谱仪和工业分析型多肽色谱仪。2、按分离原理可分:分析型多肽分配色谱仪、分析型多肽离子色谱仪和分析型多肽凝胶色谱仪。3、按作用可分:分析型多肽定量色谱仪和分析型多肽定性色谱仪。4、按进样自动性可分:自动进样分析型多肽色谱仪和手动进样分析

分析型多肽色谱仪种类

分析型多肽色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:化验室分析型多肽色谱仪和工业分析型多肽色谱仪。2、按分离原理可分:分析型多肽分配色谱仪、分析型多肽离子色谱仪和分析型多肽凝胶色谱仪。3、按作用可分:分析型多肽定量色谱仪和分析型多肽定性色谱仪。4、按进样自动性可分:自动进样分析型多肽色谱仪和手动进样分析

多肽物质分离与分析方法研究进展

  摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法,主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。  多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体

蛋白质、多肽提取分离

1 分离方法   采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白

多肽化学合成的基本介绍与发展展望(二)

1.3.2.1.固相合成中常用树脂固相多肽合成中树脂,一般都是聚苯乙烯-二乙烯苯材料,大小在75-150μm,交联度在1-2%之间,现在使用的大多是1%,因为这种交联度下,树脂在DMF,DCM中具有很好的溶胀性能,立体上是一个空间网状结构,反应物分子可以在树脂内部自由移动。树脂中最关键的部分是连接手

多肽物质分离与分析方法研究(二)

1.2 亲和层析(Affinity Chromatography,AC)  AC是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲合性而分离物质的层析方法。自1968年Cuatrecasas提出亲和层析概念以来,在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合,如抗原-抗体、酶-催化底物

蛋白质与多肽提取分离方法-3

1.3.4胶束电动毛细管层析(Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC)MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂,如SDS,使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽,阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之

Supelco推出全新生物分离ES-C18 HPLC柱

  Sigma-Aldrich(R)旗下分析品牌之一,Supelco 近日宣布推出基于全新的160Å熔融核(Fused CoreTM)色谱填料技术的快速、高效Ascentis Express peptide ES-C18 HPLC多肽分析柱。该款色谱柱高效、稳定,并且反相填料的多孔结构和孔径均经最优

利用 UPLC 和 Xevo TQ-S 对血浆中的治疗性多肽进行高灵敏...

利用 UPLC 和 Xevo TQ-S 对血浆中的治疗性多肽进行高灵敏度定量分析Robert S. Plumb 、 Gareth Booth 和 Paul D. Rainville 美国米尔福德马萨诸塞州沃特世公司应用优势 Xevo TQ-S 是一款新型的串联四极杆质谱系统 , 可提供最高灵敏度的多

多肽物质分离与分析方法研究(一)

摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法,主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。    多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物学活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细

CHINA LAB 2011技术研讨会

中国军事医学科学院蛋白质组学国家重点实验室 钱小红教授   来自中国军事医学科学院蛋白质组学国家重点实验室的钱小红教授一直致力于蛋白质组学研究,她的报告题目为《色谱技术在蛋白质研究中的应用进展》。   钱教授首先针对蛋白质组及蛋白质组学的概念作了简单介绍。蛋白质是基因功能的执行体。蛋白质

蛋白质与多肽提取分离方法-1

1 分离方法采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析

反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物

摘要 采用反相高效液相色谱(RPHPLC)与质谱(MS)联用技术对固相法化学合成七肽(H2NPFNSLAICOOH,Mr 760.9)时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性,提出了充分利用吸附和分配双重保留机制的“早期吸附”概念,以此优化色谱条件得到4个峰形良好的色谱峰;

C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱

分析型到制备型一套完整的填料体系,目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种,满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品

七大特点确立 300Å C18的优势应用地位

近年来,随着基因组和蛋白质组计划的实施,对不同蛋白质的快速分析,定性以及定量的需求更大,反相液相色谱以其快速简便,灵敏度高,重复性好,分辨率高等优势受到人们的重视,已成为一种常备的不可缺少的分析手段,并用于多肽药物分离中。反相液相色谱与各种质谱技术的结合也已成为蛋白质结构分析的重要手段和发展方向。C

生物质谱技术在蛋白质组学中的应用

  一、 前言[1,2]   基因工程已令人难以置信的扩展了我们关于有机体DNA序列的认识。但是仍有许多新识别的基因的功能还不知道,也不知道基因产物是如何相互作用从而产生活的有机体的。功能基因组试图通过大规模实验方法来回答这些问题。但由于仅从DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量

“肽”精彩 “2018美国药典多肽药物质量与标准国际论坛”开幕

  2018年4月19日-20日,由美国药典委员会(United States Pharmacopoeia,USP)主办,世易科技协办的“2018美国药典多肽药物质量与标准国际论坛”在浙江省杭州市隆重举行。  大会盛邀全球知名多肽药物研发企业领袖、来自美国食品药品监督管理局(US FDA)和中国食品

多肽质谱仪类型

多肽质谱仪类型有多种。1、按分析目的可分:实验室多肽质谱仪和工业多肽质谱仪。2、按质量分析器的工作状态可分:静态多肽质谱仪和动态多肽质谱仪。3、按分析规模可分:小型多肽质谱仪和大型多肽质谱仪。4、按联用方式可分:多肽液相色谱质谱联用仪、多肽毛细管电泳质谱联用仪和多肽串联质谱仪等。5、按质量分析器的工

Advion推出高性价比质谱“TIDES EXPRESS”

  分析测试百科网讯 近日,Advion公司在佛罗里达ABRF 2016年会上宣布发布一款蛋白质和多肽分析系统,‘TIDES EXPRESS’。该系统结合了Advion公司新型的、简便HPLC系统和紧凑型质谱(CMS)expressionL。新的工作平台提升了化学家在多肽合成过程

质谱介绍

质谱分析本是一种物理方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿(F.W.Aston,

质谱技术及其应用

21世纪的最前沿科学之一,随着人类第一张基因序列草图的完成和发展,生命科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学,即蛋白质组学时代。正如基因草图的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样,后基因组研究也将会借助于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。本文拟简述生物质谱技术及其在生命科学领域研究中的应用。1

2018年中国质谱大会分会场——质谱新方法新技术

  分析测试百科网讯 2018年11月24日-26日,以“中国质谱新时代”为主题的2018年中国质谱学术大会在广州盛大召开(相关报道:2018年中国质谱大会羊城开幕 2000人共庆中国质谱新时代)。在精彩的大会报告后(相关报道:2018年中国质谱会大咖秀 聚焦质谱新应用),会议也安排了多个分会场报告

蛋白质与多肽提取分离方法-2

 1.1.7 灌注层析(Perfusion Chromatography,PC)PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法,固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多,适合于不同分子量

MALDl-MS实验_改进方法

实验方法原理MALDI离子化过程本身存在一个问题即离子化过程中动能有微小的分散。由单个激光脉冲产生的离子的动能的微小差别削弱了 MALDI-MS 的分辨力。多肽的质量分辨率(m/Δm) 通常为 40-800 FWHM (峰高一半处的峰宽),蛋白质的质量分辨率通常为 50-400 FWHM, 这样的质

质谱分析及其应用

质谱分析本是一种物理方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿(F.W.Aston,

第三届全国生物质谱学术交流会圆满闭幕

中国科学院化学研究所 汪福意研究员   来自中国科学院化学研究所的汪福意研究员带来了题为《老药新说:抗肿瘤药物顺铂与血清白蛋白的结合位点》的研究报告。汪老师所在研究组发展和建立了一种基于MS/MS的Bottom-up蛋白质组学质谱分析方法,研究了临床上使用最为广泛的金属抗肿瘤药物顺铂与血清

用蛋白质组学方法绘制磷酸化位点图谱

方案1 用带有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 纯化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后对磷酸化多肽进行碱性磷酸酶处理 方案3 结合固定化金属离子亲和介质和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法对磷酸化多肽进行特征分析实验 方

蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南(三)

蛋白质纯化RP-HPLC 是一种有效的蛋白质/多肽纯化工具。通过 RP-HPLC 法可以从杂质中分离目标蛋白/多肽,采集到的片段可用于进一步研究,以及借助正交分析技术的分析,甚至可作为治疗药物。在蛋白质/多肽分析过程中,色谱条件优化的目标是优化分辨率和保留时间。制备色谱法分离蛋白质/多肽时,色谱条件

共话色谱与精准分析 2018北京色谱年会隆重召开

  分析测试百科网讯 2018年12月7日,2018年北京色谱年会在京隆重举行,本次年会由北京理化分析测试技术学会、北京色谱学会主办。本次会议旨在促进北京地区色谱技术的应用与交流,了解色谱技术的发展趋势,会议共有300余人出席,分析测试百科网作为支持媒体为您带来全程报道。会议现场北京大学 刘虎威教授

多肽小常识

多肽的基本常识保存:  大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽