大肠杆菌杂交
一、实验原理Lederberg和Tatum（1946）选用典型的大肠杆菌为材料，筛选营养缺陷型。利用双重和三重缺陷型的菌株，在简单的合成培养基上混合培养，在此培养基上只有重组子能长，亲本不能长，即所谓选择性培养，使细菌杂交获得成功。图12-1说明了细菌的基因重组是不同基因型的细菌经接触，接合后随之发生交换和杂种细菌分离的过程。大肠杆菌的杂交试验中发现有些菌株经混合培养能得到重组子，有些却不能。1952年Hayes做了一个实验，他所用的二个菌株是菌株A和菌株B。菌株A是不能合成甲硫氨酸和生物素；菌株B是苏氨酸、亮氨酸和维生素B1的三重缺陷型。Hayes首先筛选链霉素抗性突变型ASr和BSr，然后在不含链霉素的基本培养基上进行正反杂交，结果没有不同，但在含链霉素的基本培养基上进行正反杂交，结果却不一样，在ASs×BSr杂交中能得到重组子，可是ASr×BSs杂交中却并不出现重组菌落。这一现象说明大肠杆菌中有不同的“性”，它与致育因子F......阅读全文
大肠杆菌杂交
一、实验原理Lederberg和Tatum（1946）选用典型的大肠杆菌为材料，筛选营养缺陷型。利用双重和三重缺陷型的菌株，在简单的合成培养基上混合培养，在此培养基上只有重组子能长，亲本不能长，即所谓选择性培养，使细菌杂交获得成功。图12-1说明了细菌的基因重组是不同基因型的细菌经接触，接合后随之发
大肠杆菌杂交及基因定位
一、原理 大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株（Hfr）的染色体上整合有F因子，当Hfr细菌与F－细菌细胞发生接合（即杂交）时Hfr细胞（供体菌）的染色体从Hfr细胞向F－细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性，并且可以随时中断，因此根据结合后F－细菌（以重组子形式选出）中
大肠杆菌杂交及基因定位实验
一、原理大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株（Hfr）的染色体上整合有F因子，当Hfr细菌与F－细菌细胞发生接合（即杂交）时Hfr细胞（供体菌）的染色体从Hfr细胞向F－细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性，并且可以随时中断，因此根据结合后F－细菌（以重组子形式选出）中Hfr细菌染色体基因出现
大肠杆菌
大肠细菌(E. coli)为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称病致病大肠杆菌。一、生物学性状(一)形态与染色大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有动力。有
大肠杆菌素或能杀死大肠杆菌本身
近日，英国诺丁汉大学生物分子科学中心研究人员表示，他们发现了对付大肠杆菌菌株的新线索。研究人员指明了如何使“细菌素”——能够杀死其他细菌菌株的物质——进入细菌细胞进而杀死它，以及如何让大肠杆菌产生的大肠杆菌素A有针对性地到另一个细胞蛋白(TolA)中创建一个新的“特洛伊木马”武器，并最终从内部杀
Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别
区别：研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA，而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段
Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别
区别：研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA，而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段
Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别
区别：研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA，而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段
体细胞杂交的杂交实验
不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合，所产生的杂种细胞，即异核体经过培养可再生新壁，分裂形成愈伤组织，进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞，故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组，因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究
杂交育种的杂交类型介绍
品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交（种内杂交）品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交（属内杂交）同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交” 。同一属或同一科不同属的不
southern杂交与northern杂交的区别
研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。
southern杂交与northern杂交的区别
研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。
分子杂交技术Northern杂交的简介
Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝
杂交育种的杂交方式介绍
单杂交即两个品种间的杂交（单交）用甲×乙表示，其杂种后代称为单交种，由于简单易行、经济，所以生产上应用最广，一般主要是利用杂种第一代。复合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时，往往采用复合杂交，其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体，才可
细胞杂交
实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH
细胞杂交
在悬浮或单层培养细胞体系中融合细胞，用 PEG 处理细胞的时间应很短，以减少细胞的死亡。通常，在使用选择性培养基前，需给细胞 24 h 的恢复期。实验材料PEG试剂、试剂盒完全培养基无血清培养基NaOH仪器、耗材皮氏培养皿通用容器实验步骤PEG 1000 ( Merck)：(a) 髙压处理PEG，将
隔离杂交
将父、母本按一定行比种植在隔离区内，并将母本雄穗全部拔去，使其自由授粉，这种人工杂交方式，称为隔离杂交。选择自交系用来杂交的两个自交系，应该是经过测交，证实其第一子代的杂种优势明显，属于优良杂交组合。玉米自交系可向当地生产部门购买。播种父、母本在一块地里按2行母本1行父本的行比相间种植，其四周至少5
Southen杂交
Southern杂交One important thing for transfer:the weight of the object resting on top of the blotting apparatus should not exceed the weight equal to a 5
Northern杂交
Northern杂交1．在10~20 ml 预杂交液中68℃温育膜2h。2．若使用双链探针，在100℃下加热32P标记的双链DNA 5 min，使之变性，然后迅速移至冰水中冷却。3．把变性的或单链放射性标记的探针直接加到预杂交液中，在合适的温度下继续温育12~16h。4．杂交后，将膜从塑料袋中取出，
Northern杂交
实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育，而后广泛洗
Northern杂交
转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育，而后广泛洗膜以去除非特异结合的探针，
细胞杂交
实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH
Southern杂交
实验概要本实验介绍了Southern杂交的基本流程。主要试剂细菌基因组DNA抽提试剂盒，限制性内切酶，变性溶液，中和溶液，10 X SSC，杂交缓冲液(200mM磷酸钠缓冲液，PH7.2，1 mM EDTA，50%甲酞胺，1% BSA，7% SDS)，随机引物标记试剂盒，洗脱缓冲液(2 X SSC，
Western－杂交
Western 杂交（主要内容如下）Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa
Northern杂交
实验概要本实验介绍了Northern杂交的基本流程。主要试剂液氮，TRIzol (Invitrogen)，DEPC水，氯仿，异丙醇，70%酒精，酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)，水饱和酚(PH4.3)，无水乙醇，NaOAc，抽提缓冲液(0.02M NaOAc，1 mM EDTA，0.5% SD
Northern杂交
实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的
Southern杂交
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。 (3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性
分子杂交
一、杂交通过碱基对之间非共价键（主要是氢键）的形成即出现稳定的双链区，这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的
Western杂交
实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮，提取缓冲液(1 x PBS，10ug/mL Leupeptin，1 mM PMSF，5 mMBenzamidine. 2mM EDTA)，转移缓冲液(39mM Glycine，48mM Tris，0.037% SDS，20%甲醇)，
Western杂交
实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮，提取缓冲液(1 x PBS，10ug/mL Leupeptin，1 mM PMSF，5 mMBenzamidine. 2mM EDTA)，转移缓冲液(39mM Glycine，48mM Tris，0.037% SDS，20%甲醇)，