细胞技术专题：大鼠肝星状细胞培养实验
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC，通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HBSS 台盼兰 仪器、耗材手术器械 尼龙网 相差显微镜 荧光显微镜 实验步骤一、实验步骤 1. 大鼠腹腔麻醉后在超净台上剖腹，进行门静脉插管。 2. 以D-Hanks’液灌注，同时剪开下腔静脉，冲掉血液后，改灌以100 ml 酶消化液I(0.05% IV 型胶原酶)。 3. 待肝脏变软后，离体肝脏并剪碎，继续以酶消化液II(含20U/ml DNase I 的0.05% IV 型胶原酶)消化15 min，尼龙网过滤后以450 g 离心5 min(4℃，下同)。 4. 以HBSS 重悬沉淀至10 m......阅读全文
细胞技术专题：大鼠肝星状细胞培养实验
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC，通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。
细胞技术专题：大鼠肝星状细胞原代培养实验
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠
大鼠肝星状细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。
大鼠肝星状细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。
细胞技术专题：大鼠星型胶质细胞培养实验
大鼠星型胶质细胞培养可以：（1）用于神经系统发育、分化及再生等基础研究；（2）脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究；（3）脑损伤和脑疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。 实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B
细胞技术专题：大鼠视神经少突胶质细胞培养实验（二）
2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性，未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富，互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染，异质细胞较少，90%以上为阳性细胞(图 4)。 Figure 1 Cells migrated from opti
细胞技术专题：大鼠视神经少突胶质细胞培养实验（一）
标签： 大鼠 视神经 少突 胶质 大鼠视神经少突胶质细胞培养可以：（1）获得大鼠视神经少突胶质细胞；（2）用于视神经损伤修复研究；（3）用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法牛血清培养法 实验方法原理采用视神经，DMEM/F12条件培养基培养，观察细胞形态及生长，并进行免疫组织化学鉴定。 实验材料W
细胞技术专题：大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验
大鼠大脑皮层神经元细胞培养可以：（1）获得大鼠大脑皮层神经元细胞；（2）用于神经元细胞定向分化研究；（3）用于神经元细胞凋亡研究。实验方法机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d，微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元，依划割程度不同分为轻、中、重
大鼠肝星状细胞原代培养实验_胰酶消化法
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM酶消化液
常用原代动物细胞培养：肝星状细胞培养材料和方法
材料 相差显微镜，荧光显微镜，手术器械，雄性SD大鼠，体重250-450 g，戊巴比妥钠，200目尼龙网，小牛血清（或胎牛血清，则更好），DMEM，胰酶消化液（以HBSS配），Nycodenz（以GBSS配），D- Hanks'（KCl 0.4 g/L，KH2PO4 0.06 g
细胞技术专题：小鼠腹腔巨噬细胞培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞培可以：（1）吞噬与清除异物；（2）分泌生物活性物质；（3）对仿生全降解材料，降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2 培养箱中孵育后，荧光显微镜下计数吞噬
肝星状细胞的简介
肝星状细胞是ECM的主要来源， HSC激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC)，各种致纤维化因素均把HSC作为最终靶细胞。肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC)，各种致纤维化因素均把HSC作为最终靶细胞，正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时，肝星状细胞被
大鼠胰岛细胞培养实验
实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉，采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛，并分离、培养胰岛单细胞。实验材料 一周龄Wistar 大鼠 试剂、试剂盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型胶原酶 葡萄糖 碘乙酸 仪器、耗材 手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞可用于：（1）实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料；（2）糖尿病新药的细胞筛选模型。实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉，采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛，并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料一周龄Wistar 大鼠试剂、试剂盒D-Hanks’液
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉，采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛，并分离、培养胰岛单
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉，采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛，并分离、培养胰岛单
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（一）
兔膀胱平滑肌细胞培养可以：（1）分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞；（2）进行细胞学鉴定研究；（3）用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题：人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以：（1）获得人脐动脉平滑肌细胞；（2）作为重大动脉疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养，并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（二）
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长，正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利，传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代，经第8
细胞技术专题：兔膀胱平滑肌细胞培养实验（三）
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层，是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间，见消化液混浊、组织块呈絮状，或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
肝星状细胞的性质及功能
HSC位于Disse间隙内，紧贴着肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cells,SEC）和肝细胞。其形态不规则，胞体呈圆形或不规则形，常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。此外，HSC还伸出胞突与肝细胞、邻近的星状细胞相接触。HSC胞质内有1～14个直径约1.0～2.0μm的
细胞技术专题：细胞传代实验
根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代
肝星状细胞的生物学特征
正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时，肝星状细胞被激活，其表型由静止型转变 为激活型。肝星状细胞位于肝窦周Disse 腔内，约占肝脏所有细胞的13%。在规HE染色的肝组织切片中，不能显示星状细胞，但可用免疫组织化学将其定位，并可将其分离进行体外细胞培养。正常情况下肝
细胞技术专题：细胞生长曲线实验
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部
细胞技术专题：原代胚胎成纤维细胞培养
实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞（MEF）生长培养基：高糖DMEM
大鼠星型胶质细胞培养实验
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后，作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定，应用缺
大鼠星型胶质细胞培养实验
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后，作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定，应用缺