血清替代品:XerumFreeXF205培养基添加物使用说明(四)

细胞的继代--吸取细胞培养基,用DPBS(无Ca++/Mg++)洗细胞一次。--用足够体积的AccutaseTM溶液浸没细胞层并在37℃孵育5min。如必要可通过轻轻地拍打细胞培养器皿的侧面分散细胞。--加入完全培养基稀释细胞消化溶液(至少加两倍体积的AccutaseTM)--转移细胞悬浮液到离心管中,然后以300×g离心5min--弃上清然后在完全培养基中通过轻轻地吸吐重悬细胞--细胞计数--以2000个细胞/cm2的密度接种细胞悬浮液到一个新的包被的培养板中或即用型SynthemaxTM培养皿中(参看上面“培养器皿表面的包被”)--在37℃,5% CO2的湿润孵育器中孵育细胞--当细胞融合达到近70%时尽快地进行继代培养,一般情况下每周继代两次。2.3 原代培养原代细胞培养物存在于刚刚从活的组织或器官分离而来的生长的细胞。这些细胞代表着细胞培养世界的核心:到目前为止所有的细胞系都起始于原代培养。除了产生新的细胞系,原代培养代......阅读全文

血清替代品:XerumFree-XF205培养基添加物使用说明(四)

细胞的继代--吸取细胞培养基,用DPBS(无Ca++/Mg++)洗细胞一次。--用足够体积的AccutaseTM溶液浸没细胞层并在37℃孵育5min。如必要可通过轻轻地拍打细胞培养器皿的侧面分散细胞。--加入完全培养基稀释细胞消化溶液(至少加两倍体积的AccutaseTM)--转移细胞悬浮液到离心管

血清替代品:XerumFree-XF205培养基添加物使用说明(二)

实验步骤A) 用足够的细胞贴壁因子包被细胞培养容器表面。--一些商用的包被试剂如PronectinTM F, MapTRIXTM或同等的其它产品--纤连蛋白或多聚赖氨酸或其它--少量FBS(如对于T25烧瓶添加500ul) 37℃孵育过夜,随后用新鲜培养基或PBS洗两遍。--利于细胞贴壁的一种即用型

血清替代品:XerumFree-XF205培养基添加物使用说明(三)

重点注意事项:--XerumFreeTM不含任何的生长因子,因此也不含有bFGF和胰岛素。培养干细胞时我们建议添加bFGF或胰岛素或IGF。--XerumFreeTM不含硒,培养干细胞时我们建议用含有硒的培养基。2.2.2  hESCs 和hiPSCs的无饲养层培养按照上面的包被步骤在含有2-3%的

血清替代品:XerumFree-XF205培养基添加物使用说明(一)

以下翻译仅供参考!最终使用者请参看英文原文说明书。 使细胞能在无血清环境中生长确保无动物成分且经过GMP认证的细胞培养添加物细胞的无血清培养具有一定的挑战性。这篇文章的目的是指导终端使用者平稳过渡到无血清环境中,且避免所有不足的或不恰当的努力。理想的过渡到无血清环境下应该经历几个阶段,逐渐地筛选使细

ITS和ITSE等无血清培养基添加物在细胞体外培养的应用

我们知道,细胞体外培养时需要在培养基中加入血清,以维持细胞的生长和存活。血清,尤其是牛血清,因成分复杂、批间差大和存在病原体污染的可能性等原因广为人们所诟病,而无血清培养基添加物却日益受到科研和生物制药用户的青睐。BioGems(PeproTech旗下品牌)为您提供多种无血清培养基添加物 (见下

无血清培养基

   细胞培养(cell culture)就是从机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。体外细胞培养最常见的是合成培养基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清进行培养;但是大量使用牛血清制品有许多缺陷,如,动物源成分,无法用于临床研究;成

无血清培养基

细胞培养(cell culture)就是从机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。体外细胞培养最常见的是合成培养基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清进行培养;但是大量使用牛血清制品有许多缺陷,如,动物源成分,无法用于临床研究;成分复杂

无血清培养基

    无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗生...

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗生...

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

MSC无血清培养基与血清培养基有何区别?

在描述产品区别之前,先简单描述下间充质干细胞无血清培养基。间充质干细胞无血清培养基是怎么开发出来的?研发人员根据近几十年来,中国及国外的科研人员在间充质干细胞研究方面取得的一些成果,比如什么样的物质可以很好的促进干细胞生长,什么样的物质可以抑制间充质干细胞的分化,什么样的物质有更好的贴壁效果等等。在

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...4

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...3

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

无血清培养基简介

  无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物

培养基血清浓度问题

问:在1640里加血清时加多了,90ml里加了20ml Gibco新西兰血清10091148,约为18%,以前都是加10ml的,查了网上多建议用10%-15%,有关系吗? 答:我认为一般来说血清浓度的较大波动对细胞的状态影响较大,建议再加90ml1640调成10%。血清浓度大当然细胞状态感觉要好,但

血清培养基如何灭菌

1、未加血清的培养基叫做"基础培养基",先把基础培养基灭菌,凉至45-50度(可以放在水浴锅内,温度可以按培养基的说明掌握),备用。2、你所加的血清要保证是无菌的,如果你是直接购买成品血清那一般不会有问题,如果是自己找来的血清需要滤过除菌,或者采血及分离血清全程严格的无菌操作,不过这些操作都太麻烦了

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好?

很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1. 产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分,组分很复杂,有 150 多种已知组分组分,多种未知组分。这些组分中,有些对细胞生长是有利的,有些对细胞生长是无作用的,有些对细胞生长反而是有害的。另外,不同的牛,由于其体

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好?

很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1. 产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分,组分很复杂,有150多种已知组分组分,多种未知组分。这些组分中,有些对细胞生长是有利的,有些对细胞生长是无作用的,有些对细胞生长反而是有害的。另外,不同的牛,由于其体质不

液体培养基的保存与使用以及培养基中常见添加物的作用

培养基的保存与使用液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?要冷藏!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的PH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月至一年。注意:液体培养基应于4℃冰箱避光保存,实验

无血清细胞培养基与血清细胞培养基优缺点比较

   无血清细胞培养基     优点:更利于细胞生长,性能更加一致 ,容易进行纯化和下游加工,细胞功能的评估,增强生长和/或产量 ,生理反应性的较好对照 ,增强细胞内中介物的检测 ,可以消除来自血清的不均一性,可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害,增加确定性;在培养基中添

细胞培养基血清模式

  血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的,因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养,如MEM培养基,较为常用的量为5%~10%的比例,而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右,细胞的形态和功能不受影响。

无血清培养基的概述

  无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。  无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。 用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘

简介天然培养基血清作用

  1. 提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。  2. 提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。  3. 提供结合蛋白

血清培养基主要问题

  1. 血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。  2. 血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受

无血清技术及其培养基

经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。 无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们

无血清培养基基本配方

1、基本适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞 葡萄糖          0.6%  谷氨酰胺         2mM  NaHCO3           3mM  Hepes            5mM  胰岛素      2.5mg/ml  转铁蛋白    100ng/ml  孕 酮      

血清和培养基的种类

1、问:细胞培养的胎牛血清用哪个公司的产品比较好呢?周围有人用PAA或Hyclone的,这两种跟Gibco或sigma出品的差别大吗? 答:如果是长得非常快得细胞如pa317,293,c6等恶性肿瘤细胞,一般得国产血清就可以,如果是原代培养的细胞,最好应用胎牛血清或类标准胎牛血清,Hyclone公司

细胞转染无血清培养基

  转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。  物理介导方法:电穿孔法、显微注射和基因枪;  化学介导方法:如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;  生物介导方法:有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。  理想细胞转染方法,应该具有转染效