肿瘤细胞的培养（二）
二、培养方法 肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1．取材： 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避免用退变组织，要挑选活力较好的部位。癌性转移淋巴结或胸腹水是好的培养材料。取材后宜尽快进行培养，如因故不能立即培养，可贮存于4℃中，但不宜栽过24小时。 2．培养基： 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低，正常细胞培养不加血清不能生长，肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大，是因肿瘤细胞有自泌（Autocrine）性产生促生长物质之故。但这并不说明肿瘤细胞完全不......阅读全文
肿瘤细胞培养
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正
肿瘤细胞培养
食管癌细胞株表达MMP－2：1.细胞种类：食管癌细胞株；2.培养的天数：2d;细胞倍增时间--24h左右；3.放大倍速：倒置荧光显微镜，100倍；4.培养基种类：1640+10%胎牛血清；5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长；6.图片目的：鉴定食管癌细胞表达MMP-2，胞浆中绿色荧光为MMP-2，细
肿瘤细胞的培养（一）
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体
肿瘤细胞的培养（二）
二、培养方法 肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1．取材： 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏
肿瘤细胞的培养（四）
四、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率措施 根据人们的经验，肿瘤细胞在体外不易培养，建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。当肿瘤组织或细胞初代接种培养后，常出现以下几种情况： 完全无细胞游出或移动； 有细胞移动和游出，但无细胞增殖，细胞长时间处于停滞状态以致难以传代； 有细胞增殖，传若干代后停止生长或衰退死亡
肿瘤细胞的培养（三）
三、成纤维细胞排除法 1．机械刮除法： 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝）、或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为： （1）标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位； （2）刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸
肿瘤细胞培养实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1. 机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝），或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为（1）标记镜下
肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1、取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于：（1）研究肿瘤的发生机理；（2）研究生物学行为；（3）研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
肿瘤细胞的培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1．取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避
培养肿瘤细胞用什么培养基
肿瘤细胞最好培养了，M199，RPMI-1640，DMEM都可以。我常用的是1640.
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
肿瘤细胞培养技术要点
取材材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。成纤维细胞排除在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
结肠直肠肿瘤细胞的培养
通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验方法原理通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验材料用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒生长培养液洗液消
肿瘤细胞原代培养实验
实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验材料 用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒 生长培养液洗液消化液仪器、耗材 培养瓶实验步骤 一、酶消化1. 用洗液（洗液：添加 5% FBS、200 U/ml 青霉素
细胞生物基本方法：肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除（成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长，致难以纯化肿瘤组织）。有以下一些方法：1．机械刮除法2．反复帖壁法3．消化排除法4．胶原酶消化法 1） 机械刮除法1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养2
2．培养基： 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低，正常细胞培养不加血清不能生长，肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大，是因肿瘤细胞有自泌（Aut
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养3
5．其它方法：有人发现聚丙烯酰胺有抑制成纤维细胞生长的作用；也有人用聚蔗糖制备成比重1.025～1.085的密度梯度离心液，加入细胞悬液后，在 23℃中800g离心 10分种。在比重1.025～1.050层为成纤维细胞，在比重1.050～1.085层为上皮细胞，再经过分离进行培养。最近也有人
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养1
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤
肿瘤细胞的原代培养方法
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培养基，血清浓度不高，10%即可，建议最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。培养方法很多，主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。1.组织块法将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织
细胞技术专题：肿瘤细胞原代培养实验
肿瘤细胞原代培养可以：（1）研究癌变机理；（2）研究抗癌药检测；（3）研究癌分子生物学；（4）用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清
肿瘤细胞原代培养实验——脱落细胞法
实验方法原理脱落细胞法是指采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒完全培养基洗涤液仪器、耗材刀片培养箱培养皿实验步骤一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后，用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来，脱落细胞经洗涤后
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选...
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞， W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而，神经胶质瘤研究的结果表明，在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是
原代肿瘤细胞选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验
实验方法原理在指数生长中期，用丝裂霉素C处理饲养层细胞，将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞，或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞，然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上（图24.1）。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆，而
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选
实验方法原理 在指数生长中期，用丝裂霉素C处理饲养层细胞，将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞，或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞，然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上（图24.1）。上皮性肿瘤细胞可以在3