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大鼠神经元细胞分离培养实验_解离神经元培养物的制备

实验材料母鼠试剂、试剂盒BSS仪器、耗材无菌器械显微镜实验步骤1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。3. 从头颅骨上取下脑,放在 35 mm 培养皿中的 BSS 液滴上,培养皿中半装满 Paraplast(Sigma)。4. 在显微镜下剥离脑膜,取下海马体,放在装有 BSS 的 35 mm 培养皿中。5. 海马体在新鲜配制的 0.25% 胰酶 BSS 溶液中 37℃ 孵育 15 分钟。6. 小心吸掉胰酶溶液,加入 5 ml BSS,层流柜中室温放置 5 分钟。重复此步两次或更多次,最后加入 2 ml BSS。7. 首先用普通巴斯德吸管分离细胞,然后换用一支用火烧平尖端、内径缩小一半的吸管。8. 计数细胞,确定细胞密度。9. 所需数目的细胞悬浮于接种培养基中......阅读全文

原代细胞培养在药物测试的使用与注意事项

长期以来,科学家多依赖永生化的细胞系来进行各种研究,但在过去十年,随着细胞生物学的发展,细胞培养领域发生了巨大变化,新型的技术和培养试剂让使用原代细胞作为研究对象成为可能。相比于细胞系,原代细胞更多保留了体内原始组织的生物学特征,如生长和衰老,因此通过原代细胞可建立更好的细胞疾病模型。 原

免疫酶细胞化学实验技术-3

一、对照实验  1.吸收实验  应用尚无文献报告的抗血清/自己制备的抗血清进行ICC染色时,需用相应的抗原吸收抗血清后,再孵育标本,判断结果的可信性(结果应为阴性)。常用的吸收实验分固相吸收和液相吸收两种(见本书第一章 ),对于不能形成沉淀,难以用离心沉降法分离的一些小分子多肽类抗原,以固相吸收为佳