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大鼠神经元细胞分离和培养实验_培养神经元支持物制备

试剂、试剂盒浓硝酸仪器、耗材玻璃盖玻片层流柜实验步骤一、盖玻片的预处理1. 玻璃盖玻片放在瓷染色架上,用蒸馏水冲洗。2. 架子放在玻璃容器中,浓硝酸泡 48 小时。3. MilliQ 水漂洗盖玻片 1 小时,重复 3 次。4. 200℃ 烤 8 小时灭菌盖玻片。5. 在层流柜中将盖玻片放在 60 mm 培养皿,外边缘放两粒(1~2 mm 高)融化的无菌 Paraplast。颗粒的大小决定了盖玻片和培养皿单层神经胶质细胞间的分离程度。6. 加入 5 ml 过滤除菌的溶于硼酸缓冲液(0.1 mol/L,pH 8.5)的 1 mg/ml poly-L-lysine 溶液,室温过夜。7. 无菌 MilliQ 水漂洗 1 小时。重复 3 次。8. 吸出漂洗液,加 5 ml 接种培养基(MEM 加 10% 马血清),接种分离神经元之前放在 CO2 温箱中 37℃ 孵育至少 24 小时。二、单层神经胶质细胞的制备1. 去掉 1~3 ......阅读全文

原代细胞培养在药物测试的使用与注意事项

长期以来,科学家多依赖永生化的细胞系来进行各种研究,但在过去十年,随着细胞生物学的发展,细胞培养领域发生了巨大变化,新型的技术和培养试剂让使用原代细胞作为研究对象成为可能。相比于细胞系,原代细胞更多保留了体内原始组织的生物学特征,如生长和衰老,因此通过原代细胞可建立更好的细胞疾病模型。 原

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

基本方案             实验方法原理 利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

实验方法原理利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生长方式、细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的混合胶质细胞中分离少突胶质前休细胞,然后再利用差速贴壁的原理用塑料培养皿或培养瓶除去纯化后污染的星形胶质细胞以获得高纯度的少突胶质细胞,并在体外诱导分化

小小干细胞如何在生物医学“兴风作浪”

干细胞研究是在上世纪90年代后期开始热起来的。自上世纪80年代中期以来,发育生物学家一直都在实验室使用人类胚胎癌(EC)细胞,但是对小鼠胚胎干细胞(ESCs)和胚胎生殖细胞的研究,已经让研究人员看到了希望:他们能够制备来自人类的多能干细胞,而不会有EC细胞的异常基因组。在新的千年之前,一些研究人员正