发布时间:2011-01-19 15:16 原文链接: ABSCIEX成功参加首届亚太国际生物分析最新进展研讨会

  2011年1月11日晚,首届亚太国际生物分析最新进展研讨会举办前夕,ABSCIEX公司在上海浦东淳大万丽酒店,举办了别开生面的会前酒会及报告演讲。来自亚太地区生物分析领域的100余位专家们出席了酒会。这些专家大部分来自跨国药企、CRO公司、和国内知名的研究机构,以及日本、韩国、印度、马拉西亚等国家的研究者。

  与国外生物分析相关的酒会形式非常接近, AB SCIEX公司为大家准备了各式茶点、美酒。大家三五成群地聊天,很快便相互熟识,热情交谈起来。到场嘉宾们在这种欢快的氛围中轻松地度过了一个半小时的时间。

酒会现场

酒会现场

  AB SCIEX公司亚太地区市场经理Matthew Grigg博士作为此次酒会的主持人,对大家的到来表示热烈欢迎并祝愿首届亚太国际生物分析最新进展研讨会胜利召开。

AB SCIEX公司亚太地区市场经理Matthew Grigg博士

  接下来,到场嘉宾仔细聆听了AB SCIEX公司为大家安排的两个演讲报告。

 

  用于生物医药的LC-MS定量分析方法

葛兰素史克公司(GSK)副总裁Eric Yang博士,题目:LC-MS for the Quantitative Bioanalysis of Biopharmaceuticals

  首先来自葛兰素史克公司(GSK)副总裁Eric Yang博士作为特约演讲嘉宾,为大家带来《用于生物医药的LC-MS定量分析方法》的报告。

  为什么要将LC-MS/MS用于蛋白质定量呢?Eric Yang博士给出了以下回答:LC-MS/MS可以缩短先导药物开发的时间,提高实验效率;LC-MS/MS开发配体结合测定新方法,无需使用特定的配体结合试剂;可用于代谢产物的定量分析。

  Eric Yang博士接下来列举了运用LC-MS/MS对GSK1995057、GSK716155、GSK933776三种药物进行定量分析的研究实例。GSK1995057是一种抗体治疗药物(分子量13 kDa),GSK716155(Syncria)是一种融合蛋白药物,GSK933776(ant-beta amyloid)是单抗体药物。

  GSK1995057定量分析研究中,由于在没有特殊抗体结合情况下,传统的ELISA方法很难在血浆中检测到低含量的GSK1995057,并且抗体内源性物质将带来高背景干扰。将高灵敏度、高选择性的LC/MS/MS方法用于检测猴子血浆中GSK1995057,当吸入轻微剂量,质量下限≤1ng/ml(76 pM);而用ELISA方法质量下限为0.35ng/ml;加上利用96孔板,整个LC/MS/MS方法便可以实现自动化,通量高(每3分钟分析一个样品)。试验针对分子量13050的治疗用dAb,选择了分子量13076的内标蛋白,监测[M+2H]2+ - y2离子的通道。样品采自大猴血浆(0.3 mL),用固相萃取后干燥和重组,然后进行还原/烷基化/酶解,最后用LC-MS/MS分析,最后获得线性范围为1 ~ 500 ng/mL,精密度达到要求。同时LC-MS/MS实验还和ELISA做了对比实验。

  Syncria(GSK开发的2型糖尿病治疗新药)在人类血清白蛋白(HSA)中含量可达到90%以上,人类血清蛋白内源性物质同样为检测带来高背景干扰。Eric Yang博士在实验中不仅用到ELISA方法还用到LC/MS/MS方法,药代动力学研究数据显示,LC/MS/MS方法测得的Syncria最大浓度值与ELISA方法结果相同,但是在消除相中浓度却高出了ELISA方法测定值。Eric Yang博士怀疑是有代谢产物产生了。

  GSK933776实验中,从CDR肽结合区(Fc区)寻找到一种独特的肽作为替代肽段进行LC/MS/MS定量分析,得到了满意的结果。

  报告最后,Eric Yang博士总结说,LC/MS/MS是对蛋白质治疗分子定量分析的有效手段,是分析生物制药化合物的有力工具;LC/MS/MS用于比较免疫在药代动力学研究中可提供更多的信息。随着LC/MS/MS定量生物分析方法开发,也应该对其加以规范,期望将来LC/MS/MS能同时完成药代动力学和药效学的测量。

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   AB SCIEX公司Qtrap 5500系统的MRM3定量分析定量分析

AB SCIEX公司Johnny Cardenas博士

  来自AB SCIEX公司的Johnny Cardenas博士带来的报告题目为《AB SCIEX公司Qtrap 5500系统的MRM3定量分析》。

  Johnny Cardenas博士首先提出了MRM3定量分析的概念。所谓MRM3扫描方式就是通过Qtrap 5500质谱系统与液相色谱相配合,在Q1选择一个前体离子,在Q2中将该离子进行碎裂,与MRM扫描方式不同在于MRM3扫描方式是将所有的碎片离子聚集在线性加速离子阱中,之后,在离子阱中以高达10K或20KDa/Sec的速度扫描特定的二代碎片离子,从而获得MRM3谱图。

  用MRM3扫描进行定量分析的Qtrap 5500质谱系统,在Qtrap 4000质谱系统基础上之上具有更高灵敏度、更佳碎片离子、超快的扫描速度以及MRM3扫描周期时间短等特点,这些远比一级MRM扫描更具有优势。

  那么,什么时候需要使用MRM3扫描方式呢? Johnny Cardenas博士给出的答案是:(1)MRM扫描背景噪音较高,或谱图中有干扰峰存在;(2)通过更换流动相、优化液相色谱条件、选择不同的MRM离子对、选择不同的离子化方式等这些简单方法无法消除背景噪音;(3)与背景噪音相比,没有特定的MRM子离子可用,在遇到上述这些干扰和困难时,MRM3就是一种有效的定量策略。

  紧接着,Johnny Cardenas博士具体例举了通过MRM3扫描方式定量检测血浆中多肽药物Exenatide、OATP2B1多肽药物和血浆中前列腺特异性抗原(PSA)这三个例子。Exenatide在临床上用于治疗II型糖尿病,分子量为4186.6Da。通过选择MRM和MRM3这两种定量扫描方式进行比较,得出血浆样品中的背景干扰影响了MRM的选择性,定量下限(LOQ)大概是100ng/mL,而采用MRM3扫描方式完全消除了干扰物,LOQ提高了20倍以上。

  前列腺特异性抗原(PSA)是临床诊断前列腺癌的主要指标,在临床上通常采用ELISA的方法进行检测,而采用MRM3得到了满意的结果。接下来,Johnny Cardenas博士将MRM3扫描与MRM扫描作了简单对比,谱图结果显示,MRM3扫描具备更佳的灵敏度以及将MRM3用于临床生物标志物定量分析结果与传统的ELISA方法具有良好的相关性。

  Johnny Cardenas博士最后为报告作了简要的总结:当MRM扫描背景噪音较高,或谱图中有干扰峰存在时, MRM3扫描定量分析是一种非常有效的手段;样品量少情况下,MRM3扫描定量下限低;MRM3扫描可被用于小分子、多肽、生物标志物蛋白的检测与定量。MRM3是Qtrap质谱系统独有的扫描模式,线性离子阱的改进,使MRM3扫描成为Qtrap 5500 系统功能强大、十分有效的定量分析手段。

  总而言之Qtrap 5500是目前市场上具有最高性能的四极杆-线性阱杂交质谱系统。

  本网收录产品

QTRAP5500 四极杆-线性阱杂交质谱仪

3200 Qtrap 四极杆-线性阱杂交质谱仪

4000 Qtrap四极杆-线性阱杂交质谱仪

 

  抽奖活动

抽奖活动

颁发奖品,左为获奖客户,右为AB Sciex公司新上任的中国区业务总经理 刘文玉 先生

  报告结束之后,AB SCIEX公司还组织进行了抽奖活动,Matthew Grigg博士现场抽取了三位幸运嘉宾,AB Sciex公司新上任的中国区业务总经理 刘文玉 先生为每位嘉宾颁发了精美奖品,活动现场十分热闹。

       此次会议形式新颖,几乎没有提供任何可坐的地方,但是正是在这个无处可坐的厅堂里,来自世界各地的同行们可以自由交谈,随意组合,使气氛格外热烈。报告不多,短小精悍,给在场每位嘉宾都留下了深刻的印象。

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