IC离子色谱柱的衍生化主要是为了提高目的物的可检测性。对于气相色谱,主要是为了增强目的物的挥发性或改善目的物的极性。对于液相色谱,主要是为了提高检测器对目的物的响应。
色谱柱衍生化分柱前衍生和柱后衍生:
柱前衍生在分析物经过色谱柱前与衍生剂反应,反应产物在色谱柱上实现分离,实际分离的是衍生产物,检测的也是衍生产物。
柱后衍生在分析物在色谱柱中实现分离后,在衍生池内与衍生剂反应,检测的是衍生产物。
适用的化合物为生物酸、生物碱、胺类、抗生素和氨基酸类等。
衍生化要求:
1.衍生剂必须过量且稳定。衍生剂不过量,反应不完全,检测不充分。衍生剂不稳定,重现性差。
2.衍生剂、衍生产物和衍生副产物容易分离。只能检测到衍生产物。
3.衍生反应快速、完全。
柱前衍生相对自由地选择反应条件,不存在反应动力学的限制,衍生副产物可进行预处理,容易允许多步反应的进行,有较多的衍生剂可选择,不需要复杂的仪器设备。但形成的衍生副产物可能对色谱分离造成较大困难。衍生化过程中,容易引入杂质,或损失样品。
柱后衍生的重现性好,影响因素少,引入物质比较少。分析物可以在其原有的形式下进行分离,容易选用已有的分析方法。缺点是对于一定的溶剂和有限的反应时间来说,目前只有有限的反应可供选择,可能有扩散问题。需要额外的仪器设备。
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