卫生部近日汇总公布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单》,上海月旭公司从公布的黑名单中统计发现,包括三聚氰胺、苏丹红、孔雀石绿、人工合成色素等都在内。针对这些令人触目惊心的食品添加剂,同时也为食品安全检查和监管工作提供有力的技术支持和保障,上海月旭公司迅速组织相关人员研制出了方便、快速、准确的检测方法,现将LC-MS/MS检测水产品中孔雀石绿和隐形孔雀石绿的方法公布如下:
1. 适用范围
适用于水产品(鱼、蟹、虾、甲鱼等)中孔雀石绿和隐形孔雀石绿的检测。
2. 提取
称取相当于原始样品5 g样品(精确至0.01g)制备好的试样,置于50mL塑料具塞离心管中,加入10µL 1μg/mL的混合内标标准溶液,依次加入1 mL 0.25 g/mL盐酸羟胺溶液、2 mL 1.0 mol/mL对甲苯磺酸溶液、2 mL 0.1 mol/L pH=4.5乙酸铵缓冲溶液,摇匀后,加入30mL乙腈,剧烈振摇2min,离心5 min(4000r/min)。将上清液转移到250mL分液漏斗中,用30mL乙腈重复提取残渣一次,合并上清液。于分液漏斗中加入50mL二氯甲烷,30 mL水,振摇2分钟,静置分层,收集下层有机层于250mL旋蒸瓶中。45 ℃旋转蒸发近干。
在旋蒸残渣中加入5mL 乙腈,漩涡振荡器,溶解残渣,待净化。
3. 净化
活化/平衡:将Welchrom® PRS 500mg/3mL (P/N:WSS46PR0305)安装在固相萃取装置上,上端连接Welchrom® Alumina-N 1g/6mL(P/N:WSAN010610),用5 mL乙腈活化小柱,流出液弃去;
上样:将上述待净化液加入柱中,流出液弃去;
淋洗:用5 mL乙腈淋洗小柱后,弃去中性 Welchrom® Alumina-N小柱,然后将PRS抽干;
洗脱:5 mL乙酸乙酯:甲醇:氨水(50:45:5)混合溶液洗脱,收集洗脱液
40℃氮气吹干,1 mL流动相溶解,0.22μm针孔滤膜过滤后,待分析;
4. 色谱质谱条件
4.1 色谱条件
色谱柱: Xtimate C18 液相色谱柱(2.1mm*50 mm, 3 μm)
流动相:
A: 0.1%甲酸+2 mM乙酸铵水溶液
B:乙腈
梯度洗脱
流速: 0.4 mL/min
进样量: 10 μL
柱温: 40°C
运行时间:12 min
4.2 质谱条件
扫描模式:MRM
离子源:ESI+
毛细管电离电压:3000v
干燥气温度:350 ℃
干燥气流速:11 L/min
雾化器压力:50 psi
名称 |
母离子 |
子离子 |
碎裂电压(Fragment)
|
驻留时间 (ms) |
碰撞能量 (V) |
定量离 子对 |
定性离 子对 |
孔雀石绿(MG) |
329.2 |
313.1 |
140 |
30 |
40 |
+ |
- |
208.1 |
140 |
30 |
38 |
- |
+ |
||
隐性孔雀石绿(LMG) |
331.2 |
316.1 |
140 |
30 |
20 |
+ |
- |
239.1 |
140 |
30 |
36 |
- |
+ |
||
MG-D5 |
334.2 |
334.2 |
140 |
30 |
318.2 |
- |
- |
LMG-D6 |
337.3 |
337.2 |
140 |
30 |
322.2 |
- |
- |
5. 结果
5.1 回收率和重现性实验
将猪肌肉空白样品经过液液萃取初步处理后,分别添加一定量的标准溶液,添加浓度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验,共3个批次(样品典型回收率色谱图见附图)。
添加水平(μg/kg) |
||||||
分析物 |
0.5 |
2 |
10 |
|||
Recovery (%) | RSD (%) | Recovery (%) | RSD (%) | Recovery (%) | RSD (%) | |
孔雀石绿 |
110.8 |
7.53 |
98.1 |
6.56 |
96.1 |
4.71 |
隐性孔雀石绿 |
95.3 |
7.43 |
103.5 |
3.42 |
97.4 |
4.55 |
图1 鳕鱼中添加0.1 mg/kg 盐酸克伦特罗EIC谱图 图2 鳕鱼中添加0.1 mg/kg 莱克多巴胺EIC谱图
本方法中使用到得耗材:
1. 固相萃取小柱 Welchrom® PRS 500mg/3mL (P/N: WSS46PR0305);Welchrom® Alumina-N 1g/6mL(P/N:WSAN010610)
2. 色谱柱:Xtimate C18, 2.1*50 mm,3μm(P/N:Xt3B18205)
3. 13mm,孔径0.22μm尼龙针孔滤膜(P/N: WEL-SFNY213022)
4. 12孔固相萃取装置(WEL-Vac-12)
据悉,2023年12月,杭州谱育科技发展有限公司(以下简称“谱育科技”)青山湖创新基地迎来了第1000套7000系列ICP-MS、第500套5200系列LC-MS/MS正式下线。这标志着,中国高端质谱......
近日,海关总署发布公告2023年第165号(关于进口斯里兰卡野生水产品检验检疫要求的公告)。根据中国法律法规和中华人民共和国海关总署与斯里兰卡民主社会主义共和国渔业部有关斯里兰卡输华野生水产品的检验检......
海关总署10月18日发布的数据显示,9月份,中国从日本进口的水产品已“归零”。在海关总署今天刚刚发布的中国进出口统计月报中,9月份中国自部分国家(地区)进口商品类章金额表中,中国从日本进口的“鱼及其他......
16日,俄罗斯动植物检验检疫局发布公告,俄方已决定自10月16日起对从日本进口鱼类等水产品实施限制。报道说,俄罗斯动植物检验检疫局称,“作为预防措施,自2023年10月16日起,俄罗斯动植物检验检疫局......
翻开任意一本质谱理论书,很多人会被艰深的数学公式吓退;而且市场上的液质联用种类繁多,让人眼花缭乱。因此本文力图不用任何公式,让大家能够快速了解液质联用中所用的质谱原理。由于质谱可以应用在各个领域,因此......
近日,上海中医药大学附属曙光医院发布了招标公告,计划采购液相色谱质谱联用仪、流式细胞仪/细胞分析仪、蛋白质测定仪、活体成像系统等。详情如下:项目编号:0811-224DSITC2381项目名称:可移动......
近日,海关总署发布公告称多种进口水产品检出阳性。1、冻鳀鱼干检出阳性4月2日,海关总署官网发布消息称,因从进口自越南1批次冻鳀鱼干的1个内包装样本中检出新冠病毒核酸阳性,按照海关总署公告2020年第1......
药品的杂质含量是衡量药物质量的重要指标,也是药品质量研究中一项极为关键的内容。药物中的杂质含量低、来源广、结构多与主成分类似,必须选择合适的分析技术进行研究。LC-MS联用技术结合了色谱的高分离能力和......
起因食品安全事关国计民生。近年来,三聚氰胺事件、苏丹红事件、瘦肉精事件、地沟油事件等食品安全问题频发,严重影响了我国食品业的发展。有专家认为,我国农产品、食品生产企业数量多、规模小而分散,法治和自律意......
导读孔雀石绿(MG)作为一种染料的广泛应用引起了人们的广泛关注。蜡样芽孢杆菌能对抗MG的毒性作用,并能有效地对MG进行脱色。然而,基于蛋白质组学数据的关于其潜在适应和降解机制的详细信息却很少。本研究采......