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谷氨酸棒杆菌是一个重要的氨基酸生产菌株，其氨基酸产量每年超过400万吨，近年来被广泛用于生产各种天然和非天然产物，预计到2020年其发酵产品市值可达204亿美元。传统的工业菌株主要依赖长期的理化诱变及筛选获得，基因组水平实现快速、高效的理性编辑依然是谷氨酸棒杆菌代谢工程改造的难点。质粒提供模板的基因编辑及Cas9的突变分析CRISPR/Cas9和RecT介导的ssDNA重组编辑 近日，中国科学院天津工业生物技术研究所系统与合成生物技术研究团队开发了谷氨酸棒杆菌的CRISPR/Cas9基因组编辑工具。该研究通过重构Cas9和gRNA的表达盒，解决了Cas9毒性和gRNA自身转录终止子无法终止的问题，在谷氨酸棒杆菌中实现了基于CRISPR/Cas9的高效反向筛选；采用共转化Cas9和gRNA表达质粒避免了cas9基因的高频突变，成功实现质粒提供模板的高效基因编辑，敲除和插入效率分别高达60%和62.5%，可简化操作并节省时间。......阅读全文
谷氨酸棒杆菌是一个重要的氨基酸生产菌株，其氨基酸产量每年超过400万吨，近年来被广泛用于生产各种天然和非天然产物，预计到2020年其发酵产品市值可达204亿美元。传统的工业菌株主要依赖长期的理化诱变及筛选获得，基因组水平实现快速、高效的理性编辑依然是谷氨酸棒杆菌代谢工程改造的难点。 近日，中国
CRISPR/Cas9系统极大丰富了原核生物的基因组编辑方法。但由于CRISPR/Cas9系统高效的致死筛选能力和原核生物普遍的低同源重组效率，多靶点和自动化的基因组编辑仍难以实现，严重限制了菌株的遗传改造效率。 近日，中国科学院天津工业生物技术研究所研究员郑平带领的系统与合成生物技术团队、研