关于湿法、干法上样

湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等。。。但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的,一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现,是因为硅胶对样品的吸附饱和,而样品本身又是比较好的固体才会发生,这就应该先重结晶,得到大部分的产品后再柱分,如果不能重结晶那就不管它了,直接过就是了,样品随着淋洗剂流动会溶解的。有些样品溶解性差,能溶解的溶剂又不能上柱(比如,DMF,DMSO 等,会随着溶剂一起走,显色是一个很长的脱尾),这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是 1:1,我觉得是越少越好,但是要保证在旋干后,不能看到明显的固体颗粒(那说明有的样品没有吸附在硅胶上)。......阅读全文

镍柱上的咪唑

为什么咪唑可以把镍柱上的组氨酸蛋白洗脱下来?(1) 发布时间:2018-11-09 蛋白纯化 分子筛。 随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易。但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的

镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗

ni柱中的氯化镍可以与有his(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗

ni柱中的氯化镍可以与有his(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太

镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗

财大气粗到只用一次的话,就不用去除了。如果和我做学生时一样,一定要去除哦。先用纯化buffer,再用无菌水,再用20%乙醇。

装柱时如何确定上样液的浓度与上样量

上样量根据树脂饱和吸附量换算,上样液的浓度当然是自己算了

柱色谱法的上样方式对比

干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层

液相色谱法术语概念柱上检测

柱上检测(on- column detection)利用高灵敏检测技术,对毛细管柱中固定相末端的流出组分直接进行检测,以减少毛细管柱与检测器之间的柱外效应。

柱色谱法的上样方法分析

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴

柱上开关操作和维护注意事项

  柱上隔离开关是一种特殊开关,它主要是使用在电线杆上保障用电安全的一类安全开关,一般来说,柱上开关都是安装在电杆上,它的主要作用就是用于隔离电路的高压,是一种典型的户外隔离开关。    柱上开关的用处其实是非常大的,当开关是合闸状态的时候,它能够对运输电路上的相关工作电流和短路电流进行承载工作,

液相色谱法术语概念柱上富集

柱上富集(on-column enrichment)试样通过色谱柱时,使痕量组分在色谱柱上逐渐地增加的一种分离技术。

柱层析的装柱和上样方法

装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂

柱色谱法的上样方法介绍

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴

影响样品在色谱柱上凝结速度的因素

一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法,一般来说初始温度越低的话,分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右,温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例,意味着越厚的膜厚,膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定

影响样品在色谱柱上凝结速度的因素

一、色谱柱柱温的初始温度1.基本是zui容易也是zui快做到的方法,一般来说初始温度越低的话,分析物凝结的越好2.初始温度如果设在比zui快出峰分析物的沸点低50℃左右,温度保持的时间基本就是非分流的保持时间二、色谱柱“固定相比例”越低的固定相比例,意味着越厚的膜厚,膜越厚样品和溶剂越容易溶解在固定

柱色谱法的上样方法的介绍

  上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶

毛细管液相色谱柱的柱上筛板的原位热聚合制备

摘 要: 利用有机聚合物的原位聚合反应, 在0132 mm内径的弹性石英毛细管内制备了3 mm长的柱上筛板,该筛板可以耐受至少40MPa的压力。将5μm C18填料填充到带有筛板的毛细管内, 制备了毛细管液相色谱柱, 色谱分离结果令人满意。用该筛板制备的色谱柱结构最大程度地避免了柱后死体积的产生。 

硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列

硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列ε0ⅠⅡⅢ0.00戊烷戊烷戊烷0.0542%氯化异丙烷—戊烷3%二氯甲烷—戊烷4%苯—戊烷0.1010%氯化异丙烷—戊烷7%二氯甲烷—戊烷11%苯—戊烷0.1521%氯化异丙烷—戊烷14%二氯甲烷—戊烷26%苯—戊烷0.204%乙醚—戊烷26%二氯甲烷—戊烷4%乙酸

色谱柱配柱时在担体上涂渍固定液采用的常规方法

一般配常用的色谱柱,大都采用“常规”涂渍法,其简要操作为:取所需量的固定液,用适量(能浸过担体)的溶剂溶解,将担体缓缓倒入其中,随到随搅,而后用红外灯照射(或用水浴蒸发)以赶走溶剂,则固定液就附着于担体上了。

Waters在Pittcon上推出全新的量热仪和色谱柱

  分析测试百科网讯 今天,Waters在刚召开的Pittcon2016上推出了新的差示扫描量热分析仪。除此之外,Waters公司还介绍了其新产品CORTECS®色谱柱并强调了GlycoWorks™ RapiFluor-MS™ N-糖试剂盒为行业节约了近四年的工作量。  “创新一直以来都是

层析柱上柱子后压力大怎么办

19是什么单位?MPa?先试试空白运行,就是不经过柱子光走系统,看看压力是多少,检查是否系统压力过大。如果系统压力正常,则检查溶液是否澄清,有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题,检查柱头是否堵塞,柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整,有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上,参照说明书清洗再

在ASMS上推出净化磷酸肽的离心柱

  一种可替代C18树脂的更有效的净化磷酸肽的离心柱 在ASMS 2010上被推出   赛默飞世尔科技在ASMS 2010上推出了一种可代替C18树脂,更有效地净化磷酸肽的离心柱。   ROCKFORD, Ill(2010年5月24日)——服务科学全球领先的赛默飞世尔科技,今天推出了T

层析柱上柱子后压力大怎么办

19是什么单位?MPa?先试试空白运行,就是不经过柱子光走系统,看看压力是多少,检查是否系统压力过大。如果系统压力正常,则检查溶液是否澄清,有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题,检查柱头是否堵塞,柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整,有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上,参照说明书清洗再

干湿上样法对柱色谱分析效果的影响

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴

气相色谱柱在固相上的物理化学常数

气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。广泛应用于石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面。它除了可以用来定量跟定性分析以外,还可测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分

气相色谱柱在固相上的物理化学常数

气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各组成分进行分析检测的仪器。广泛应用于石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面。它除了可以用来定量跟定性分析以外,还可测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分

配柱时在担体上涂渍固定液采用的常规方法

一般配常用的色谱柱,大都采用“常规”涂渍法。其简要操作为:取所需量的固定液,用适量(能浸过担体)的溶剂溶解,将担体缓缓倒入其中,随到随搅,而后用红外灯照射(或用水浴蒸发)以赶走溶剂,则固定液就附着于担体上了。

蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来,怎么办

疏水层析目的蛋白结合太紧,一般需要降低疏水作用,可以考虑降低结合时中性盐的浓度。使用疏水力较弱的层析填料,比如丁基疏水、辛基疏水的填料。 洗脱时可以用蒸馏水直接洗脱,如果还是那以洗脱的话可以尝试添加低浓度乙醇

固相萃取柱上衍生气相色谱_质谱法测定水中烷基酚

摘 要 以烷基酚(APs)主要降解产物辛基酚(42t2OP) 、壬基酚(42n2NP)为研究对象,建立了固相萃取( SPE)柱上衍生化、气相色谱2质谱(GC2MS)法测定水中APs的分析方法。以C18柱为固相萃取柱、N, O2(三甲基硅)三氟乙酰胺(BSTFA)为硅烷化试剂,设计五因素四水平正交实验

正己烷和正辛烷在非极性气相色谱柱上,哪个先流出

正己烷先出。非极性气相色谱柱出峰先后顺序甲醇、乙醇、异丁醇、正丁醇、正己烷、正辛烷。气相色谱柱可用于定量和定性分析,能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。

液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。    在检测