流式细胞仪实验方法
一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板 五、红细胞1．网织红细胞2．PNH3．胎儿红细胞 六、肿瘤学1．DNA 细胞周期2．蛋白3．多药耐药4．微小残留白血病 *部分 标本处理 一、流式细胞术常规检测时的样品制备 （一）直接免疫荧光标记法 取一定量细胞（约1X106细胞／ml），在每一管中分别加入50μl的HAB，并充分混匀，于室温中静置1分钟以上（）,再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反......阅读全文
流式细胞仪实验方法
一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板 五、红细胞1．网织红细胞2．PNH3．胎儿红
流式细胞仪实验方法（二）
第二部分 细胞因子 细胞内细胞因子的流式细胞仪检测 一、简介随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制
流式细胞仪实验方法（一）
一、实验准备1． 标本制备：2． 最小化非特异性结合：二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板五、红细胞1．网织红细胞2．PNH3．胎儿红细胞六、肿瘤学
流式细胞仪实验方法-1
流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板 五、红细胞1．网织红细胞2．
流式细胞仪实验方法（三）
四、所需试剂1、细胞表面染色的荧光标记的单抗试剂依据实验需要选择特殊表面标志CD45圈定所有淋巴细胞CD3 圈定T淋巴细胞CD4 圈定T辅助淋巴细胞亚群CD8 圈定T抑制淋巴细胞亚群CD19/或CD20圈定B淋巴细胞CD56圈定NK淋巴细胞CD14圈定单核细胞2、荧光标记的细胞因子抗体：R&D提供F
流式细胞仪实验方法-2
六、流式检测细胞染色基本过程（以全血为例）1、 收获细胞：肝素钠抗凝的静脉血，按1：1与培养基混匀，加刺激剂，同时加蛋白转运抑制剂（参照说明书）， 混匀后，37℃，5%二氧化碳培养4-6小时2、 阻断Fc受体：用于消除非特异性的结合染色① 在小鼠，可使用纯化的FcII/III受体的
流式细胞仪实验安全
生物学操作技术最重要的就是安全问题，在操作流程中有诸多环节存在各种安全隐患，需要谨慎操作。 （1）电安全问题：偏振板，激光供电等都是高电压，需要特别小心。仪器内部只能由厂家人员及相关工作人员才可操作，实验人员不得冒险操作。 （2）激光安全问题：流式细胞术的激光有相应的cover保护，不得打开
流式细胞仪分选方法
流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节．获得较稳定的分选设定值；在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴，确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置；分选结束后，计数单个细胞存在的细胞孔数；分选细胞培养7d后．记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量。结果5个细胞形成的
流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪检测技术可应用于：（1）分离和鉴定细胞群及亚群；（2）分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量；（3）分析细胞内抗原物质。实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验
流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪检测技术可应用于：（1）分离和鉴定细胞群及亚群；（2）分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量；（3）分析细胞内抗原物质。实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验