细胞培养技术3
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白为淡黄色粉末，虽易潮解结块，但不影响使用。 不同批号和牌号质量有差异。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物，含有丰富的氨基酸。开始时它是专为猴肾细胞培养设计的，而实际上它对许多细胞系(株)，如Hela细胞和原代细胞都是一种优良培养基。使用时用Hanks液配制成0．5％溶液(酸性)，一般与合成培养基按1：1比例混合使用。◇鼠尾胶原 胶原是细胞生长的良好基质，它能促进组织和细胞的附着，改善生长表面特性。胶原来源有大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛的真皮和牛眼的水晶体等，实验室常用大鼠尾制胶原。鼠尾胶原为粘度较大的半透明液体，难以滤过除菌，应无菌操作制备胶原。鼠尾胶原的制备方法①0．1％醋酸溶液，10磅10分钟高压灭菌备用。②250克体重大白鼠尾一条，置75％酒精中浸泡1小时。③鼠尾置平皿中切成1．5厘米左右的小段，剥去毛皮，抽出尾腱。④剪碎尾腱浸泡在150毫升醋酸液中，置于4℃冰箱内，间断振摇48小时。⑤......阅读全文
细胞培养技术的分类
动物细胞培养在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
细胞培养基本技术
实验概要无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失
细胞培养的基本技术
一、清洗新采用和重新使用的培养器皿，都要严格清洗，以防各种有害物质对培养细胞损害。培养用的塑料器皿目前主要依靠进口，均已无菌密封包装，可直接使用。对于塑料瓶盖或胶塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自来水中浸泡和蒸馏水漂洗2～3次，晾干备用。细胞培养中的绝大部分器皿系玻璃制品，清洗
肿瘤细胞培养技术要点
取材材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。成纤维细胞排除在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过
细胞培养的概念及细胞培养的技术特点
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的
为什么要使用－3D－细胞培养？
二维细胞培养对我们对细胞生物学的理解做出了很大的贡献，但是能从中获取的信息量还是有限制性的。科学家虽然对过去 100 年的传统细胞培养技术很满意，但是这不再具有必要性。 组织培养，根据定义，尽量模拟体内环境，并且很显然，活着的生物体是三维的，而不是二维的。因此，为了建立模拟体内生物学模型，体外培养系
3D细胞培养和分析实验流程
利用合适的细胞培养试剂和技术，可以很容易地培养出3D球状体。球状体的完整实验流程包括：细胞培养、荧光染色和成像分析。赛默飞可以提供3D细胞培养的完整解决方案，包括InvitrogenTM和Thermo ScientificTM细胞培养系统、试剂、仪器和分析软件。
3D细胞培养：了解你的酶标仪
一直以来，传统的2D细胞培养广泛用于细胞生物学研究和药物开发，为研究细胞通路提供了方便的体外模型。然而，细胞在平面上生长，这与天然环境并不相同，也导致细胞行为有明显差异。形态、增殖、基因表达、代谢和活力发生显著变化，这会影响细胞对药物的反应。因此，许多临床前研究认为2D细胞培养技术是不够的，它意味着
细胞培养用液的配制与消毒3
九 . 肝素溶液的配制： 含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高，肝素加入全培养液中最终浓度为 50ug/ml 。因为现在市售的多为肝素钠，包装为约为 0.56 克 / 瓶，配制时，可将其溶于 100ml 三蒸水中，定容，过夜，然后过滤除菌，分装小瓶，保存温度为 ℃ 。使用时，向 100ml 培养液
细胞培养板的选择和使用问答3
我要用人纤连蛋白包被培养板养细胞，请问自己如何包被，有无其他方法可替代？以10μg/μl的纤连蛋白(Fibronectin)于4℃包被培养板过夜，接种细胞就可以了。我用罗氏的Fibronectin 1mg/瓶，说明书推荐：配成50ug/ml，包被用量5ug/平方厘米。室温下包被40分钟，然后吸掉多余
2013技术展望之细胞培养
原乍一看，细胞培养经过这么多年的发展，似乎不会在明年有什么大的改进。毕竟大部分培养细胞的方法都已成熟。但是，与其他领域一样，研究需求将大大推动细胞培养技术的发展。在未来的一年里，我们也许会看到干细胞、单细胞培养的方法有重大发展。 单细胞脱颖而出 许多基因组和转录组研究也指出
固定细胞培养的技术方法
中文名称固定细胞培养英文名称fixed cell culture定 义将植物悬浮细胞包埋在多糖或多聚化合物（如聚乙烯）制成的网状支持物中进行无菌培养的技术。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
细胞传代实验——细胞培养技术
细胞传代实验可用于：（1）医学研究；（2）提供细胞种。（3）进行细胞生物学研究。实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。实验材料细胞试剂、
单细胞培养技术的概念
单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞，在无菌条件下，进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早，但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现的。
关于细胞培养技术的简介
细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中细胞不再形成组织（动物）。 培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中，由于环境的改变，细胞的移动或受一些其他因素的影响，培养时间加长，传代导致细胞出现单一化型。
细胞培养技术注意事项
实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将
三维细胞培养技术
三维细胞培养以常见支架三维培养模型为主，该模型能更好地模拟细胞在体的生长自然环境。定义三维细胞培养技术 ( three-dimensionalcell culture, TDCC ) 是指将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养, 使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长
原代细胞培养之——取材技术
细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化，经大量扩增
293细胞培养(cell－culture)技术
1、293细胞明显适应酸性环境,pH值在6.9～7.1时,可顺利贴壁生长, 换液时动作要轻。一般用高糖的DMEM培养基。2、传代：倒去废液，PBS洗一次（轻），用0.02%EDTA与0.25%Trypsin消化，生长良好细胞，培养瓶中轻摇,使之流遍所有细胞表面,即将其吸除或弃去消化30s，然后吸去，
原代细胞培养之——培养技术
原代细胞的培养也叫初代培养 是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养，是建立细胞系的第一步，是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开，生物学特性未发生很大变化，仍保留原来的遗传特性，也最接近和反映体内生长特性，适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞往往有多种细胞组成，比较混杂，即使
如何通过2D细胞培养工作流程进行3D细胞培养？
细胞培养是药物研发、组织工程、毒理学测试、干细胞研究以及基础研究中的重要工具。在临床前的药物研发过程中，单层细胞培养仍然占主导地位。然而，2D培养只能在有限程度上模拟组织生理条件，而体内细胞实际上是在三维网络中相互作用 的。因此，2D培养产生的结果往往在预测临床有效性和毒性方面作用有限，导致药物研发
新型3D细胞培养带来瘫痪新疗法
近期，澳大利亚格里菲斯大学的研究人员，开辟了一条新途径，可促进修复瘫痪脊髓的治疗方法。延伸阅读：PNAS：新型神经细胞培养基克服传统障碍。 这项研究发表在十月十四日的Nature子刊《Scientific Reports》，提出了一种新的3D细胞培养技术，在三维空间培养细胞，而没有基质或支架的
新型3D细胞培养带来瘫痪新疗法
近期，澳大利亚格里菲斯大学的研究人员，开辟了一条新途径，可促进修复瘫痪脊髓的治疗方法。延伸阅读：PNAS：新型神经细胞培养基克服传统障碍。 这项研究发表在十月十四日的Nature子刊《Scientific Reports》，提出了一种新的3D细胞培养技术，在三维空间培养细胞，而没有基质或支架的
3D细胞培养与类器官的联系
类器官（Organoids）是一种在体外环境下培养而成的具备三维结构的微器官，具有类似于真实器官的复杂结构，并可以部分模拟来源（干细胞、肿瘤组织、病人来源等）组织或器官的生理功能。截至目前已有10多种不同组织、疾病模型及模拟发育的类器官问世。类器官作为一项重大的技术突破，已被公认为生物科学领域研究的
RFLP技术和RAPD技术3
一个较为详细的遗传连锁图谱不仅对该物种的遗传学基础研究有重要意义，同时对该物种的育种研究也很有帮助。Potlethwait和Stephen 等用RAPD技术进行斑马鱼遗传连锁图谱的制作。Liu把RAPD技术应用到鲶鱼基因图谱研究中。孙效文等建立了鲤鱼的遗传连锁图谱。图谱有RAPD分子标记56个，
细胞化学技术3
三、放射自显影技术放射自显影（radioautography）是利用放射性核素（同位素）的射线作用于感光材料的卤化银晶体，产生潜影，然后通过显影过程把“像”显示出来，以研究用放射性核素标记的物质在生物体内的定位和定量的一种技术。放射自显影技术有光镜和电镜两个层次。光镜放射自显影研究同位素标记物在组织
cDNA合成技术3
2. 电泳分析(1) 用50mM NaCl， 1mM EDTA制备1.4%的碱性琼脂糖电泳， 并置碱性电泳缓冲液中30分钟。(2) 取样品液， 用TE调整体积， 使第一链和第二链产率测定液的体积相同，加入等体积的2×样品缓冲液(20mmol/L NaOH， 20%甘油，0.025%溴粉兰）。(3)
胚胎干细胞培养技术大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURE Routine Culturing of ES Cells ISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTS MITOM
细胞培养实验的无菌化技术
The use of aseptic technique is essential for avoiding the production of infection whilst undertaking tissue culture activities. Many activities tak
Nature技术焦点：更好的细胞培养
细胞培养基技术领域的进展，能帮助科学家们更深入的了解这些混合物中的成分，以及细胞更喜欢怎样的天然环境——即使在实验室。 生物通报道：细胞能在实验室中茁壮成长，这无疑能令许多研究人员都松一口气，反之亦然，如果细胞即使在正确的营养培养基中都无法正常生长，这将会令实验停滞下来。 这也就是为什么细胞