几种海藻及海洋细菌的DNA制备方法

所周知,海藻由于富含多糖,DNA提取是一大难题,一下是本人在试验过程中收集的海藻DNA制备方法,经试验验证可行,现在贴出来,以觞众战友。一、可大量培养的海洋细菌1、取1ml目的菌菌液至1.5ml的EP管中,5000r/m离心5分钟弃上清,菌体加入500μl水洗涤一次,5000r/m离心5分钟,弃上清,向菌体中加入200μl悬浮缓冲液。2、在200μl悬浮缓冲液中加人55℃Tirs饱和酚200μl和10%的SDS 45μl混匀,在微型蜗旋混和仪上混匀,55℃温浴15分钟,并且不断振荡混匀。3、12000r/m离心5分钟,取上层水相移至新的EP管中。4、加入等量的氯仿/异戊醇抽提,12000r/m离心5分钟,转移上层水相至新管,反复抽提至界面澄清。5、取上层水相加入0.1倍的3M醋酸钠和2.5倍体积的无水乙醇混匀于-20℃放置2h沉淀DNA。6、12000r/m离心20分钟,沉淀DNA弃上清,用预冷的的70%的乙醇洗2次,在室温下晾......阅读全文

羧基化酵母-海藻酸钠复合微球制备及吸附性能

2019年10月,国内期刊《化学工程》在线发表了地下水文与生态效应教育部重点实验室、中国科学院藏药研究重点实验室研究人员题为"羧基化酵母- 海藻酸钠复合微球制备及吸附性能"的研究论文。在该论文中,研究人员用上海腾拔仪器公司的Universal TA质构仪测定羧基化酵母-海藻酸钠复合微球的硬度

海洋中丰富的细菌芽

  采集海水样本。   原绿球藻——这是海洋中最丰富的蓝细菌——一直在散布大量的含有蛋白质、DNA和RNA的菌“芽”。Steven Biller及其同事说,这些细菌性膜囊泡可能会对全世界的碳预算产生显著的影响。研究人员对在实验室中生长的原绿球藻的囊泡脱落进行了观察并检测了马萨诸塞州葡萄园海峡(

海藻糖的特性及功效

  海藻糖是一种安全、稳定的天然糖类,在自然界中许多可食用动植物及微生物体内都广泛存在,如人们日常食用的蘑菇类、蜂蜜、海藻类、酵母发酵食品中都含有含量较高的海藻糖,有些甚至含有占干重高达20%的海藻糖,自身性质非常稳定。海藻糖最令人称奇的生物学功能是优良的抗逆保护作用,许多在逆环境如干燥脱水、高温、

中科院海洋所卡拉胶海藻课题列入国家海洋公益项目

由中科院海洋所刘建国研究员主持,国家海洋局一所等单位参加 “高产卡拉胶海藻的规模栽培、高值加工与近海环境治理新技术示范”课题,日前列入国家海洋公益项目,这是中科院海洋研究所首次获得国家海洋公益项目立项课题。 这一课题由中国科学院海洋研究所刘建国研究员主持,国家海洋局一所等单位参加。课题拟开展热带产

海洋细菌推动碳储存

  近日发表在《自然—通讯》上的一项研究表明,海洋细菌可能是海洋中固碳的主要力量。这项发现指出,细菌在简单有机分子转化为抗降解的结构复杂的有机物过程中起到了关键作用。  浮游植物从大气中吸收二氧化碳后,使用光合作用和呼吸作用把二氧化碳转化成大量有机碳储备,这被统称为溶解态有机物(DOM)。溶解态有机

尿海藻糖酶的测定方法

酶活性的测定1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。2. 步骤将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1.5ml。将洗脱下来的标

尿海藻糖酶的测定方法

  一、酶活性的测定  1. 原理  利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成两分子葡萄糖,然后测定生成的葡萄糖浓度作为海藻糖酶的活性浓度。  2. 步骤  将尿液标本0.5mL通过5mmol/LpH为6.2的磷酸盐缓冲液平衡的SephadexG-25柱,以除去内源性葡萄糖。收集含蛋白的部分,将体积调整到1

海藻酸的鉴别方法

(1) 取本品约30mg,加氢氧化钠液(0.1mol/L)5ml,振摇使溶解,加氯化钙试液1ml,用玻璃棒搅拌,产生胶状沉淀物粘于玻璃棒上。(2) 取本品约30mg,加氢氧化钠液(0.1mol/L)5ml,振摇使溶解,加稀硫酸1ml,即产生胶状沉淀。(3) 取本品约10mg,加水5ml,加新制的1%

细菌中制备基因组DNA实验——氯化铯法

实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。实验材料细菌试剂、试剂盒溴化乙锭氯化铯丁醇仪器、耗材离心机巴斯吸管摇床实验步骤1.  培养100 ml

胸腺DNA的制备

实验概要本实验介绍了浓盐法小牛胸腺DNA制备的原理及操作步骤。实验原理DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物(DNP)后,必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺,鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA,可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖核蛋

细菌基因组DNA提取方法综述

细菌基因组DNA的提取方法综述,提供了5种方法。 1 快速微量提取法A.取1.5ml菌体培养物于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min, 丢去上清夜,收集菌体。B.加入400ul裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7.8)混匀,置于37oC水浴1hr

海藻胶、海藻面膜和海藻泥的物性如何分析?

海藻”是海带、紫菜、裙带菜、石花菜等海洋藻类的总称,是生长在海中的藻类,是植物界的隐花植物,藻类包括数种不同类以光合作用产生能量的生物。       海藻酸盐是组成褐藻细胞壁的天然多糖,主要以巨藻、泡叶藻、海带、裙带菜等大型褐藻为原料,通过生物和化工技术提取。海藻酸盐是一种水溶性膳食纤维,具

863计划海藻资源制备纤维及深加工关键技术通过验收

  2013年7月18日,“十一五”863计划海洋技术领域重点项目“海藻资源制备纤维及深加工关键技术开发”(2010AA093700)在青岛通过科技部组织的技术验收。   验收专家组对海藻纤维示范生产线进行了现场考察,审阅了相关验收资料,并听取了项目负责人关于项目实施情况的汇报。专家组认为,项目组

制备纯水有几种办法?

一、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水质。

DNA连接酶的连接方法有哪几种?

第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成

细菌的鞭毛免疫原常规制备方法

百分之0点3至百分之0点5的甲醛处理。首先要选择细菌株,用百分之0点3至百分之0点5的甲醛来对培养基系统消毒,然后进行细菌培养。在细菌的鞭毛免疫原常规制备过程中应注意控制细菌的温度、湿度及浓度,以保证细菌的培养和生长条件。

海洋升温正导致细菌蔓延

  近日,相关专业人士发出警告:海洋温度升高将会给人类带来严重的疾病,从而需要人类在医疗方面投入数百万欧元(美元)以治疗这些疾病。   据美联社消息,近日,这一消息发布在一网络论文集上,这一份厚达200页的论文集汇集了100多个研究项目的报告和论文,这些研究项目始于1998年,由欧盟资助完成。该论

用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片-DNA-提取方法

实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上,常规烘片,脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K(PK)10~15 μl,封口膜封口,置 55℃ 3 h 以

二甲基乙酰胺有几种制备方法

二甲基乙酰胺四种制备方法:二甲基乙酰胺,即N,N-二甲基乙酰胺,又名乙酰二甲胺、醋酸二甲基胺。无色透明液体。能与水、醇、醚、酯、苯、三氯甲烷和芳香化合物等有机溶剂任意混合。二甲基乙酰胺能溶解多种化合物,与水、醚、酮、酯等完全互溶,具有热稳定性高、不易水解、腐蚀性低、毒性小等特点,对多种树脂,尤其是聚

细菌RNA制备实验

革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取             实验材料 RNA 试

细菌RNA制备实验

实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1.  培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2.  于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.

新型防污涂层对细菌、海藻抑制率均达99%

 《先进材料界面》封底。严明龙提供 针对海洋环境中的生物污损问题,中科院宁波材料技术与工程研究所海洋实验室苛刻环境材料耦合损伤与延寿团队,着力开展了海洋防污附着机理与防治的前瞻研究,提出了基于多元协同增效防污和绿色防污的材料设计思路,开发

细菌DNA=未来光盘?

  英国《自然》杂志11日发表了一项生物技术重要成果:科学家利用CRISPR手段,成功将图片和视频短片编码进了细菌的DNA中,通过测序DNA再重新提取出来后仍相当准确。其证明了活细胞作为一种可靠媒介,存储一定数量的数据完全有可能。   CRISPR被称为“生物科学领域的游戏规则改变者”。最近的一些研

细菌DNA提取方案

细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法。一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟 离心10分钟

细菌DNA提取方案

细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法. 一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时.2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟.3、12000转/分钟离心10分钟

常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和...

常用培养基的制备、细菌接种方法、细菌生长现象观察和细菌的分布培养基的制备 原理 培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配置而成的一种混和营养基质,用以培养或分离各种微生物。因此,营养基质应当有微生物所能利用的营养成分(包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素)和水。根据微生物的种类和实

PNAS:海洋生物地理新发现-热带海域也是海藻天堂

对于背着水肺的潜水员而言,珊瑚礁往往是他们最爱去的地方,那里的热带生物多样性让蛙人们留连忘返。然而一项新的研究表明,这些热带水域同时还是海藻类植物的栖息地,传统观点认为,海洋生物多样性的热点地区应该是温度较低的水域。这一发现表明,海藻类植物可能比之前的预期更能适应气候变化。 美国加利福尼亚大学圣克鲁

DNA芯片的制备方式

DNA芯片又叫做基因芯片(gene chip)或基因微阵列(microarray),寡核酸芯片,或DNA微阵列,它是通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列以一定的排列方式使其附着在玻璃、尼龙等材料上面。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片。

酵母DNA的小量制备

            实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。

酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T