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【技术指南】流式细胞仪和流式细胞术

Jay Haron Ph. D. jay.haron@gmail.com BD Biosciences, San Diego, United States 引用 实验材料和方法 从1968年最早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来, 它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术,除成本因素外,还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测,缺少“通用”细胞通透物 质,细胞自发荧光的干扰效应,荧光分子间发射光谱的重叠,以及缺少可识别目标分子的试剂。特别是对于细胞分拣来说,由于液滴的形成收集、分拣细胞重分析或 培养前的稀释,以及为获得足够数量的可用细胞需要的时间延误的原因,还存在细胞存活问题。最后,特别是在处理低丰度对象时,数据分析也是很棘手的。有一篇关于 流式细胞仪理论的不错的......阅读全文

血细胞分析仪的检测技术及发展

  谈到血细胞计数仪的发展史,不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter,最初是一位广播电台的电器工程师,后来做过X光机的销售员和维修工程师,在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时,在一间地下

流式细胞术的工作原理与发展综述

摘要:流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。是一项多学科交叉研究的结晶。流式细胞术及流式细胞仪的出现融合了医学,计算机学,物理学等众多学科背景。。它不仅测量速度快、准确度好、灵敏度高,而且还

流式细胞技术的最新突破

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌,小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。作为应用流式细胞术进行检测的技术平台,现代流式细胞仪产生于上世纪六七十年代。经过近四十年的发展和完善,今天的流式细胞仪已经十分成熟,并被广泛的

高通量细胞分析产品推荐

  生化药物筛选虽然十多年前就已经规范化了,但药物疗效并不是总能实现预期效果的。在试管中看起来效果不错的靶标,在动物或者人类试验中却结果不佳,这一部分是由于毒性的问题,另外一部分则是由于药物在体内被处理的过程,与在单纯化学相互作用环境中的不同。科学家们希望能通过以细胞为基础的分析方法,来进行药物研发

质谱流式细胞技术汇总:单细胞,技术限制,分析方法等

生命科学中的技术往往会朝着两个方向发展,其一就是增加细胞特征分析数量,用以同时分析细胞的不同特点,其二就是增加分析的分辨率,从而提高观测精确水平。近几十年里,流式细胞技术的发展满足了这两个要求,精确分析单个细胞的多种特征,帮助科学家们了解复杂或多级细胞系统中的分子机理。近期研究人员将流式细胞技术与质

基于单细胞数据理解细胞变化过程—拟时间序列分..(一)

单细胞检测技术的发展为我们理解复杂生命体中细胞的组成与各自功能及变化过程提供了强有力的工具。基于单细胞基因表达谱数据,我们可以窥探发育过程中细胞内的调控变化,发现肿瘤微环境中的各类细胞及它们的细胞间交流,理解器官组织中复杂多样的细胞类型。现有单细胞研究是一个从整体到个体,再由个体特征重建整体的过程。

中国学者揭示小儿肠炎的“罪魁祸首”——环状AMP信号受损

  根据欧洲儿科胃肠病学肝病学和营养学会European Society for Paediatric Gastroenterology Hepatology and Nutrition (ESPGHAN)定义,小儿(<17岁)发作的肠炎为小儿肠炎(pediatric IBD,PIBD)【1】

实用技巧二——单细胞转录组高级分析之细胞谱系分析

  基于单细胞转录组数据的细胞轨迹分析常见形式有细胞变化轨迹分析和细胞谱系分析,在上一篇中,我们详细介绍了常规拟时间序列分析的相关内容(具体内容查看链接)。在这里,我们主要就细胞谱系分析进行介绍和解读。   细胞谱系分析,最简明的理解就是细胞领域的进化树,通常指的是某类祖源细胞,在特定条件下,有多

实用技巧二——单细胞转录组高级分析之细胞谱系分析

  基于单细胞转录组数据的细胞轨迹分析常见形式有细胞变化轨迹分析和细胞谱系分析,在上一篇中,我们详细介绍了常规拟时间序列分析的相关内容(具体内容查看链接)。在这里,我们主要就细胞谱系分析进行介绍和解读。   细胞谱系分析,最简明的理解就是细胞领域的进化树,通常指的是某类祖源细胞,在特定条件下,有多

Muse™智能触控细胞分析仪

        随着生命科学研究的深入,科学家们越来越关注细胞水平的研究,如何进行精确的细胞计数,活力评估,如何通过凋亡、周期全面评估细胞的状态,如果快速进行表型分析、磷酸化等细胞分析,已成为大家关注的重点。然而,

关注细胞分析!首届微纳流细胞分析学术报告会京召开

  分析测试百科网讯 2018年9月25日,首届微纳流细胞分析学术报告会在北京召开,百余位业内专家学者参与了此次报告会。本次大会为期两天,同期在清华大学化学系举办“第5期微流控芯片质谱联用细胞分析讲习会”。会议围绕着微流控及细胞研究领域的最新研究成果进行交流与探讨,关注微流控细胞分析基础研究与应用开

单细胞转录组高级分析之细胞谱系分析

基于单细胞转录组数据的细胞轨迹分析常见形式有细胞变化轨迹分析和细胞谱系分析,在上一篇中,我们详细介绍了常规拟时间序列分析的相关内容(具体内容查看链接)。在这里,我们主要就细胞谱系分析进行介绍和解读。细胞谱系分析,最简明的理解就是细胞领域的进化树,通常指的是某类祖源细胞,在特定条件下,有多个发育轨迹和

肿瘤学研究:细胞周期及凋亡全自动分析

摘要 在肿瘤学研究及治疗过程中,监控细胞周期及凋亡的状态是一个非常重要的指标。 与传统的检测方法相比,如流式细胞FACS,全自动高内涵成像分析系统可对原位(无需消化悬浮处理)细胞进行全自动成像,并完成单个细胞水平的多参数分析。MetaXpressTM图像分析及获取软件具有一系列常

林金明:CM-MS为细胞研究提供新工具

  分析测试百科网讯 中国有句古话,“工欲善其事,必先利其器”,在细胞分析方面的意义则是为了阐明细胞的生命过程,需要特殊的工具。细胞作为生命组成的基本单位,了解其相关的生物行为及其规律与本质,对于揭示生命的奥秘,探索疾病的机理与治疗手段,提高人类的生存寿命与质量,都有着十分重要的意义。  细胞的研究

自动细胞成像系统进行细胞表型的多参数评估

简介自动细胞成像是一种分析化合物对包括细胞形态,活力和标志物表达在内的细胞表型的影响的有效方法。这里,我们将展示ImageXpress® Pico自动细胞成像系统和CellReporterXpress 自动成像分析软件如何应用于化合物影响的表型分析。成像和分析方法可提供工具来鉴定细胞活力,细

CD34阳性细胞计数-2

其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查,如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异,但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展,他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并

流式细胞仪原理及及其在植物上的应用和选用(二)

2.1.2 流式细胞仪分选原理并不是所有的流式细胞仪都具有分选功能。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。由喷嘴射出的液流柱在电信号作用下发生振动,断裂形成均匀的小液滴。根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转,落

量化成像流式细胞技术在心血管研究中的应用

我国每5个成年人中就有1个心血管病患者,每10秒钟就有1人死于心血管疾病“,心血管疾病在致中国城镇与农村居民死亡疾病中占首位。因此可见,心血管疾病的预防与治疗是未来临床与科研重点关注的研究方向。转化医学这一概念的提出促进了临床实践向基础研究提出新的命题,基础研究提出可能的解决方案进行临床验证,相互转

INNOVATIS 细胞计数产品简介

Roche Innovatis AGQuality that counts自第一款全自动细胞计数系统Cedex 面世以来,Innovatis 的产品被全球众多的国际大型实验室和生物制药企业采用,成为生物技术市场的金标准。Innovatis 持续加大投入扩增产品线种类,目前已经成长为国际知名的细胞分析

流式细胞仪十大发展趋势

从二十世纪八十年代至今,世界上生产流式细胞仪的厂家几经变迁,BC & BD仍在,新玩家不断进入,并购重组各取所需,它们生产各种不同性能和功能的流式细胞仪。总体而言,呈现出以下的发展趋势:1. 应用对象从细胞到颗粒一般而言,流式细胞仪检测的对象是细胞,而且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞,即单

流式细胞仪的发展历史及其原理与应用进展(三)

20 世纪80 年代中期,国际上提出的白血病MIC分型法,标志着流式细胞仪及免疫分型在白血病诊断中的广泛应用。我国自80 年代中期引进该仪器,90 年代迅速发展,现在已得到普遍应用。这期间免疫标记方法已发生很大的变化,由开始的主要采用间接免疫荧光标记法到直接免疫荧光标记法,从单色或双色到利用

PNAS-杨弋等-二硫键蛋白质组学研究

人物简介: 杨弋 博士生导师 ,药学院、生物反应器工程国家重点实验室特聘教授。1973年4月出生。1990年由湖北省黄冈中学考入清华大学生物科学与技术系。1995年7月获得学士学位。同时被推荐为本系直硕生。1997年9月因成绩优异及论文工作突出,免试提前攻博。曾任校学生红十字会会长,生物系研究

血细胞分析仪50年发展历程和未来展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜,1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一

流式细胞仪Annexin V凋亡试剂盒一般染色检测方法

1.把将被染色分析的细胞用冷PBS洗涤二次并在恰当的染色缓冲液(binding buffer)中以1 x 106 细胞/mL的浓度重悬。(染色缓冲液,binding buffer,中必须含有钙离子) 2.吸取100ul的细胞(1 x 105)至试管中。(必须在室温下进行)3.加入适量的荧光标记的an

流式细胞术DNA分析影响因素探讨

  摘要 本文用流式细胞术对正常人外周血单个核细胞就不同试剂、不同获取细胞条件进行DNA含量分析。结果表明,正常人外周血单个核细胞的G0/G1、SPF、PI检出率所用染色试剂间均无明显差异(P>0.05),而APO、CV测定值随试剂不同有差异。获取5 000细胞/样品的CV值明显高于10 000细胞

流式细胞术的发展和临床应用

流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有100多台。  FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检

流式细胞术的发展和临床应用

流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有100多台。   FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞

流式细胞术在高等植物研究中的应用(二)

3.流式细胞术在高等植物中的应用3.1应用于植物中的特殊性由于植物细胞与动物细胞在结构上的差异,例如植物细胞具有细胞壁、特殊细胞器以及中央液泡等,因此流式细胞术应用于植物细胞时,在样品制备、染色、仪器的改造等方面都应适应植物细胞的上述特点。3.1.1制备植物染色体悬液的材料1984年De Laat和

1100学者齐聚杭州 第二届质谱大会开幕

  分析测试百科网讯 2015年10月17日,第二届全国质谱分析学术报告会(质谱大会)在浙江大学紫荆港校区体育馆盛大开幕,本次大会由中国化学会、国家自然科学基金委员会主办,中国化学会质谱分析专业委员会、浙江大学化学系承办。浙江大学副校长罗建红教授、南京大学陈洪渊院士、中