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如何选择毛细管柱?

柱长度的选择分辨率与柱长的平方根成正比。在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长。较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。一般来说:15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于扫描分析;30m的色谱柱是最常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。应该注意,柱长增加分析时间也增加。柱内径的选择柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低。分离复杂样品较好。0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%。0.53mm:具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。液膜厚度的选择液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。厚度增加,保留也增加。......阅读全文

毛细管电泳色谱仪整体柱制备

毛细管电泳色谱仪整体毛细管柱是采用有机和无机方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应或固化,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。整体毛细管柱按基质不同可分为无机基质整体毛

蛋白质纯化胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的partition色析法 (Pharmacia操作手册, Gel Filtration)。仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(fraction

毛细管电色谱仪整体柱技术

毛细管电色谱仪整体毛细管柱是采用有机和无机方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应或固化,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。整体毛细管柱按基质不同可分为无机基质整体毛细

Optima-2000DV ICP光谱仪保養及分析時注意事項

  Optima-2000DV 保養及分析時注意事項   分析時注意事項   檢查氬氣(Argon)是否充裕. 輸出壓力為80到120Psig.   檢查Shear Gas(Air or Nitrogen)輸出壓力是否正常: 80-120Psig.   Purge Gas(Nitrogen

蛋白质纯化胶体过滤法

实验概要本实验介绍了蛋白质纯化胶体过滤法,不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离。主要试剂1. 胶体Sephacryl S-300 (Pharmacia):a. 预先以缓冲液buffer A-150 平衡好,并且使完全沉降后的胶体体积,占全部体积的七至八成;要先预估好胶体

蛋白质的纯化实验

实验材料 Sephacryl S-300胶体试剂、试剂盒 缓冲液buffer A-150仪器、耗材 色析管柱铁夹试管铁架水平仪收集器浓缩用离心机 浓缩用离心管实验步骤 一、仪器设备色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(frac

GC毛细色谱柱五大进样方式

大口径毛细管柱的直接进样内径≥0.53mm的毛细管柱称为大口径毛细管柱,由于其内径比一般毛细管粗,柱的样品容量为填充柱的1/10~1/20,介于填充柱和常规毛细管柱之间,柱内载气流速可高达10~20mL/min,因此只需将气化室的内衬管和柱接头稍加改进,就可采用填充柱的进样口直接进样。 &

气相色谱柱毛细管柱的更换及安装使用

气相色谱柱毛细管柱的更换及安装使用(1) 把柱室降至室温(2) 关载气(3) 把毛细管两端的柱螺母松开并取下,卸下毛细管支架固定螺母。(4) 整体取出毛细管柱(5) 把毛细管柱螺母取下并清理石墨密封垫,取出护套及垫圈(6) 把毛细管柱两头堵死(7) 把毛细管支架换到新的毛细管柱上(8) 把支架上到支

蛋白质纯化胶体过滤法

不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的partition色析法 (Pharmacia操作手册, Gel Filtration)。仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(fracti

蛋白质的纯化实验

胶体过滤法             实验材料 Sephacryl S-300胶体

气相色谱仪维护--毛细管柱的更换及安装使用

(1) 把柱室降至室温(2) 关载气(3) 把毛细管两端的柱螺母松开并取下,卸下毛细管支架固定螺母。(4) 整体取出毛细管柱(5) 把毛细管柱螺母取下并清理石墨密封垫,取出护套及垫圈(6) 把毛细管柱两头堵死(7) 把毛细管支架换

蛋白质纯化胶体过滤法

蛋白质纯化胶体过滤法仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Ami

液固吸附色谱仪简介 (四)

八、动态顶空进样:气相毛细管柱色谱仪动态顶空进样是将惰性气体或氮气连续不断地通入液体或固体样品中,将挥发性组分从样品基质中吹扫出来,随气流进入捕集阱,捕集阱采用吸附剂或低温冷阱对吹扫出来的挥发性组分进行捕集,再经热解吸将组分送入气相毛细管柱色谱仪进行分析。这种技术又称吹扫捕集进样或连续气相萃取进样。

气相色谱仪进样系统(六)

(6)密封盖:顶空样品瓶的密封盖由金属盖和密封垫组成。1)金属盖:金属盖有可多次使用的螺旋盖和一次性使用的压盖。目前多采用一次性使用的铝质压盖。2)密封垫:密封垫主要采用硅橡胶、氟橡胶和丁基橡胶材质。①硅橡胶垫:耐高温性能好。②氟橡胶垫:惰性好。为防止密封垫对样品组分的吸附,目前多用聚四氟乙烯密封垫

如何提取总蛋白?

大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取(如 RIPA 裂解液),但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分,即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中。也就是说

气相色谱柱毛细管柱的更换及安装使用

 (1) 把柱室降至室温(2) 关载气(3) 把毛细管两端的柱螺母松开并取下,卸下毛细管支架固定螺母。(4) 整体取出毛细管柱(5) 把毛细管柱螺母取下并清理石墨密封垫,取出护套及垫圈(6) 把毛细管柱两头堵死(7) 把毛细管支架换到新的毛细管柱上(8) 把支架上到支架固定螺栓上并用毛细管

液固吸附色谱仪简介 (三)

五、大口径毛细管柱直接进样系统:大口径毛细管柱直接进样是所有气化的样品都进入大口径毛细管柱的进样方式。大口径毛细管柱(0.53mm)具有和常规毛细管柱(<0.32mm)同样的惰性,但柱容量比常规毛细管柱大的多,柱效介于填充柱和常规毛细管柱之间。因此,对于不太复杂和热不稳定样品的分析十分有效。1、结构

蛋白质纯化胶体过滤法

仪器设备:色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;分划收集器 (fraction collector, 需准备干净试管约100 支);浓缩用离心机 (低速5,000 rpm);浓缩用离心管Centriprep-30 (Amicon 4322)

胶体过滤法(Gel filtration)蛋白质纯化

一、仪器设备:1.色析管柱(Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;2.分划收集器(fraction collector, 需准备干净试管约100 支);3.浓缩用离心机(低速5,000 rpm);4.浓缩用离心管Centriprep-30 (Amicon

气相色谱仪维护--毛细管柱的更换及安装使用

1) 把柱室降至室温(2) 关载气(3) 把毛细管两端的柱螺母松开并取下,卸下毛细管支架固定螺母。(4) 整体取出毛细管柱(5) 把毛细管柱螺母取下并清理石墨密封垫,取出护套及垫圈(6) 把毛细管柱两头堵死(7) 把毛细管支架换到

气相色谱五大基本结构

 气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器,仪器型号繁多,但总的说来,其基本结构是相似的,主要由载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统以及数据处理系统构成。一、载气系统  载气系统包括气源、气体净化器、气路控制系统。载气是气相色谱过程的流动相,原则上说只要没有腐蚀性,且不干扰

气相色谱五大基本结构

气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器,仪器型号繁多,但总的说来,其基本结构是相似的,主要由载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统以及数据处理系统构成。 一、载气系统载气系统包括气源、气体净化器、气路控制系统。载气是气相色谱过程的流动相,原则上说只要没有腐蚀性,且不干扰样品分析的气体

气相色谱仪毛细管柱内表面的羟基化

在气相色谱仪毛细管柱内壁去活处理之前,无论是玻璃柱还是石英柱都要经过酸处理。目的是使毛细管柱内壁增加硅醇基,在下一步的去活化中降低或消除玻璃种类影响,从而制备出重现性好的毛细管柱。一、玻璃毛细管柱的沥取:玻璃毛细管柱的沥取是用酸或碱把内表面的金属离子除去,使玻璃表面形成丰富的硅醇基。用碱沥取时玻璃表

气相毛细管柱色谱仪进样系统概述(三)

3、操作参数:(1)分流阀打开的时间:打开分流阀的目的是用大流量(50~150mL/min)迅速将气化室中的残余样品蒸气吹去。如不及时打开分流阀,在分析过程中,残余蒸气可能不断被载气稀释,使组分峰严重拖尾。分流阀的打开时间要根据气化温度、载气流量和进样量等确定,一般为30~90s,zui优时间通过实

气相色谱仪毛细管柱内表面的羟基化

在气相色谱仪毛细管柱内壁去活处理之前,无论是玻璃柱还是石英柱都要经过酸处理。目的是使毛细管柱内壁增加硅醇基,在下一步的去活化中降低或消除玻璃种类影响,从而制备出重现性好的毛细管柱。一、玻璃毛细管柱的沥取:玻璃毛细管柱的沥取是用酸或碱把内表面的金属离子除去,使玻璃表面形成丰富的硅醇基。用碱沥取时玻璃表

高分辨气相色谱简述

HRGC在分离分析复杂有机化合物、天然产物、医药、环保等方面具有显著效果和特殊意义。与传统GC柱的主要差别在于HRGC柱是不装填充剂的空心柱,固定液相是涂渍或固定在柱管内壁上的。这种空心柱的渗透性很高,固定液量很少,这就使HRGC具有三大特点:分离效率高,一根20mm的色谱柱,总理论塔板数可达5万以

气相色谱仪的五大基本结构

 气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器,仪器型号繁多,但总的说来,其基本结构是相似的,主要由载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统以及数据处理系统构成。一、载气系统    载气系统包括气源、气体净化器、气路控制系统。载气是气相色谱过程的流动相,原则上说

毛细管色谱柱的选择

   毛细管色谱柱是目前气相色谱中用到zui多的色谱柱,可以说是气相色谱分离的核心,今天就和大家说说这一根毛细管色谱柱从选用、安装到保养维护乃至更换的那些事儿。看看一根毛细管色谱柱的一生都经历了什么,我们如何做能延长它的寿命呢?    分析

气相色谱柱的使用维护注意事项

气相色谱柱的使用维护注意事项1、气相色谱分析中,毛细管色谱柱的应用最为广泛,在食品安 全、环境保护、石油化工、电子电气等方面都有广泛应用。毛细管色谱柱的种类 极其繁多,仅是固定相就有上千种,同一固定相的色谱柱, 在柱长、柱内径、液膜厚度等参数上也有各种不同的规格。在日常分析工作中, 应如何选择合适的

气相色谱仪进样系统(四)

3、特点:(1)优点:1)有柱溶剂效应时,减小了溶剂峰拖尾,组分峰接近溶剂拖尾峰,组分峰变窄。2)不分流进样是高沸点痕量样品分析的方式。对于高沸点样品,不分流进样可以不考虑溶剂沸点,采用高的初始柱温以缩短分析时间。样品几乎(95%以上)全部进入色谱柱,比分流进样相应信号高1~3个数量级,特别适合稀释