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胶质细胞培养

取材及胶质细胞的混合培养1、P2 SD大鼠经低温麻醉后以碘酒和75%乙醇消毒,无菌操作下,断头放入预冷的D-Hanks液中,在解剖显微镜下取大脑皮层并除去脑膜。2、剪碎组织成1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min,中间摇晃一次。3、随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的MEM+10%FBS(Glial Medium,GM)的离心管内终止消化液作用5min。4、吸出组织转移到另一支装有冷的GM的离心管内,用火焰抛光的巴斯德滴管吹打数次,静置后取上清并吸到另一支离心管内。重复上述步骤2~3次。5、所得上清于800r/min离心5min,弃上清,管内加入新鲜GM并吹打成单细胞悬液。细胞计数,调整细胞密度按1.5×105/cm2种入 25cm2培养瓶,放入孵箱培养。以后每隔2~3d进行全量换液。摇床振摇分离星形胶质细胞和寡突胶质细胞培养至7~10天,换液后放入孵箱继续培养24h,取出拧紧培养瓶盖,于37℃恒温......阅读全文

小胶质细胞培养要添加丙酮酸钠吗

需要添加1mM丙酮酸钠。丙酮酸钠是糖酵解观察中的中间产物,可以直接进出细胞。添加到培养液中即为细胞提供能量,又是合成代谢所需的碳源。有些类型的细胞需要添加丙酮酸钠,降低血清浓度时也可添加,进行克隆培养时可添加。丙酮酸钠还有助于降低荧光物质引发的光毒作用。

脊髓星形胶质细胞机械性损伤的体外培养模型

1.材料与方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培养液终止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的单个细胞,进行细胞计数,按5 ×105 个Pcm2 密度进行接种。培养至第10天时加10mM Leu2methy12ester 除杀小胶质细胞。于16d

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

培养中(A172)人胶质母细胞瘤细胞/肿瘤细胞有哪些特点

培养中的肿瘤细胞具有哪些特点(一)形态和性状培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态,大多数肿瘤细胞镜下观察比二倍体细胞清晰,核膜、核仁轮廓明显,核糖体颗粒丰富。电镜观察癌细胞表面的微绒毛多而细密,微丝走行不如正常细胞规则,可能与肿瘤细胞具有不定向运动和锚着不依赖性有关。(二)生长增殖肿瘤细胞在体内具有不

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(二)

2. 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色 GC 蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状(图 3)。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞(图 4)。  Figure 1 Cells migrated from opti

细胞技术专题:大鼠视神经少突胶质细胞培养实验(一)

标签: 大鼠 视神经 少突 胶质 大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法牛血清培养法 实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。 实验材料W

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM

皮层星形胶质细胞的原代培养实验——贴附差异法

皮层星形胶质细胞的原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)皮层星形胶质细胞功能研究。实验方法原理利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的

视神经少突胶质细胞体外培养纯化及鉴定

1.材料和方法 1.1 DMEM/F12条件培养液(亚硒酸钠40μg·L-1,腐胺16.2 mg·L-1,转铁蛋白100 mg·L-1,胰岛素234U·L-1,甲状腺素0.4μg·L-1,黄体酮0.62 mg·L-1,谷氨酰胺3g·L-1)。DMEM/F12培养基、小牛血清购自Hy

星形胶质细胞条件培养液 为什么用无血清培养基

转铁蛋白是一种结合铁离子的糖蛋白,增加脂肪酸和葡萄糖的合成。胰岛素是大多数合成培养基的必须成份,对细胞生长起重要作用, 如可促进淋巴细胞增殖 , 它可刺激细胞对尿苷和葡萄糖的吸收以合成RNA、蛋白质和脂质。普遍认为胰岛素、乙醇胺和亚硒酸钠是无血清培养基中的主要成份、转铁蛋白细胞在无血清培养液中培养时

病人源性胶质母细胞瘤类器官培养新方法

  近日,美国宾夕法尼亚大学等科研机构的科研人员在Cell上发表了题为“A Patient-Derived Glioblastoma Organoid Model and Biobank Recapitulates Inter -and Intra-tumoral Heterogeneity”的文章

分析胶质母细胞瘤

在我的实验室中,我们正在研究星形胶质细胞的日常节律,这是在健康的大脑中发现的一种细胞类型。”“我们发现健康细胞中的某些细胞事件随一天的时间而变化。与鲁宾博士合作,我们询问胶质母细胞瘤细胞是否也有日常节律。如果是的话,这是否会使它们在某些时候对治疗更敏感?临床上很少尽管试验针对的是一个生物过程,但该过

神经胶质细胞的简介

  神经胶质是神经胶质细胞的简称。是神经组织中除神经元外的另一大类细胞,分布在神经元之间,形成网状支架。其数量比神经元多10-50倍。神经胶质细胞也具有多突起,但无树突和轴突之分。胞质内不含尼氏小体和神经原纤维,没有感受刺激和传导冲动的功能。但它们参与神经元的活动,对神经元具有支持、保护、营养、形成

神经胶质细胞有哪些

  1、星形胶质细胞  最大的神经胶质细胞,胞体直径3~5微米,核呈圆球形常位于中央,淡染。它有许多长突起,其中一个或几个伸向邻近的毛细血管,突起的末端膨大形成血管足突,围绕血管的内皮基膜形成一层胶质膜。某些星形细胞突起还附着在脑、脊髓软膜和室管膜的下膜上,把软膜、室管膜与神经元分隔开。星形细胞又分

神经胶质细胞的分类

中枢神经系统的胶质细胞分为两大类:一类为大胶质细胞,是中枢神经系统主要的胶质细胞成分,包括星型胶质细胞和少突胶质细胞;另一类包括小胶质细胞,室管膜细胞和脉络丛上皮细胞。周围神经细胞的胶质细胞主要有周围神经内的神经膜细胞和神经节内的被囊细胞,此外,包绕有被囊感觉神经末梢轴突终末的终末神经膜细胞,包裹运

小胶质细胞的活化

是CNS在许多病理条件见下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态,免疫表型与功能等一系列变化。细胞形态上,活化的小胶质细胞常表现为突起回缩,胞体相对增大乃至呈巨噬细胞样,免疫学表型的改变多为一些免疫分子如主要组织相容性抗原(MHC)等

小胶质细胞的简介

  1、神经胶质中具有吞噬功能的细胞。主要分布于大脑、小脑的皮质及脊髓的灰质,具有运动和吞噬神经组织废物的功能。  2、神经胶质细胞中最小的一种。胞体细长或椭圆。核小,扁平或呈三角形,染色深。细胞的突起细长,有分支,表面有许多小棘突。小胶质细胞的数量少,仅占全部胶质细胞的5%左右。中枢神经系统损伤时

小胶质细胞的活化

是CNS在许多病理条件见下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态,免疫表型与功能等一系列变化。细胞形态上,活化的小胶质细胞常表现为突起回缩,胞体相对增大乃至呈巨噬细胞样,免疫学表型的改变多为一些免疫分子如主要组织相容性抗原(MHC)等

星形胶质细胞的起源

星形胶质细胞是星形脑细胞的一个特殊亚群。虽然星形胶质细胞不像神经元那样为人所知,但它是神经元活动的关键,在各种神经系统疾病中发挥着重要作用。由里雅斯特国际高等研究学院(SISSA) Antonello Mallamaci领导的一项新研究,最近发表在《Brain Cortex》研究表明,在胚胎发育过程

小胶质细胞的介绍

小胶质细胞(microglia)是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%。小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和神经病理学研究表明激活的小胶质细

星型胶质细胞的细胞成分

  在用尼氏法等一般染色组织切片中,星形胶质细胞的核比其他胶质细胞的核大,呈圆形或卵圆形,常染色质多,异染色质少而分散,故染色浅,核仁不明显。胞质中没有尼氏体,但具有一般的细胞器。胞质中含有大量交错排列的原纤维,伸入到胞突中并与胞突平行行走,是构成细胞骨架的主要成分。原纤维的超微结构是一种中间丝,称

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠胚胎试剂、试剂盒L-15培养基胶原酶DnaseD-MEM-BSFCS-DMEM阿糖胞苷仪器、耗材离心机水浴锅培养瓶培养箱实验步骤一、分离大鼠胚胎(16-18周)新皮层,置于L-15(或Hank's平衡盐/DMEM溶液,无Hepes)培养基中,除去脑膜和血管、海马、尾核和其他非皮层

什么是星型胶质细胞?

  星形胶质细胞,是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板(footplate)或称终足(end

神经胶质细胞的发育过程

大部分的胶质细胞自发育中胚胎的外胚层组织衍生而来,特别是神经管及神经脊;唯一例外者为自造血干细胞衍生而来的小胶质细胞。在成人的身体中,小胶质细胞为可自我更新的一个族群,与中枢神经系统受损时会渗入的巨噬细胞及单核细胞有明显不同。在中枢神经系统,胶质细胞发育自神经管的脑室区(ventricular zo

星型胶质细胞的分类

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

星型胶质细胞的分类

  根据胶质丝的含量以及胞突的形状可将星形胶质细胞分为两种:纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质,突起细长,分支较少,胞质中含大量胶质丝,又称蜘蛛细胞(spider cell);原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte),多分布在灰质,

Cell综述:小胶质细胞疾病

  中枢神经系统的发育和维持依赖于小神经胶质细胞(microglia)的调控与稳定平衡,这种中枢神经系统中最小的一种胶质细胞是普通的免疫细胞,可以保护大脑免于损伤以及免于大脑疾病再生。  因此从另外一个方面来说,小神经胶质细胞的失调也与神经发育障碍(如自闭症),神经退行性疾病(如老年痴呆症),精神分

神经胶质细胞的相关作用

  (1)支持作用,由于神经胶质细胞广泛地紧密地包围着神经细胞,因而起到支持的作用。此外,在人、猴的大脑皮质及小脑皮质的发育过程中,神经元沿着神经胶质细胞突起的方向迁移到它以后“定居”的部位,所以,神经胶质细胞似乎为神经细胞的发育和组构(organization)提供了一定的基本支架。  (2)隔离

少突胶质细胞的简介

  少突胶质细胞分布于中枢神经系统。比星状胶质细胞小,其胞突短而少,细胞核呈圆形,小而致密,电镜下胞质电子密度高,主要含线粒体、核蛋白体和微管。在灰质,少突胶质细胞主要位于核周体附近;在白质,它们并排存在于有髓神经纤维之间,并构成髓鞘。组织培养中可见少突胶质细胞运动活跃。