反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲盐均没有紫外吸收,而且标准样品多为含苯环的物质,在254nm波长紫外吸收强,选择此波长检测可以避免流动相戏外吸收的干扰;柱温一般在室温下测定,均不超过30℃;对于通常的标准柱型,即Φ4.6mm×250mm的柱子来说,流速以1ml/min为宜。 柱压则为实测值,它不仅与色谱柱有关,而且取决于流动相,以及评价色谱柱的温度与流速。 二、反相色谱柱评价的标准物质 通常,以指定的一组标准溶质为样品,测定它们在柱子上的理论塔板数,以作为柱效的衡量指标。这种标准溶质的选择,因不同的色谱模式而异,也因不同的使用目的而有所不同。一般情......阅读全文
高效色谱仪色谱柱的总分离效能指标
根据高效色谱仪塔板理论,有效理论塔板数n有效是衡量柱效能的指标,表示样品组分在高效色谱仪色谱柱内的分配次数。但样品中各组分,特别是难分离物质对(即物理常数相近,结构类似的相邻组分)在一根色谱柱内能否得到分离,取决于各组分在固定相中分配系数的差异,也就是取决于固定相的选择性,而不是分配次
高效色谱仪色谱柱的总分离效能指标
根据高效色谱仪塔板理论,有效理论塔板数n有效是衡量柱效能的指标,表示样品组分在高效色谱仪色谱柱内的分配次数。但样品中各组分,特别是难分离物质对(即物理常数相近,结构类似的相邻组分)在一根色谱柱内能否得到分离,取决于各组分在固定相中分配系数的差异,也就是取决于固定相的选择性,而不是分配次数的多少。
色谱柱的种类与评价
一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。 不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。 色谱柱有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同,(包括接头、柱管等方面
色谱柱的种类与评价
一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。 不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。 色谱柱有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同,(包括接头、柱管等方面),还有径
色谱柱的种类与评价
色谱柱的种类与评价 一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。 不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。 色谱柱有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同,(包括接
色谱柱的种类与评价
一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。色谱柱有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同,(包括接头、柱管等方面),还有径向加压柱和夹套加
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合
反相色谱柱的优点和影响因素
液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等
简述反相HPLC色谱柱的再生步骤
1.取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。 2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。 3.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。 4.用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。 5.用25毫升正己烷冲洗色谱柱。
正相和反相色谱柱的区别
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流
反相色谱仪色谱柱的维护与清洗
色谱柱是反相色谱仪最主要的部件,被测样品能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性作用。因此,应注意色谱柱的维护与清洗,以延长色谱柱的使用寿命。一、色谱柱清洗体积确定:色谱柱清洗体积一般是柱体积的10~20倍。根据柱内径和柱长计算出柱体积,清洗时间可计算出。二、色谱柱清洗:为了使被测样品和杂质不
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱?
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu
探讨正相色谱柱与反相色谱柱的安装保存和检测
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达zu
对于色谱柱的评价相关介绍
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒
色谱柱的操作及性能评价
操作 安装 1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器
色谱柱填充和性能的评价
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>20µm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20µm时,湿法填充较为理想。填充方法一般有4种:①高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;②径向加压法,WatersZL;③轴向加压法,主要用于装填大直径柱;④干法。柱填充
导致液相色谱仪反相色谱柱污染的因素
反相色谱在高效液相色谱中是应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的。 反相色谱柱在分离检测过程中,分析物和基质污染能使固定相受到影响,使用过程中应当注意固定
液相色谱仪色谱柱性能的评价
液相色谱仪色谱柱性能的评价包括评价内容和评价方法等方面。一、评价内容: 1、分离效能。 2、对指定溶质的选择性。 3、在不同PH值介质中的稳定性。 4、不同批次但同型号填料间性能的重现性。 5、适宜的操作压力等。二、评价方法:以指定的一组标准溶质为样品,测定其在色谱柱上的理论塔板数,作为
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
反相高效液相色谱柱的维护如何?
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高。 在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一
高性能聚合物基质反相色谱柱
图1. ODP2 HP-4D与早期产品聚合物基质反相色谱柱(ODP-50 4D)相比,理论塔板数(N)提高了约2倍。 创新点: 与早期产品(ODP-50)比较理论塔板数提高了约2倍。 对高极性物质保留力强。 可以很好地分离蛋白质和药物。 图2. 各种色