时间分辨荧光分析法(TRFIA)

时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。 时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响,同时,荧光分析与普通分光不同,光电接受器与激发光不在同一直线上,激发光不能直接到达光电接受器,从而大幅度的提高了光学分析的灵敏度。但是,当进行超微量分析的时候,激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此,解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。 解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短,激发光消失,荧光也消失。不过有非常少的稀土金属(Eu、Tb、S......阅读全文

时间分辨荧光免疫测定的意义

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

时间分辨荧光免疫分析技术的原理

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起

什么是时间分辨荧光免疫测定?

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

时间分辨荧光光谱仪简介

  时间分辨荧光光谱仪是一种用于材料科学、信息科学与系统科学、电子与通信技术、航空、航天科学技术领域的物理性能测试仪器,于2015年4月11日启用。  主要功能  固定发射光波长,改变激发光波长,记录荧光强度随激发波长变化。发射光谱:固定激发光波长,记录不同发射波长处荧光强度随发射波长变化。通过对有

时间分辨荧光免疫分析的增强原理

解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复

什么是时间分辨免疫荧光技术

  什么是时间分辨免时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。疫荧光技术

时间分辨荧光免疫分析的分析原理

共有三个原理如下时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。分析原理在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本

荧光光谱实验技术——时间分辨技术

时间分辨发光光谱技术是基于不同发光体的发光衰减速率的不同,配置使用带时间延迟设备的脉冲光源(闪光灯或激光器)和带有门控时间电路的检测器件,通过选定延迟时间td和门控时间tg,对发射单色器进行扫描,得到时间分辨发射光谱,从而实现对光谱重叠但是发光寿命不同的组分进行分辨和分别测定。或者固定激发与发射波长

化学发光免疫技术与时间分辨技术的异同点

概念化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起

时间分辨荧光免疫测定的仪器原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

时间分辨荧光免疫分析技术的应用介绍

1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。2.病毒性肝炎标志物。3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)。4.药物。5.多肽类。

时间分辨荧光免疫测定的应用介绍

1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。2.病毒性肝炎标志物。3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)。4.药物。5.多肽类。

时间分辨荧光免疫测定的应用原理

解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复

超快时间分辨荧光光谱仪

  超快时间分辨荧光光谱仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2015年12月24日启用。  技术指标  1.范围:荧光测试波长范围230-850nm;950~1700nm;荧光寿命范围25ps-10s2.光源:,DeltaDiode-C1脉冲光源控制器(软件控制)高频脉冲光源DeltaDiode-28

时间分辨荧光免疫分析仪发展历史

  1979年,芬兰Wallac公司研发部的Soini和Hemmila首次提出了建立稀土离子标记物的“时间分辨荧光免疫分析”理论。  1983年,Soini和Kojola首先开发出以镧系元素为示踪物的时间分辨荧光测量仪,建立了新的非放射性微量分析检测技术。同一年,Pettersson等人运用此仪器首

时间分辨荧光免疫测定的分析原理

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起

时间分辨荧光免疫分析在乙肝病毒血清学标志物检测应用

乙肝病毒 (Hepatits B veius HBV) 感染是我国最常见的感染性疾病之一,而应用免疫技术测定 HBV 特异性抗原抗体是 HBV 感染诊断的主要手段。由于免疫学技术的不断发展,抗原抗体检测灵敏度明显提高,使低水平 HBV 感染得以检出,对临床诊断及流行病学有重要意义 [1] 。另外

荧光光谱仪的偏振荧光分析和时间分辨荧光分析

  1、偏振荧光分析。荧光体的荧光偏振与荧光各向异性值的测定,能够提供与荧光体在激发态寿命期间动力学相关的信息,因此荧光偏振技术被广泛应用于研究分子间的作用,例如蛋白质与核酸、抗原与抗体、蛋白质与多肽的结合作用等。  2、时间分辨荧光分析。由于不同分子的荧光寿命不同,可在激发与检测之间延缓一段时间,

时间分辩荧光技术在乙型肝炎血清学标志物临床检验中...

时间分辩荧光技术在乙型肝炎血清学标志物临床检验中的意义  慢性乙型病毒性肝炎( Chronic Viral Hepatitis B,CH-B )是一种严重危害人类健康的疾病,我国是病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒( HBV )感染率高达 57.63% ,即全国至少有  6 亿人感染过 HBV

多功能酶标仪时间分辨荧光法参数简介

  时间分辨荧光法(TRF)  1)波长范围 280~850nm,单色器递增量1nm。  2)数据采集可调  3)测读次数:1~100flashes,  4)测读延迟:0~600usec。  5)读取数据积分时间:50~1500usec。  6)发射光带宽:9nm。  7)激发光带宽:15nm。  

自动化荧光免疫分析系统—时间分辨荧光免疫分析仪

  时间分辨荧光免疫分析仪  (一)原理  属于非均相荧光免疫测定,镧系元素属于三价稀土离子,包括铕(Eu3+),钐(Sm3+),铽(Tb3+),钕(Nd3+)和镝(Dys+)等,它们的荧光寿命较长,尤其是Eu3+和Tb3+的荧光寿命特别长且荧光强。因此,时间分辨荧光免疫测定中多用Eu3+和Tb3+

时间分辨荧光免疫分析仪器的技术原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

时间分辨荧光免疫测定技术的原理和应用

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

时间分辨荧光光谱中信噪比与测量精度的提高

【摘  要】建立了随机噪音的经验模型,并通过计算机模拟超短寿命的荧光衰减过程,研究了利用取样法测量时间分辨荧光光谱实验中实验参数的选取对实验结果的影响。结果表明,增大“门宽”可以提高信噪比,从而实现微弱荧光信号的测量;减小“延时”可以提高时间分辨率,即提高测量精度;选取不同的“门宽”时,测量结果中各

时间分辨荧光免疫分析仪的定义和发展历史

  时间分辨荧光免疫分析仪是一种采用非放射性同位素免疫分析技术的体外微量分析仪器。根据荧光标记物的荧光光谱的特点,通过延缓测量时间,排除标本中非特异性荧光的干扰,达到准确定量分析的目的  1979年,芬兰Wallac公司研发部的Soini和Hemmila首次提出了建立稀土离子标记物的“时间分辨荧光免

时间分辨荧光免疫分析仪的应用和优缺点

  一、应用  时间分辨荧光免疫分析仪常用于蛋白质和多肽激素、半抗原、病原体抗原抗体、肿瘤标志物分析、干血斑样品、核酸及天然杀伤细胞的活力等方面的测定 [1] 。  二、优缺点  优点:使用镧系元素作为标记物,其在保证检测的灵敏度和特异性的基础上,通过时间分辨技术消除了背景荧光的干扰。检测多种抗原时

时间分辨荧光免疫分析仪的基本原理

  时间分辨技术,即各种组织、蛋白或其他化合物在激发光的照射下都能发出一定波长的荧光,如血清蛋白可发射出短波长的荧光(激发光波长280nm,发射光波长320~350nm),胆红素发出波长较长的荧光(激发光波长330~360nm,发射光波长430~470nm),这些荧光为非特异性荧光,干扰了荧光免疫测

操作时间分辨荧光免疫分析仪时的注意事项

  1. 使用环境:将仪器置于水平、稳固、洁净的地方。自然环境中稀土离子存在十分广泛,如空气灰尘和烟雾中,均有不同程度的含量,尤以北方地区为甚,所以应建立一个相对无尘的操作环境,防止器材、试剂和操作者在操作中不慎可能造成的污染。  2. 操作时按照实验室安全工作准则,戴手套穿工作服,不得戴首饰,以避

细胞介导细胞毒作用检测法:时间分辩荧光分析法

1)铕荧光检测法:标记靶细胞:1、EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖

在读板机上进行基于时间分辨荧光标记的Western-...(二)

灵敏度和动态检测范围使用GST进行灵敏度和动态检测范围测试,使用1X上样液三倍梯度稀释GST,然后加到4-20%梯度胶中跑胶30min,然后转印到Immobilon FL膜上,使用生物素标记的兔抗-GST标记2小时,之后与Eu-标记的链霉素孵育1小时,然后洗膜,晾干使用SpectraMax