层析柱上柱子后压力大怎么办
19是什么单位？MPa？先试试空白运行，就是不经过柱子光走系统，看看压力是多少，检查是否系统压力过大。如果系统压力正常，则检查溶液是否澄清，有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题，检查柱头是否堵塞，柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整，有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上，参照说明书清洗再生下填料。层析柱压力过大容易压碎填料，需要及时暂停减小压力后继续上柱。......阅读全文
实验室常用是什么规格的层析柱
层析柱是凝胶层析技术中的主体，我们研究所用的就是同兴玻璃仪器，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径
层析柱上柱子后压力大怎么办
19是什么单位？MPa？先试试空白运行，就是不经过柱子光走系统，看看压力是多少，检查是否系统压力过大。如果系统压力正常，则检查溶液是否澄清，有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题，检查柱头是否堵塞，柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整，有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上，参照说明书清洗再
层析柱的高径比如何影响树脂分离效果
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形
层析柱和固定化酶反应柱一样吗
物质经过固定化酶反应柱经过酶的催化，从柱后出来的是催化后的产物，是经过化学反应的，即酶的催化反应 物质经过层析柱只是一般的经过离子键或者疏水、亲和作用的的结合再解离的过程，甚至像凝胶过滤层析是不发生任何反应的
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析2
准备好恒流泵、分部收集器、核酸蛋白检测仪及记录仪打开柱上端的螺丝帽塞子，吸出层析柱中多余液体直至与胶面相切沿管壁将5%丙酮溶液0.6 mL小心加到凝胶床面上，应避免将床面凝胶冲起 （参考完成时间11：30）打开下口夹子，使样品溶液流入柱内，同时收集流出液，当样品溶液流至与胶面相切时，夹紧下口夹子按加
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析1
一、实验目的和内容目的：1. 掌握凝胶过滤层析的原理，掌握凝胶柱柱效测定方法；2. 熟悉凝胶层析的一般过程；3. 了解凝胶介质的选择原则和应用领域。内容：1. Sephadex G-50凝胶柱的装填；2. 凝胶柱柱效测定；3．凝胶再生的方法。二、实验仪器和试剂1. 实验仪器层析柱（1×40 cm），
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析3
当A量程开关选定在0-1.0A档时，此时数显板上显示和读数即为光吸收A的实际读数，如显示为080即表示为0.80A。当A量程开关切换在其它量程位置时，则数显光吸收A读数为:A量程选定在0-2.0档时，数显读数×2=实际光吸收读数AA量程选定在0-1.0档肘，数显读数×1=实际光吸收读数A（二）部分收
关于层析柱装柱、使用及相关注意事项
（1）、装柱前要仔细看填料的使用说明书，每种填料都有自己的特性，以及特殊的装柱方法，针对不同的空柱，也要注意方法可能不同；3、这一点非常重要：装柱包括以后使用中绝对不允许柱内进入气泡（bubble free），柱头事先也要排除气泡。（2）、填料要加水搅拌成均匀悬液，悬液浓度依填料而不同，一般70－8
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析4
（三）凝胶的选择 根据所需凝胶体积，估计所需干胶的量。 一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的 2 倍，例如 Sephadex G-200 的吸水量为 20 ， 1 克 Sephadex G─200 吸水后形成的凝胶体积约 40mL 。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细分
用层析柱纯化填料需要用酸碱进行前处理吗
从方法上来讲，主要是亲和层析、离子交换、分子排阻（分子筛）、疏水层析和反相层析这5种；但具体到每个实验，就会根据您的实验目的（蛋白的纯度、活性、量产以及用途的不同），以及蛋白本身的性质不同
实验室中所用的玻璃层析柱有那几种方式
一是下部带有活塞的玻璃管，活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的，这样可以不涂真空油脂，以免污染产品。如果使用普通的玻璃活塞，则真空油脂要小心地涂薄涂匀。 另一种是将玻璃管下端拉细，套上一段弹性良好的管子。这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的，普通橡皮管一般不可充作此用，因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂
层析柱进样方式大揭秘！点击查看最佳进样方式！
层析柱是一种广泛应用于生物化学和制药领域的分离技术，通过将混合物分离成不同的组分。在层析柱分离过程中，为了保证样品与固定相之间的充分接触，进样就成为了一个关键环节。在进样过程中，需要控制进样速度和精确控制进样量，以确保实验结果的准确性和可靠性。目前常用的层析柱进样方式主要有以下几种：1.手动进样手动
一文了解亲和层析柱装柱注意事项
亲和层析 一般用于纯化蛋白质和核酸等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差异性。下面我们来分析一下亲和层析过程中的注意事项。 1.上样 亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、
离子交换层析实验离子交换层析介质和层析柱的选择
实验步骤1. 离子交换凝胶的选择依据：（1）根据蛋白质的pH只稳定范围。蛋白质在等电点pI以上pH稳定时选择阴离子交换凝胶介质，在pI以下pH的稳定时，则选用阳离子交换凝胶介质。（2）根据特分离蛋白质的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白，选用如DEAE-Sephace
蛋白纯化时样品过完层析柱后放于4度能放多久
看具体是什么蛋白了，有些蛋白结构稳定可以在4度存放超过一周，有些蛋白结构不稳定需要纯化完立刻-80度冻上。同时还要取决于层析结束后的缓冲是否适合冻融，以及之后是否还有其他纯化步骤。不过不论哪种情况下最长也不要再4度存放超过一周，即使蛋白稳定但也是会有长菌的情况。
抗原标记蛋白复合体纯化实验——用P11离子交换层析柱
实验方法原理人 TATA 结合蛋白（TBP）能够结合不同类型的细胞内蛋白以形成不同的蛋白复合体，如 SL1、TFIID 和 TFIIIB。这些蛋白质分别是通过 RNA 聚合酶 I、II 和 III 的转录所必要的。所有这些不同的蛋白复合体在核抽提物中都能找到。用一个层析步骤，如 P11 离子交换柱，
大孔树脂/离子交换树脂/凝胶/硅胶/纤维类等色谱柱
GX中压玻璃层析柱简介：层析柱主要是根据要分离的植物有效成份（生物碱，多糖类，黄酮类，皂苷类等）、化工中间体（维生素，蛋白质，氨基酸，抗生素，核酸等）、活性物质等物质与层析柱内的不同填料（大孔树脂、离子交换树脂，凝胶，硅胶，纤维类等填料）：一、在不同的亲和度，二、在不同浓度的酸碱液下，三、在不同的极
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质）2.利用离子交换法，选取DEAE-阴离子纤维素DE5
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质）2.利用离子交换法，选取DEAE-阴离子纤维素
PPO粗酶液的纯化
实验概要本实验利用葡聚糖凝胶柱层析对PPO粗酶液进行了纯化。实验原理1. 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量
蛋白质分离和分析
基 本 方 案 可 溶 性 或 膜 结 合 抗 原 的 分 离材 料抗 体（Ab)-Sepharose (单兀 12. 2)活 化 的（对照）Sepharose填料，用于制 备 A b -Sepharose填 料（单 元 12. 2)，但去除了抗体或偶联时用无关抗体替代细胞或匀浆的组织T S A 溶
蛋白质分离和分析——免－疫－亲－和－层－析
详细阐述利用亲和层析分离蛋白质的过程，进行蛋白质分析时，需将此规模缩小至微量离心管中进行免疫沉淀过程，对于单一的蛋白质或由相同亚基组成的蛋白质，经单向凝胶电泳后检测到单一的 蛋 白 质 条 带对荧光染色法进行了阐述，它主要用于磷蛋白和糖蛋白的检测。为了确定蛋白质是否是特异性抗原，可采用相对应的抗体进
羟基磷灰石柱用于蛋白质层析实验（三）
选择合适的缓冲液可以有助于保持目标蛋白质的完整性，同时利于其吸附于 HA。这一步骤在平衡时最好已经完成，平衡时应该没有任何的磷酸盐，然后加载缓冲液。但是在经过几个循环后，填充柱便失效了。研究表明，低至 2rmnol/L 的磷酸盐可以延长层析柱的寿命，同时又兼顾目标蛋白质的纯度。磷酸盐与 ME
30类实验室仪器设备耗材配置清单最全汇总（18）
中药提取分离实验室仪器设备清单一、提取分离常规设备1 渗漉桶2 循环水真空泵3 多功能紫外分析仪4 三用紫外灯5 三用紫外线分析仪6 电热干燥箱7 电冰箱8 制备型高效液相仪9 分部收集器10 电加热套11 高效薄层层析板12 台天平13 电子分析天平二、各种规格层析柱1 层析柱(特大)2 层析柱(
PPO粗酶液的纯化——凝胶层析法
实验方法原理葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质）。实验材料PPO粗酶液试剂、试剂盒Tris-HCL缓冲液NaCL
PPO粗酶液的纯化
凝胶层析法 实验方法原理 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 乙腈碳酸氢铵TE 溶液放射性标记寡核苷酸仪器、耗材 离心干燥机微量离心管放于管架或收集器Sep-Pak 经典层析柱注射器实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。乙腈（5%、30% 和 100%)毎个 Sep-Pak C18 柱用 10 ml 髙效液相（HPLC) 级乙腈（100
用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 乙腈 碳酸氢铵 TE 溶液 放射性标记寡核苷酸 仪器、耗材 离心干