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食管鳞癌淋巴结转移的蛋白质组分析

摘 要:分析食管鳞癌转移淋巴结中鳞癌细胞与食管鳞癌组织中鳞癌细胞的蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。用激光捕获显微切割技术分离出食管鳞癌转移淋巴结和食管鳞癌组织中较纯的鳞癌细胞,运用双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,并用免疫印迹技术对差异候选蛋白进行分析、验证。发现29 个差异蛋白点,通过质谱鉴定出6 种有意义的蛋白,转移淋巴结中的鳞癌细胞中如peroxiredoxin 1 等5 种蛋白表达明显增高,1 种蛋白MTCBP21 表达下调。因此激光捕获显微切割可以有效地解决组织异质性的问题;食管鳞癌组织中的鳞癌细胞与转移淋巴结中的鳞癌细胞的22DE 蛋白质图谱具有明显的差异表达,提示食管鳞癌的淋巴结转移过程的发生是多种蛋白质功能共同作用的结果,从而造成肿瘤细胞迁移性和侵袭性的进一步增强。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

四款主流的激光捕获显微切割平台(下)

  目前市场上主要有四家公司提供激光显微切割的平台,他们分别是Arcturus/Life Technologies、徕卡、蔡司和MMI。在上一篇文章中,我们介绍了前两个,这回则带您看看MMI和蔡司的产品,以及新手该如何选择。   MMI   瑞士MMI公司的单细胞获取平台有两大旗舰产品:Ce

四款主流的激光捕获显微切割平台(上)

  众所周知,哺乳动物组织并非同源的。它是由不同的细胞类型组成,其功能、形态和基因表达皆不同。在很多时候,我们开展组织水平的研究,测定肝脏或肿瘤的基因表达,其实这样只能得到混合群体的平均数。通常我们会忽略个体差异,但最近发表在《Cell》杂志上的一篇文章为我们敲响了警钟。   怀特黑德生物医学研究

激光显微切割品牌浅谈

一、激光显微切割的原理激光显微切割技术是在显微镜下通过切割系统对目的材料进行切割分离收集的技术。其核心技术是利用激光对显微镜下的生物样本(组织,细胞簇,单细胞,染色体,染色体片断等)进行无接触显微切割和分离,保证样品无污染、精度高(切割精度可达1个微米).二、各品牌比较厂商 原理 采用激光 显微镜类

经激光捕获显微切割和PCR证实的伯克霍尔德菌所致感染...

经激光捕获显微切割和PCR证实的伯克霍尔德菌所致感染性肉芽肿病病例分析伯克霍尔德菌是革兰染色阴性的需氧杆状细菌,通常在全球范围广泛存在于土壤和地下水。伯克霍尔德菌既是人类的病原菌,也是植物的病原菌。一般认为感染发生的机制是:皮肤被刺伤后伤口暴露于受污染的地下水或土壤,导致病原菌接种于伤口而发病[1]

免疫印迹与免疫检测实验——转移槽转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤1.  制备抗原样品,并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白,在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2.  电泳完成后,拆卸凝胶夹层,去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 min。3

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

免疫印迹与免疫检测实验——半干转移系统转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材半干燥转移装置滤纸实验步骤1.  制备样品,并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。 2.  准备转印膜3.  拆卸凝胶夹层,除去积层胶。4.  组装转印夹层:Mylar聚酯薄膜屏蔽物3张以转移缓冲液饱和的滤纸已平衡的转印膜凝胶3张以转移缓冲液饱

蛋白质免疫印迹实验

这是一个建立在 B urnette 实验方案基础上的实验流程,小于 80k D a 的蛋白质的转移效果很好并且结果稳定, 重复性好。应用这种膜转移方法,我们利用多克隆抗体在下面的样本中检测目的蛋白:哺乳动物细胞和细菌溶解产物、细胞培养上清、组织提取物以及组织液。虽然下列实验条件是根据我们自己的实验需