基因检测的基本程序

基因检测是如何进行的呢?用专用采样棒从被测者的口腔黏膜上刮取脱落细胞,通过先进的仪器设备,科研人员就可以从这些脱落细胞中得到被测者的DNA样本,对这些样本进行DNA测序和SNP单核苷酸多态性检测,就会清楚的知道被测者的基因排序和其他人有哪些不同,经过与已经发现的诸多种类疾病的基因样本进行比对,就可以找到被测者的DNA中存在哪些疾病的易感基因。基因检测不等于医学上的医学疾病诊断,基因检测结果能告诉你有多高的风险患上某种疾病,但并不是说您已经患上某种疾病,或者说将来一定会患上这种疾病。......阅读全文

KERN卤素水分测定仪的基本干燥程序

  KERN卤素水分测定仪主要用于对固体含水量的测量,对样品的要求是要粉末和颗粒状。科恩的水分测定仪采用的是400瓦的卤素灯进行加热(某些产品还有通过红外加热器进行加热),使测量的结果更快也更准确。   KERN水分测定仪有4种基本的干燥模式:   标准干燥 : 启动后直接升温到设定温度。   快速

常用电镜原位杂交技术的基本程序

原位杂交技术自创立以来,为基因的定位和表达、基因进化、发育生物学、肿瘤学、微生物学、病理学、医学遗传学和遗传分析等领域研究提供了极其宝贵的资料,发挥了其他技术难以取代的作用。但不论是使用放射性核素探针,还是非放射性探针,大部分研究工作都还限于光镜水平。为了对检测的靶核酸进行更精确的亚细胞定位,以及能

阻断ELISA检测法操作程序

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤

罗氏TUNEL细胞凋亡检测程序

一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的 dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,

细菌染色的基本程序中革兰染色的用途

先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,还能使细菌吸附在玻片上,保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力,更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同,而将细菌加以区分。革兰阳性

细菌染色的基本程序中革兰染色的用途

先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,还能使细菌吸附在玻片上,保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力,更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同,而将细菌加以区分。革兰阳性

贫血的实验室检测程序和诊断

贫血的诊断主要依靠检查外周血的血红蛋白(Hb)、红细胞数(RBC)和红细胞比积(Hct)。贫血的形态学分类需要借助红细胞三个平均值等参数。网织红细胞计数是每个贫血病人必须检查的项目,它对于鉴别贫血的基本性质有重要意义。直方图的观察分析,血涂片红细胞形态、大小等特征的观察对贫血的鉴别诊断有重要参考价值

贫血的实验室检测程序和诊断

  贫血的诊断主要依靠检查外周血的血红蛋白(Hb)、红细胞数(RBC)和红细胞比积(Hct)。贫血的形态学分类需要借助红细胞三个平均值等参数。网织红细胞计数是每个贫血病人必须检查的项目,它对于鉴别贫血的基本性质有重要意义。直方图的观察分析,血涂片红细胞形态、大小等特征的观察对贫血的鉴别诊断有重要参考

基因检测基本原理以及应用现状

  1990年,人类基因组计划启动,目的在于对人类46条染色体DNA的碱基排序工作,以解开各种基因的遗传密码。2000年6月完成人類基因组图谱的草图。2003年4月提前完成人类基因组定序。  一、DNA的基本概念  俗话说种瓜得瓜、种豆得豆,儿女能够继承父母的某些生理特征,是由于生物体内具有DNA(

HIV核酸检测:定性与定量检测方法及程序的区别

随着生物技术的发展,核酸检测得到了人们越来越多的重视,它可直接检查HIV RNA,可在发现血清学变化之前检测HIV感染,而且比P24抗原检测方法更灵敏。简单的说就是病毒感染人体后,一般情况下可通过一系列检测被发现,而最早能被检测到的是病毒核酸。现有的酶联免疫等血清学检测方法检测的是抗原或抗体,而

杂交瘤技术基本程序与方法8

(3)间接血凝试验 间接血凝试验又称被动血凝试验(PHA),是目前应用较广的检测方法之一。本试验是以包被可溶性抗原的红细胞作为指示系统,当被检抗体与包被在红细胞上的抗原产生特异性反应时,导致红细胞呈凝集现象。可见,该法具有灵敏、快速、容易操作和无需昂贵仪器等优点,而且经改用醛化红细胞以后,克服原来重

杂交瘤技术基本程序与方法6

③全菌抗原的ELISAS a、新鲜培养的细菌用蒸馏水或PBS悬浮,并调整细菌浓度至1×108个/ml。必须指出,对于人畜共患病病原体需注意安全操作,最好是灭活处理。 b、每孔中加100ul 5%戊二醛溶液(0.1mol/L NaHCO3 95ml+25%戊二醛溶液5ml),37℃作用2小时,蒸馏水洗

杂交瘤技术基本程序与方法10

(2)杂交瘤细胞的复苏 杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞或其他细胞在液氮中保存,若无意外情况时,可保存数年至数十年。复苏时融解细胞速度要快,使之迅速通过最易受损的 -5℃?0℃,以防细胞内形成冰晶引起细胞死亡。 通常情况下,冻存时细胞数量多,生长状态好的杂交瘤细胞系以及其他细胞的复苏可采用以下方法,这也是各个

杂交瘤技术基本程序与方法7

 ⑦Dot-ELISA试验 免疫斑点试验(Dot-ELISA)是以硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜为固相载体,进行抗原抗体反应的免疫检测手段。该法采用不溶性底物(如DAB,或4-氯萘酚或AgNO3等),其与相应标记物(HRP、AP、胶体金)作用形成不溶性产物,呈现斑点状着色,从而易于判定结果。根据所用的标

杂交瘤技术基本程序与方法9

 (1) 有限稀释法 材料: a、96孔细胞培养板等; b、HT培养基; c、活力强的杂交瘤细胞; d、小鼠腹腔细胞。 方法: a、制备小鼠腹腔细胞。同“细胞融合”一节中的方法。 b、制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞3中不同的稀释度。 c、

杂交瘤技术基本程序与方法11

(A)免疫扩散法 这种方法简便、准确,最常用。被检的McAb样品通常为杂交瘤细胞培养上清液,由于其中单抗的浓度较低,应先将其浓缩10-20倍左右再检测。小鼠腹水中的单抗浓度虽很高,但也含有小鼠本身的各类Ig,它们也会与相应抗血清发生反应,使鉴定结果出现混乱,即使将腹水稀释10-20倍后再检测也不能完

杂交瘤技术基本程序与方法2

2、细胞融合 (1)主要试剂的配制 ①细胞培养基杂交瘤技术中使用的细胞培养基主要有RPMI-1640或DMEM(Dulberco Modified Eagles Medium)两种基础培养基,具体配制方法按厂家规定的程序,配好后过滤除菌(0.22um),分装,4℃保存。 •不完全RPMI-1640培

杂交瘤技术基本程序与方法5

下面简要介绍几种常用的抗体检测方法 (1)免疫酶技术 免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性和酶对底物显色反应的高效催化作用有机结合而成的免疫学技术。由于它特异性强,灵敏度高,现已广泛用于筛选和鉴定单抗。 ①器材和试剂 a、包被缓冲液: 碳酸盐缓冲液:取0.2mol/L Na2CO3 8ml,0.2mo

杂交瘤技术基本程序与方法4

4)饲养细胞(Feeder cells)的制备 在细胞融合后选择性培养过程中,由于大量骨髓瘤细胞和脾细胞相继死亡,此时单个或少数分散的杂交瘤细胞多半不易存活,通常必须加入其他活细胞使之繁殖,这种被加入的活细胞称为饲养细胞。饲养细胞促进其他细胞增殖的机制尚不明了,一般认为它们可能释放非种属特异性的生长

杂交瘤技术基本程序与方法3

⑥7.5% NaHCO3溶液 称取分析纯NaHCO3 7.5g,溶于100ml超纯水或四蒸水中,过滤除菌,分装小瓶(4-5ml/瓶),盖紧瓶塞,4℃保存。 ⑦HEPES溶液(1mol/L) 称取23.83g HEPES(N-2-Hydroxyethylpiperazine-N,-2-ethanesu

杂交瘤技术基本程序与方法1

一、杂交瘤技术的诞生 淋巴细胞杂交瘤技术的诞生是几十年来免疫学在理论和技术两方面发展的必然结果,抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以及其多样性产生机制的揭示等,为杂交瘤技术提供了必要理论基础,同时,骨髓瘤细胞的体外培养、细胞融合与杂交细胞的筛选等提供了技术贮备。1975年8月

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

1、直接ELISA试剂盒本法首要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,直接ELISA的操作程序如下:(1) 资料① 包被液、洗刷液、保温液、底物液、停止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参阅血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。(2)

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

  抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。  在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。  酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA,即我们通常所指的ELISA(微量板ELISA);另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA,称为斑点ELISA(Dot-ELISA);再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA,称为布ELISA(C-ELISA)。

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原

检验程序的质量保证程序

  1.1  检验程序的质量保证1.1.1概述  采取有效措施,对检验的过程进行质量监控,以提高检验工作能力,确保检验结果的有效性和准确性。1.1.2 职责1.1.2.1质量负责人组织完成上级下达的样品考核任务;负责审批质量控制活动计划;组织对上述活动的可行性和有效性评审。1.1.2.2质控组负责制

基因的基本特点

基因有两个特点:一是能忠实地复制自己,以保持生物的基本特征;二是在繁衍后代上,基因能够“突变”和变异,当受精卵或母体受到环境或遗传的影响,后代的基因组会发生有害缺陷或突变。

罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序

(In situ cell death detection kit-POD法)一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dU

农残检测仪的操作程序简介

  操作程序  为了使检测结果更趋准确合理,请用户严格按照本仪器的操作程序来进行操作,如果误操作本仪器会出现报警提示。  1、接通电源 仪器右侧开关拨至“开”的状态,打开上盖,等仪器自检程序完成(约5-8秒),按“START”预热,此时LED屏幕显示当前正在上升的温度。当达到设定温度TEMP(39℃